常用培养基配制

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1、常用培养基LB培养基/升终1 X浓度胰蛋白胨10 g1.0% (w/v)酵母抽提物5 g0.5% (w/v)NaCl10 g1.0% (w/v)HO2至1升调节pH值至7.0低盐LB培养基/升终1 X浓度胰蛋白胨10 g1.0% (w/v)酵母抽提物5 g0.5% (w/v)NaCl10 g0.5% (w/v)H2O至1升调节pH值至7.0Terrific Broth 培养基/升终1 X浓度胰蛋白胨12 g1.2% (w/v)酵母抽提物24 g2.4% (w/v)甘油4 g0.4% (w/v)加HO2至 900 ml灭菌，冷却至60C后加入100ml过滤灭菌的10XTB磷酸盐(0.17MKH2

2、PO4, 0.72 MK2HPO4)SOB培养基/升终1 X浓度胰蛋白胨20 g2.0% (w/v)酵母抽提物5 g0.5% (w/v)NaCl0.5 g0.05% (w/v)250 mM KCl10 ml2.5 mMHO2至 900 ml调节pH值至7.0,加H2O至990 ml灭菌、冷却至室温。使用前加入10 口灭菌的1 M MgCl2溶液10 mMSOC培养基SOB培养基（1升）加入20 ml过滤灭菌的1 M葡萄糖M9基本培养基/升终1 X浓度5X M9 salts200 ml火菌H2O至1升1 M MgSO41 ml1 mM20%葡萄糖10 ml0.2 (w/v)1 M CaCl20.

3、1 ml0.1 mM5X M9 Salts/升终1 X浓度Na2HPO4x7H2O64 g47.8 mMKH PO2 415 g22 mMNaCl2.5 g8.6 mMNH45 g18.7 mM添加剂/升终1 X浓度抗生素（如果需要）氨苄青霉素50 Ng/ml氯霉素20 Ng/ml卡那霉素30 Ng/ml四环素12 Ng/ml半乳糖昔（如果需要）X-Gal20 Ng/mlIPTG0.1 mM培养基含有琼脂或琼脂糖琼脂（平板）15 g1.5% (w/v)琼脂（软性琼脂）7 g0.7% (w/v)琼脂糖（平板）15 g1.5% (w/v)琼脂糖（软性琼脂糖）7 g0.7% (w/v)参考文献1.

4、Atlas, R.M., Handbook of Microbiological Media, second edition, Ed. Parks, L.C., CRC Press, N.Y., 1997.2. Sambrook, J., et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manual, second edition, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY, A1.2-A2.12, 2001.常用储存液10 M醋酸铵醋酸铉385.4 g至 500 ml1 M CaCl

5、2CaCl2x6H2O219.1 gHO2至1升100X Denhardt 溶液终浓度Ficoll 40010 g0.02% (w/v)聚乙烯毗咯烷酮10 g0.02% (w/v)牛血清白蛋白10 g0.02% (w/v)HO2至 500 ml过滤火菌后分装(25 ml)，-20C保存0.5 M EDTA (乙二胺四乙酸)(pH 8.0)Na2EDTAx2H2O186.1 gH2O至 700 ml10 M NaOH (50 ml)调节 pH 值至 8.0HO2至1升10 mg/ml漠化乙锭漠化乙锭0.2 gHO2至 20 ml充分混匀后4C黑暗保存警告：漠化乙锭是一种突变剂。使用漠化乙锭溶液时

6、需带手套；称量其粉末时需带面具。1 M KClKCl74.6 gHO2至1升1 M MgCl2MgCl2x6H2O20.3 gHO2至 100 ml1 M MgSO4MgSO4x7H2O24.6 gHO2至 100 ml5 M NaClNaCl292.2 gHO2至1升10 M NaOHNaOH400.0 gHO2至1升1 M Tris-HCl 三羟甲基氨基甲烷盐酸盐Tri base121.1 gHO2至 800 ml用于浓缩的HCl调节至所需的pH值混合后加H O至1升23 M 醋酸钠(pH 5.2 或 7.0) (2)醋酸钠x 3HO2401.1 gHO2至 800 ml用醋酸调节pH值至

7、7.0或用冰醋酸调节pH值5.2HO2至1升参考文献1. Atlas, R.M., Handbook of Microbiological Media, second edition, Ed. Parks, L.C., CRC Press, N.Y., 1997.2. Sambrook, J., et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manual, second edition, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY, A1.2-A2.12, 2001.常用缓冲液10X磷

