实验诊断学：临床微生物检查

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1、临床微生物检查临床微生物检查某年某年9 9月某日晚上，某院急诊科一病人。月某日晚上，某院急诊科一病人。突然起病，寒战、剧烈头痛、恶心呕吐。突然起病，寒战、剧烈头痛、恶心呕吐。面色潮红、眼结膜充血、咳嗽。面色潮红、眼结膜充血、咳嗽。左耳红肿热痛，体温左耳红肿热痛，体温4040。案例分析案例分析医生及时抽血进行血液培养，血常规白细医生及时抽血进行血液培养，血常规白细胞增高及核左移。胞增高及核左移。初步诊断败血症，收入院，使用泰能。初步诊断败血症，收入院，使用泰能。但是使用泰能但是使用泰能3 3天，病人症状没有改善，血天，病人症状没有改善，血液培养阴性，给家属下病危通知书。液培养阴性，给家属下病危通

2、知书。案例分析案例分析请南方医院专家会诊，详细询问病史和仔细请南方医院专家会诊，详细询问病史和仔细体查，得到重要线索。体查，得到重要线索。病人一周前爬过白云山，躺在草地上休息。病人一周前爬过白云山，躺在草地上休息。病人左耳有似被蚊虫叮咬后形成焦痂。病人左耳有似被蚊虫叮咬后形成焦痂。案例分析案例分析怀疑恙虫病，外裴试验阳性。怀疑恙虫病，外裴试验阳性。-内酰胺类药物对恙虫病无效，首选四环素内酰胺类药物对恙虫病无效，首选四环素类抗生素，类抗生素，1 1天后退热，继续用药天后退热，继续用药1 1周，病人周，病人康复出院。康复出院。“临床微生物检查临床微生物检查”重要性：明确临床诊断重要性：明确临床诊断

3、和指导临床合理用药。和指导临床合理用药。案例分析案例分析“临床免疫学检验临床免疫学检验”实验室：实验室：酶链免疫吸附酶链免疫吸附试验（试验（ELISAELISA）、）、胶体金层析试纸条、化学胶体金层析试纸条、化学发光或电化学发光、乳胶凝集方法。发光或电化学发光、乳胶凝集方法。检测肝炎病毒、性病、呼吸系统病原体抗原检测肝炎病毒、性病、呼吸系统病原体抗原或抗体。或抗体。检验科三个实验室合作检验科三个实验室合作“临床微生物检查临床微生物检查”“临床分子生物学检验临床分子生物学检验”实验室：实验室：荧光定量荧光定量PCRPCR方法，定量检测病原体基因。方法，定量检测病原体基因。“临床微生物学检验临床微

4、生物学检验”实验室（重点）：实验室（重点）：细细菌真菌涂片检查、培养鉴定、耐药性检查。菌真菌涂片检查、培养鉴定、耐药性检查。检验科三个实验室合作检验科三个实验室合作“临床微生物检查临床微生物检查”第一部分第一部分 细菌真菌涂片检查细菌真菌涂片检查第二部分第二部分 细菌真菌培养鉴定细菌真菌培养鉴定第三部分第三部分 细菌真菌耐药性检查细菌真菌耐药性检查Part 1 Morphological examinations of bacteria and fungi1 non-stained.2 gram stain,bacteria and fungi.3 acid-fast stain,acid-f

5、ast bacillus.4 Indian ink stain,cryptococcus.single-celled,budding forms called yeast(spore).multicellular,filamentous forms called mold(spore and hypha).dimorphic fungi,exist in two distinct morphologic forms.1 Non-stainedSkin scraping,nail scraping,hairs.Employing a drop of potassium hydroxide(15%

6、)on a glass slide over the surface of the specimen.hairsSkin scrapingRoutine urine examinationBasic principle?Peptidoglycan.Procedure?crystal violet,iodine,alcohol.carbofuchsin red.2 Gram-stainedResults,G+or G-bacteria,cocci or bacilli bacteria,bacteria or fungi,in oil immersion field.2 Gram-stained

7、fungi in urinepositive cultured bloodpositive cultured bloodpositive cultured bloodpositive cultured bloodpositive cultured bloodpositive cultured bloodpositive cultured bloodsputumsputumsputumsputumsputumWBC25/LP上皮细胞上皮细胞 10 every visual field.acid-fast bacilli from sputum（+）Cryptococcus in cerebros

8、pinal fluid.Basic principle?capsule.Procedure?sediment.4 the Indian ink stain Cryptococcus neoformansgerminative Advantages.cheap,rapid,diagnose primarily.Disadvantages.Not accurate.Part 1 Morphological examinations of bacteria and fungi第一部分第一部分 细菌真菌涂片检查细菌真菌涂片检查第二部分第二部分 细菌真菌培养鉴定细菌真菌培养鉴定第三部分第三部分 细菌真菌

9、耐药性检查细菌真菌耐药性检查第二部分第二部分 细菌真菌培养鉴定细菌真菌培养鉴定一、血液一、血液二、尿液二、尿液三、粪便三、粪便四、呼吸道四、呼吸道五、穿刺液五、穿刺液六、分泌物六、分泌物一、血液的细菌真菌培养鉴定一、血液的细菌真菌培养鉴定 Etiologic Examination of Blood and Bone MarrowEtiologic Examination of Blood and Bone Marrow目的和意义；目的和意义；采血指征；采血指征；采血注意事项采血注意事项;结果报告形式。结果报告形式。目前我国社会老龄化日趋严重，慢性病及目前我国社会老龄化日趋严重，慢性病及恶性肿

10、瘤、器官移植、爱滋病和结核病病人不恶性肿瘤、器官移植、爱滋病和结核病病人不断增多，侵袭性诊疗技术广泛应用，败血症发断增多，侵袭性诊疗技术广泛应用，败血症发病率不断增加。病率不断增加。败血症病死率败血症病死率30%30%以上；以上；早期病原学诊断和早期病原学诊断和合理抗生素治疗，明显降低败血症病死率。合理抗生素治疗，明显降低败血症病死率。血液培养的送检指征：血液培养的送检指征：发热发热3838，或低温或低温36101010109 9/L L，“核左移核左移”白细胞增多；白细胞增多；粒细胞减少，成熟的多核白细胞粒细胞减少，成熟的多核白细胞19090次次/分；呼吸频率分；呼吸频率2020次次/分；分

11、；二氧化碳分压二氧化碳分压32mmHg32mmHg；昏迷；多器官衰竭；昏迷；多器官衰竭；血清降钙素原和血清降钙素原和C C反应蛋白升高；反应蛋白升高；严重局部感染（如严重肺炎同时采痰液和血液）。严重局部感染（如严重肺炎同时采痰液和血液）。最好在抗生素使用前采集，最好在抗生素使用前采集，若已用抗菌药须，则尽量避开血药浓度的高若已用抗菌药须，则尽量避开血药浓度的高峰期，最好在下次用药前。峰期，最好在下次用药前。血液标本采集时间血液标本采集时间血液标本采集时间血液标本采集时间建议第一次可在病人发热初期或高峰期采集，建议第一次可在病人发热初期或高峰期采集，根据病人发热情况，在根据病人发热情况，在242

12、4h h内再取内再取2-32-3次标本，次标本，最好每次最好每次“双套双套”“”“双瓶双瓶”，“双套双套”指不同采血部位，指不同采血部位，“双瓶双瓶”指需氧瓶和厌氧瓶。指需氧瓶和厌氧瓶。血液标本采集时间血液标本采集时间需氧瓶，中和抗生素的树脂瓶需氧瓶，中和抗生素的树脂瓶厌氧瓶，营养丰富，提高兼性厌氧菌检出率厌氧瓶，营养丰富，提高兼性厌氧菌检出率血液量血液量3-10ml3-10ml，8-10ml8-10ml最佳。最佳。儿童瓶，中和抗生素的树脂瓶儿童瓶，中和抗生素的树脂瓶血液量血液量1-3ml1-3ml。注射器采血后，将血注射器采血后，将血培养瓶帽子揭下，橡培养瓶帽子揭下，橡皮由金属皮（围脖）皮由