8、酸盐缓冲液(储存液)(PBS)/升终1 乂浓度NaCl80.0 g137 mMKCl2.0 g2.7 mMNa2HPO414.4 g100 mMKH PO2 42.7 g2 mMH2O至 800 mlHCl至 pH 7.4H2O至1升20X SSC/升终1 乂浓度NaCl175.3 g150 mMNa3citrate x H2O88.2 g15 mMH2O至 800 ml1M HCl调节pH值至7.0HO2至1升20X SSPE/升终1 乂浓度NaCl175.3 g150 mMNaH2PO4xH2O27.6 g10 mMNa EDTA27.4 g10 mMHO2至 800 ml10 M NaO

9、H调节pH值至7.4H2O至1升5X Tris-甘氨酸，Native电泳缓冲液/升终1 乂浓度Tri碱15.1 g25 mM甘氨酸72.0 g192 mMH2O至1升稀释溶液的pH至8.35X Tris-甘氨酸-SDS电泳缓冲液/升终1 乂浓度Tri碱15.1 g25 mM甘氨酸72.0 g192 mMSDS5.0 g0.1% (w/v)HO2至1升稀释溶液的pH至8.35X Tris-三（羟甲基）甲基甘氨酸-SDS电泳缓冲液/升终1 乂浓度Tri碱121.1 g0.1 MTricine179.2 g0.1 MSDS10.0 g0.1% (w/v)HO2至1升稀释溶液的pH至8.350X TA

10、E (Tris-醋酸-EDTA)电泳缓冲液/升终1 乂浓度Tri碱242.0 g40 mM冰醋酸57.1 ml20 mM0.5 M EDTA (pH 8.0)100 ml2% mMHO2至1升稀释溶液的pH大约为8.510X TBE (Tris-硼酸-EDTA)电泳缓冲液/升终1 乂浓度Tri碱108.0 g90 mM硼酸55.0 g90 mM0.5 M EDTA (pH 8.0)40 ml2% mMHO2至1升10X TPE (Tris-磷酸-EDTA)电泳缓冲液/升终1 乂浓度Tri碱108.0 g90 mM磷酸(85%)15.5 ml23 mM0.5 M EDTA (pH 8.0)40

11、ml2% mMHO2至1升TE (Tris-EDTA)缓冲液 pH 7.4, 7.6 或 8.0/升终1 乂浓度1 M Tri, pH 7.4, 7.6, 8.010.0 ml10 mM0.5 M EDTA (pH 8.0)2.0 ml1 mMH2O至1升参考文献1. Atlas, R.M., Handbook of Microbiological Media, second edition, Ed. Parks, L.C., CRC Press, N.Y., 1997.2. Sambrook, J., et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manua

12、l, second edition, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY, A1.2-A2.12, 2001.常用缩写A腺嘌吟或腺苷；丙氨酸单字母代码A260260 nm吸光值ACESN-（2-乙酰氨基）-2-氨基乙磺酸Ad-2腺病毒-2ADAN-（2-乙酰氨基）-2-亚氨基二乙酸ADP腺苷5 -二磷酸AMP腺苷单磷酸AMV禽成髓细胞瘤病毒AP碱性磷酸酶APS过硫酸铵aRNA反义RNAATP腺苷5 -三磷酸BCIP5-漠-4-氯-3-吲哚磷酸BESN,N-双（2-羟乙基）-2-氨基乙磺酸BGG牛血清球蛋白BIC

13、INEN,N-双（2-羟乙基）甘氨酸Bio-dNTP生物素-脱氧核苷三磷酸BMEbeta-巯基乙醇；2-巯基乙醇bp碱基对Bq贝可BSA牛血清白蛋白B/W蓝/白克隆C胞嘧啶或胞苷；半胱氨酸单字母代码CA酪蛋白氨基酸CAPSN-环已胺-3-丙磺酸cDNA互补脱氧核糖核酸CEU粘性末端连接单位Ci居里CIAP小牛肠碱性磷酸酶CMPc胞苷单磷酸cpm次/分钟CTP胞苷5 -三磷酸Da道尔顿dAMP脱氧腺苷单磷酸dATP脱氧腺苷三磷酸dCTP脱氧胞苷三磷酸ddATP双脱氧腺苷三磷酸ddCTP双脱氧胞苷三磷酸ddGTP双脱氧鸟苷三磷酸ddNTP双脱氧核苷三磷酸ddTTP双脱氧胸苷三磷酸DE-81What