13、金属皮（围脖）固定于瓶上；固定于瓶上；将橡皮塞用将橡皮塞用70%70%酒精消酒精消毒，注射器针头刺穿毒，注射器针头刺穿橡皮塞将血注入培养橡皮塞将血注入培养瓶内；瓶内；橡皮塞裸露即可。橡皮塞裸露即可。已采集血液的培养瓶尽快送检。已采集血液的培养瓶尽快送检。立即放入自动血液培养及检测仪器立即放入自动血液培养及检测仪器。阳性初步结果报告：阳性初步结果报告：仪器阳性报警，仪器阳性报警，90%90%以上阳性标本以上阳性标本24h24h内检出；内检出；取出阳性瓶，对血液涂片及革兰染色；取出阳性瓶，对血液涂片及革兰染色；立即将涂片结果（立即将涂片结果（G+G+、G-G-细菌，球菌或杆菌，细菌，球菌或杆菌，或

14、真菌）作为危急值报告电话通知相应科室，或真菌）作为危急值报告电话通知相应科室，或在网上发出。或在网上发出。结果报告形式结果报告形式阳性最终结果报告：阳性最终结果报告：将阳性血液接种血平板培养细菌；将阳性血液接种血平板培养细菌；第二天将血平板上生长的细菌鉴定及第二天将血平板上生长的细菌鉴定及MICMIC法药法药敏试验；敏试验；第三天发鉴定及第三天发鉴定及MICMIC法药敏结果的正式报告。法药敏结果的正式报告。结果报告形式结果报告形式血液中分离750株菌主要种类及构成比%阴性结果报告：阴性结果报告：自动化仪器培养自动化仪器培养5 5天仍为阴性，发阴性报告。天仍为阴性，发阴性报告。结果报告形式结果报

15、告形式二、尿液的细菌真菌培养鉴定二、尿液的细菌真菌培养鉴定 Etiologic Examination of UrineEtiologic Examination of Urine目的和意义；目的和意义；采集方法采集方法;结果报告形式。结果报告形式。检测泌尿系统感染；检测泌尿系统感染；细菌和真菌培养、菌落计数和药敏；细菌和真菌培养、菌落计数和药敏；也可离心后对沉渣进行涂片检查，革兰染色也可离心后对沉渣进行涂片检查，革兰染色或抗酸染色。或抗酸染色。目的和意义目的和意义常采集中段尿，常采集中段尿，晨起第一次尿送检最佳；晨起第一次尿送检最佳；肥皂水或肥皂水或1 1：10001000高锰酸钾水溶液冲洗

16、女性外高锰酸钾水溶液冲洗女性外阴部及尿道口或男性尿道口，再用灭菌水清阴部及尿道口或男性尿道口，再用灭菌水清洗，最后用灭菌纱布檫拭；洗，最后用灭菌纱布檫拭；排尿弃去前段尿，留取中段尿约排尿弃去前段尿，留取中段尿约1010mlml于无菌于无菌容器内加盖送检。容器内加盖送检。采集方法采集方法尿道病原菌可在温暖尿液中繁殖，中段尿标尿道病原菌可在温暖尿液中繁殖，中段尿标本采集后应尽快送检，否则将影响病原菌计本采集后应尽快送检，否则将影响病原菌计数的准确性；数的准确性；排尿困难者可导尿，避免多次导尿所致尿路排尿困难者可导尿，避免多次导尿所致尿路感染，感染，导尿包必须为无菌的合格产品。导尿包必须为无菌的合格

17、产品。采集方法采集方法“培养出培养出3 3种以上细菌，疑采集污染，重留标种以上细菌，疑采集污染，重留标本本”：如培养出如培养出3 3种或以上细菌，且无优势菌；种或以上细菌，且无优势菌；约约10%10%的标本不合格，采集时污染，采集中段的标本不合格，采集时污染，采集中段尿（尤其女性）最好由专门医护人员指导采尿（尤其女性）最好由专门医护人员指导采集，以减少污染。集，以减少污染。结果报告形式结果报告形式“培养出少量某种细菌、菌落计数结果培养出少量某种细菌、菌落计数结果”：如菌量较少如菌量较少 1010105 5ml ml，且必须有优，且必须有优势，才可以确定为感染，对优势菌进行鉴定势，才可以确定为感

18、染，对优势菌进行鉴定和药敏。和药敏。10104 4mlml至至10105 5mlml，也有意义。，也有意义。结果报告形式结果报告形式尿液中分离1014株菌主要种类及构成比%三、粪便的三、粪便的细菌真菌培养鉴定细菌真菌培养鉴定 Etiologic Examination of StoolEtiologic Examination of Stool目的和意义：目的和意义：对肠道疾病进行病原学诊断；对肠道疾病进行病原学诊断；涂片染色：涂片染色：查真菌、弧菌、球菌查真菌、弧菌、球菌/杆菌比；杆菌比；培养病原菌和药敏：培养病原菌和药敏：培养沙门氏和志贺菌；培养弧菌；培养真菌；培养沙门氏和志贺菌；培养弧菌

19、；培养真菌；菌群失调病人，对占优势细菌进行鉴定药敏。菌群失调病人，对占优势细菌进行鉴定药敏。标本采集：标本采集：挑取含脓、血或粘液粪便约挑取含脓、血或粘液粪便约2-32-3g g；置于清洁容器或置于保存液中送检；置于清洁容器或置于保存液中送检；排便困难者或婴幼儿可用直肠拭子采集。排便困难者或婴幼儿可用直肠拭子采集。检查上下呼吸道感染检查上下呼吸道感染痰液（下呼吸道）和咽拭子（咽喉部）；痰液（下呼吸道）和咽拭子（咽喉部）；可进行涂片查细菌、真菌或抗酸杆菌；可进行涂片查细菌、真菌或抗酸杆菌；可进行细菌、真菌或结核杆菌培养；可进行细菌、真菌或结核杆菌培养；上述检查只要一口痰即可，在一张检查申请上述检

20、查只要一口痰即可，在一张检查申请单上选上述多个项目。单上选上述多个项目。四、呼吸道标本的细菌真菌培养鉴定四、呼吸道标本的细菌真菌培养鉴定采集深部痰（采集深部痰（sputumsputum），），不是唾液和口水不是唾液和口水；自然咳痰法自然咳痰法(Expectorated sputum)Expectorated sputum)；最好为清晨第一口痰，用清水反复漱口用力最好为清晨第一口痰，用清水反复漱口用力咳出第一口痰于无菌容器内；咳出第一口痰于无菌容器内；支气管镜采集法（支气管镜采集法（BronchoscopyBronchoscopy）。采集方法采集方法 报报“正常菌群正常菌群”：培养出的均为不致病

21、的细菌；培养出的均为不致病的细菌；培养出的细菌种类较多且无优势菌。培养出的细菌种类较多且无优势菌。结果报告形式结果报告形式 报报“无菌生长无菌生长”：病人抗生素使用过度导致；病人抗生素使用过度导致；可能病毒、支原体、衣原体等血平板无法培可能病毒、支原体、衣原体等血平板无法培养。养。结果报告形式结果报告形式 报报“分离出某种细菌或真菌，比例，药敏分离出某种细菌或真菌，比例，药敏”：分离出致病菌，而不是常见的正常菌群，且分离出致病菌，而不是常见的正常菌群，且具有优势，约占血平板菌群总数的百分比具有优势，约占血平板菌群总数的百分比%；同一病人如痰中连续分离出同一种菌，同一病人如痰中连续分离出同一种菌