14、man 一乙基胺基乙基纤维素纸DEPC焦碳酸二乙酯DIG地高辛dITP脱氧肌苷三磷酸dGTP脱氧鸟苷三磷酸DMSO二甲亚砜DNA脱氧核糖核酸DNase脱氧核糖核酸酶dNMP脱氧核糖核苷单磷酸dNTP脱氧核糖核苷三磷酸dpm分解量/分钟ds双链DTT二硫苏糖醇dTTP脱氧胸苷二磷酸dUTP脱氧尿苷三磷酸EDTA乙二胺四乙酸EGTA乙二醇-双-（2-氨基乙基）四乙酸ELISA酶联免疫吸附实验EMBL欧洲分子生物学实验室EMSA凝胶电泳迁移分析ENDO内切脱氧核糖核酸酶分析endo内切核酸酶exo外切核酸酶EXO5和3 -外切脱氧核糖核酸酶分析FOA (5-FOA)5-氟乳清酸G鸟嘌吟或鸟苷；甘氨酸

15、的单字母代码GalD-半乳糖GMP鸟苷单磷酸GMPD糖基酶介导的多态性检测GUSbeta-D-葡萄糖醛酸酶GTP鸟苷5 -二磷酸GQ遗传质量合格HC高浓度HEPESN-（2-羟乙基）哌嗪-N -2-乙磺酸HRP辣根过氧化物酶HPLC高效液相色谱IEF等电聚焦IPTG异内基-beta-D-硫代半乳糖苷kb千碱基kDa千道尔顿LAMP环介导恒温扩增LBLuria Bertani 培养基LC低浓度LE低电渗LM低熔点LO标记的核昔酸MCS多克隆位点MES2-码琳乙磺酸MDA多重置换扩增M-MuLV小鼠肉瘤病毒MOPS3-吗琳丙磺酸mRNA信使核糖核酸MW分子量NAD烟酰胺腺嘌吟二核昔酸NADH烟酰胺

16、腺嘌吟二核昔酸，还原型NADP烟酰胺腺嘌吟二核苷磷酸NADPH烟酰胺腺嘌吟二核苷磷酸，还原型NBT硝基蓝四氮唑NDP核苷二磷酸NMP核糖g单磷酸NR不推荐NP-40Nonidet P-40(去污剂)nt核苷酸NTC无模板对照NTP核苷三磷酸oligo(A)寡聚腺苷酸oligo(dT)寡聚脱氧胸苷酸OMP乳清苷（一磷）酸Pi无机磷酸PAAG聚丙烯酰胺凝胶PAGE聚丙烯酰胺凝胶电泳PBS磷酸盐缓冲液PCR聚合酶链式反应PEI聚乙烯亚胺PEG聚乙二醇PIPES哌嗪-1,4-二乙磺酸PNK多聚核苷激酶pNPP对硝基苯磷酸poly(A)多聚腺苷酸poly(A) +多聚腺苷酸(mRNA)poly(dA-d

17、T)多聚(脱氧腺苷酸-脱氧胸苷酸)poly(dT)多聚脱氧胸苷酸PP.无机焦磷酸盐PVDF聚偏二氟乙烯QCA质量控制分析qPCR定量聚合酶链式反应RACE快速扩增cDNA末端RCA滚环复制RDA随机置换扩增RE限制酶RNA核糖核酸RNase核糖核酸酶R-M限制-修饰rRNA核糖体核糖核酸RT逆转录RT-PCR逆转录聚合酶链式反应SAMS-腺苷蛋氨酸SAP虾碱性磷酸酶SDA链置换扩增SDS十二烷基磺酸钠siRNA小分子干扰核糖核酸SNP单核苷酸多态性ss单链SSC氯化钠/柠檬酸钠（缓冲液）SSCP单链构象多态性SSPE氯化钠/磷酸钠/EDTA（缓冲液）STR短串联重复T胸腺嘧啶或胸苷；苏氨酸单字

18、母代码TAETris/醋酸/EDTA（缓冲液）TBETris/硼酸/EDTA（缓冲液）TdT末端脱氧核苷转移酶TETris/EDTA（缓冲液）TEMEDN,N,N，N -四甲基二乙胺TES三羟甲基甲胺基乙磺酸TLC薄层层析Tm融解温度TMB3,3，5,5 -四甲基联苯胺TRICINE三（羟甲基）甲基甘氨酸Tris三羟甲基氨基甲烷tRNA转运核糖核酸TPETris/磷酸/EDTA（缓冲液）TX-100triton X-100T4T4多聚核苷激酶U尿嘧啶或尿苷u单位UDG鸟嘧啶-DNA糖基化酶UMP鸟苷单磷酸UTP尿苷5 -三磷酸UV紫外线v/v体积/体积WGA全基因组扩增w/v重量/体积X-Gal5-漠-4-氯-3-吲哚-beta-D-半乳糖日X-Gluc5-漠-4-氯-3-吲哚-beta-D-葡萄糖苷