22、，3 3天内天内如果已经做过药敏试验，则不再做药敏；如果已经做过药敏试验，则不再做药敏；同一病人痰中细菌的种类和比例，会随着治同一病人痰中细菌的种类和比例，会随着治疗情况变化，也受留取痰标本的质量影响。疗情况变化，也受留取痰标本的质量影响。结果报告形式结果报告形式 痰液中分离1882株菌主要种类及构成比%五、穿刺液的细菌真菌培养鉴定五、穿刺液的细菌真菌培养鉴定 EtiologicEtiologic Examination of Cerebrospinal FluidExamination of Cerebrospinal Fluid目的和意义：目的和意义：判断是否为感染性疾病判断是否为感染性疾

23、病脑脊液采集：脑脊液采集：通过腰椎穿刺术（通过腰椎穿刺术（Lumber Lumber puncturepuncture）以无菌操作采集脑脊液以无菌操作采集脑脊液3-53-5mlml于无于无菌小瓶或无菌试管中，一般第一管用于微生菌小瓶或无菌试管中，一般第一管用于微生物学检查；物学检查；引起脑膜炎的病原体脑膜炎奈瑟菌等抵抗力引起脑膜炎的病原体脑膜炎奈瑟菌等抵抗力弱，不耐冷，故采集的脑脊液应立即保温送弱，不耐冷，故采集的脑脊液应立即保温送检或床边接种检或床边接种;可查一般细菌真菌、隐球菌、抗酸杆菌。可查一般细菌真菌、隐球菌、抗酸杆菌。其它穿刺液：其它穿刺液：胸腹水、关节腔液等，将注射胸腹水、关节腔液

24、等，将注射器直接送检，或床旁接种血培养瓶；器直接送检，或床旁接种血培养瓶；如为多管穿刺液或相关组织，请在申请单上如为多管穿刺液或相关组织，请在申请单上注明是否都做培养鉴定；注明是否都做培养鉴定；注意无菌操作；如培养出类白喉杆菌，常为注意无菌操作；如培养出类白喉杆菌，常为采集时污染所致。采集时污染所致。六、伤口分泌物的细菌真菌培养鉴定六、伤口分泌物的细菌真菌培养鉴定开放性化脓灶：开放性化脓灶：应先用灭菌生理盐水冲洗表应先用灭菌生理盐水冲洗表面污染菌，再用棉拭子蘸取或注射器吸取脓面污染菌，再用棉拭子蘸取或注射器吸取脓性分泌物；性分泌物；瘘管内脓液：瘘管内脓液：先用灭菌棉拭子挤压瘘管弃去先用灭菌棉拭

25、子挤压瘘管弃去前端脓液，再收集脓汁；前端脓液，再收集脓汁；封闭性脓肿：封闭性脓肿：可用注射器穿刺抽取。可用注射器穿刺抽取。疑为厌氧菌感染者：疑为厌氧菌感染者：取脓液后立即排净注射取脓液后立即排净注射器内空气，针头插入无菌橡皮塞送检；器内空气，针头插入无菌橡皮塞送检；如为液体，最好床旁接种厌氧血培养瓶；如为液体，最好床旁接种厌氧血培养瓶；外界相通部位标本，如痰不能厌氧菌培养外界相通部位标本，如痰不能厌氧菌培养。伤口分泌物中分离1208株菌主要种类及构成比%六、生殖道分泌物的细菌真菌培养鉴定六、生殖道分泌物的细菌真菌培养鉴定 Etiologic Examination of STDsEtiolog

26、ic Examination of STDs性传播疾病，性传播疾病，简称性病，是一组通过性行为简称性病，是一组通过性行为传播的，侵犯皮肤、性器官和全身多脏器损传播的，侵犯皮肤、性器官和全身多脏器损害的感染性疾病；害的感染性疾病；标本采集：标本采集：常取生殖道分泌物，男性取尿道常取生殖道分泌物，男性取尿道口分泌物或前列腺液，女性取外阴糜烂面病口分泌物或前列腺液，女性取外阴糜烂面病灶边缘分泌物、阴道宫颈口分泌物等。灶边缘分泌物、阴道宫颈口分泌物等。淋病（淋病（gonorrheagonorrhea）涂片染色镜检：涂片染色镜检：急性淋菌性尿道炎敏感度和特异度高达急性淋菌性尿道炎敏感度和特异度高达90%

27、90%以上；对慢性无症状淋病的女性患者涂片以上；对慢性无症状淋病的女性患者涂片检查漏诊率达检查漏诊率达40%40%，故必须同时进行培养。，故必须同时进行培养。培养鉴定及药敏培养鉴定及药敏结果准确，诊断金标准。结果准确，诊断金标准。解脲解脲/人型支原体：人型支原体：细菌室开展了培养鉴定及药敏方法；细菌室开展了培养鉴定及药敏方法；需注意的是标本采集后应尽快送检。需注意的是标本采集后应尽快送检。诊断试剂和方法要符合卫生部相关规定；诊断试剂和方法要符合卫生部相关规定；注意保护病人的隐私。注意保护病人的隐私。第一部分第一部分 细菌真菌涂片检查细菌真菌涂片检查第二部分第二部分 细菌真菌培养鉴定细菌真菌培养

28、鉴定第三部分第三部分 细菌真菌耐药性检查细菌真菌耐药性检查第三部分第三部分 细菌真菌耐药性检查细菌真菌耐药性检查一、常用药敏试验方法一、常用药敏试验方法二、常用抗生素种类二、常用抗生素种类三、药敏试验结果解读三、药敏试验结果解读一、常用药敏试验方法常用药敏试验方法(1)MIC(1)MIC稀释法稀释法(2)K-B(2)K-B纸片扩散法纸片扩散法(3)E-test(3)E-test法法MIC稀释法一般在琼脂或肉汤中将抗菌药物系列对倍稀释法一般在琼脂或肉汤中将抗菌药物系列对倍稀释，定量接种待检菌，稀释，定量接种待检菌，35培养培养18至至24小时后观小时后观察结果；察结果；抑制检测菌肉眼可见生长的最

29、低药物浓度，即最小抑制检测菌肉眼可见生长的最低药物浓度，即最小抑菌浓度；抑菌浓度；MIC稀释法结果以稀释法结果以MIC（g/ml）数值报告，数值越）数值报告，数值越小越敏感，与小越敏感，与K-B法相反；法相反；(1)MIC(1)MIC稀释法稀释法细菌自动鉴定及药敏分析仪细菌自动鉴定及药敏分析仪MICMIC稀释法稀释法药敏试验孔药敏试验孔生化试验生化试验细菌鉴定孔细菌鉴定孔MIC稀释法药物浓度主要包括折点浓度，可以判断敏稀释法药物浓度主要包括折点浓度，可以判断敏感、中介、耐药，感、中介、耐药，少数药物如亚胺培南、美罗培南、头孢他啶，万古少数药物如亚胺培南、美罗培南、头孢他啶，万古霉素、替考拉宁、

30、利奈唑胺等在判断敏感的基础上，霉素、替考拉宁、利奈唑胺等在判断敏感的基础上，又增加了一些低浓度，以利于合理选用药量，又增加了一些低浓度，以利于合理选用药量，不同抗生素判断的折点浓度不同，故不同抗生素之不同抗生素判断的折点浓度不同，故不同抗生素之间的间的MIC值没有可比性。值没有可比性。(2)K-B(2)K-B纸片扩散法纸片扩散法补充药敏板没有的抗生素，如头孢哌酮补充药敏板没有的抗生素，如头孢哌酮/舒巴坦。舒巴坦。含有定量抗菌药物的纸片，贴在已接种待检菌的含有定量抗菌药物的纸片，贴在已接种待检菌的MHMH平板上，平板上，纸片中所含的药物，吸取琼脂中的水分溶解后，纸片中所含的药物，吸取琼脂中的水分

31、溶解后，不断地向纸片周围区域扩散，形成递减的药物梯不断地向纸片周围区域扩散，形成递减的药物梯度浓度。度浓度。在纸片周围抑菌浓度范围内，细菌的生长被抑制，在纸片周围抑菌浓度范围内，细菌的生长被抑制，形成透明的抑菌圈。形成透明的抑菌圈。抑菌圈大小，反映待检菌对测定药物敏感程度。抑菌圈大小，反映待检菌对测定药物敏感程度。不同抗生素有不同的判断标准，不同抗生素的抑不同抗生素有不同的判断标准，不同抗生素的抑菌圈大小没有可比性。菌圈大小没有可比性。(3)E-test(3)E-test法法结合结合K-BK-B法和稀释法的优点；法和稀释法的优点；原理同稀释法检测，操作同原理同稀释法检测，操作同K-BK-B法简

32、单；法简单；试纸条上含干化、稳定、浓度由高到低呈指数梯试纸条上含干化、稳定、浓度由高到低呈指数梯度分布的某种抗菌药物。度分布的某种抗菌药物。补充鉴定药敏板没有的抗生素，如替加环素（老补充鉴定药敏板没有的抗生素，如替加环素（老虎素）。虎素）。二、常用抗生素种类常用抗生素种类临床和实验室标准化委员会（临床和实验室标准化委员会（clinical and clinical and laboratory standards of institute,CLSIlaboratory standards of institute,CLSI）系列指南，每年更新系列指南，每年更新。多烯类：多烯类：两性霉素两性霉素

33、B B、制霉菌素。、制霉菌素。唑类：唑类：克霉唑、咪康唑、益康唑、氟康唑、克霉唑、咪康唑、益康唑、氟康唑、酮康唑、伊曲康唑、伏立康唑。酮康唑、伊曲康唑、伏立康唑。核苷类：核苷类：氟胞嘧啶。氟胞嘧啶。棘球白素类：棘球白素类：卡泊芬净。卡泊芬净。真菌药敏试验常用药物真菌药敏试验常用药物三、药敏试验结果解读三、药敏试验结果解读临床和实验室标准化委员会（临床和实验室标准化委员会（clinical and clinical and laboratory standards of institute,CLSIlaboratory standards of institute,CLSI）系列指南，每年更新系

34、列指南，每年更新。敏感（敏感（SusceptibleSusceptible，S S）是指菌株能被使用推荐剂量治疗感染部位可达到是指菌株能被使用推荐剂量治疗感染部位可达到的抗菌药物浓度所抑制，推荐使用。的抗菌药物浓度所抑制，推荐使用。中介（中介（IntermediateIntermediate，I I）指抗菌药物指抗菌药物MICMIC接近血液和组织中通常可达到的浓接近血液和组织中通常可达到的浓度，疗效低于敏感菌株。度，疗效低于敏感菌株。还表示药物在生理浓集的部位具有临床效力（如还表示药物在生理浓集的部位具有临床效力（如尿液中的喹诺酮类和尿液中的喹诺酮类和-内酰胺类），或者可用高内酰胺类），或者可

35、用高于正常剂量的药物进行治疗（如于正常剂量的药物进行治疗（如-内酰胺类）。内酰胺类）。另外，中介还作为缓冲区，以防止微小的、未受另外，中介还作为缓冲区，以防止微小的、未受控制的技术因素导致较大的错误结果，特别是对控制的技术因素导致较大的错误结果，特别是对那些药物毒性范围窄的药物。那些药物毒性范围窄的药物。耐药（耐药（ResistantResistant，R R）指菌株不能被常规剂量抗菌药物达到的浓度所抑指菌株不能被常规剂量抗菌药物达到的浓度所抑制，制，和和/或证明或证明MICMIC或抑菌圈直径落在某些特殊的微生或抑菌圈直径落在某些特殊的微生物耐药机制范围（如物耐药机制范围（如-内酰胺酶），内酰

36、胺酶），在治疗研究中表现抗菌药物对菌株的临床疗效不在治疗研究中表现抗菌药物对菌株的临床疗效不可靠。可靠。产超广谱产超广谱-内酰胺酶内酰胺酶G-G-杆菌杆菌(extended(extended spectrum-lactamase G-bacillusspectrum-lactamase G-bacillus，ESBLs)ESBLs)该酶是指由质粒介导的能水解所有青霉素类、该酶是指由质粒介导的能水解所有青霉素类、头孢菌素类及单环头孢菌素类及单环-内酰胺类氨曲南的一类酶，主内酰胺类氨曲南的一类酶，主要见于肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌。要见于肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌。耐碳青霉烯类抗生素的耐碳青霉烯类抗生

37、素的G-G-杆菌杆菌 指对碳青霉烯类抗生素亚胺培南、美罗培南等指对碳青霉烯类抗生素亚胺培南、美罗培南等耐药的耐药的G-G-杆菌，主要为不动杆菌属（鲍曼和非鲍杆菌，主要为不动杆菌属（鲍曼和非鲍曼不动杆菌）、铜绿假单胞菌，近几年出现耐碳曼不动杆菌）、铜绿假单胞菌，近几年出现耐碳青霉烯类抗生素的肠杆菌科，需引起重视。青霉烯类抗生素的肠杆菌科，需引起重视。耐甲氧西林葡萄球菌（耐甲氧西林葡萄球菌（methecillin resistance methecillin resistance staphylococcusstaphylococcus，MRSMRS）CLSICLSI规定，葡萄球菌如对苯唑西林（或

38、甲氧西林）规定，葡萄球菌如对苯唑西林（或甲氧西林）耐药：耐药：对青霉素类、头孢菌素类、碳青霉烯类和含对青霉素类、头孢菌素类、碳青霉烯类和含酶抑制剂的复方制剂均应报告耐药，而不考虑体外酶抑制剂的复方制剂均应报告耐药，而不考虑体外药敏结果。药敏结果。耐高浓度庆大霉素肠球菌（耐高浓度庆大霉素肠球菌（High level High level aminoglycosides resistance in Enterococcusaminoglycosides resistance in Enterococcus）CLSICLSI规定，肠球菌引起的全身性严重感染，常联合规定，肠球菌引起的全身性严重感染，常

39、联合应用应用-内酰胺类和氨基糖苷类抗生素，如果肠球菌内酰胺类和氨基糖苷类抗生素，如果肠球菌对高浓度庆大霉素耐药，则联合用药无效。对高浓度庆大霉素耐药，则联合用药无效。耐万古霉素肠球菌（耐万古霉素肠球菌（VREVRE），），用用E-testE-test法验证。法验证。上述多重耐药菌、泛耐药菌，要求每天在检验单上述多重耐药菌、泛耐药菌，要求每天在检验单审核结束后，及时向临床科室和医院感染控制科报告，审核结束后，及时向临床科室和医院感染控制科报告，以及时采取相应的防控措施，避免多重耐药菌、泛耐以及时采取相应的防控措施，避免多重耐药菌、泛耐药菌的扩散、流行或暴发。药菌的扩散、流行或暴发。第一部分第一部分 细菌真菌涂片检查细菌真菌涂片检查第二部分第二部分 细菌真菌培养鉴定细菌真菌培养鉴定第三部分第三部分 细菌真菌耐药性检查细菌真菌耐药性检查