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1、实验二 果蝇杂交试验目的 设计与创新性实验 掌握果蝇的杂交技术和统计处理方法 加深理解遗传的分离规律、自由组合规律及伴性遗传。掌握三点测验的实验方法与基因定位 培养运用所掌握的理论知识独立设计实验和完成实验的能力。实验原理突变性状基因符号染色体号性状特征棒眼B1复眼呈狭窄垂直棒形，小眼数少褐眼bw2眼呈褐色卷曲翅Cy2翅膀向上卷曲，纯合致死小翅小翅m1翅膀小，长度不超过身体翅膀小，长度不超过身体白眼白眼w1复眼白色复眼白色黑檀体e3身体呈乌木色，黑亮黑体b2体黑色，比黑檀体深黄体y1全身呈浅橙黄色残翅残翅vg2翅明显退化，部分残留，不翅明显退化，部分残留，不能飞能飞叉毛f1毛和刚毛分叉且弯曲猩
2、红眼st3复眼呈明亮猩红色墨色眼se3羽化时眼呈褐色并深化成墨色实验原理（1）果蝇的单因子杂交（2）果蝇的双因子杂交（3）果蝇的伴性遗传（4）三点测验 三点测验 三隐性亲本雌性与野生型杂交再与纯合隐性亲本测交实验步骤（一）果蝇培养基实验室内凡能发酵的基（一）果蝇培养基实验室内凡能发酵的基质，均可作为果蝇的饲料。实验室常用的培质，均可作为果蝇的饲料。实验室常用的培养基配制方法是：养基配制方法是：玉米粉为主料：玉米粉为主料：300ml+3g agar+26g sucrose+20g maize powder+2.8g yeast extract 防止培养基长霉，加防止培养基长霉，加2ml丙酸作为防
3、腐剂。丙酸作为防腐剂。（二）果蝇培养仔细检查果蝇有没有混（二）果蝇培养仔细检查果蝇有没有混杂，有没有突变个体的产生。一般一瓶放杂，有没有突变个体的产生。一般一瓶放两到三对亲本为宜。果蝇移入新瓶时，需两到三对亲本为宜。果蝇移入新瓶时，需将瓶子横放，待果蝇清醒过来后再把培养将瓶子横放，待果蝇清醒过来后再把培养瓶竖起。标签上标明品种名称和日期，温瓶竖起。标签上标明品种名称和日期，温度控制在度控制在18左右。左右。（三）处女蝇的收集及交配组合（三）处女蝇的收集及交配组合 果蝇雌体生殖器官有受精囊，可保留交配所得果蝇雌体生殖器官有受精囊，可保留交配所得的大量精子，能使日后产下的卵受精。的大量精子，能使日
4、后产下的卵受精。因此在做杂交时，雌体必须选用处女蝇。因此在做杂交时，雌体必须选用处女蝇。雌蝇羽化出来雌蝇羽化出来12小时内一般不会交配。小时内一般不会交配。我们选择在这个时间段内所收集的雌体，均属我们选择在这个时间段内所收集的雌体，均属处女蝇，可放心做为杂交亲本用。处女蝇，可放心做为杂交亲本用。雄体可事先收集好，放在一个新的培养瓶中，雄体可事先收集好，放在一个新的培养瓶中，也可等收集到处女蝇后再收集雄蝇。也可等收集到处女蝇后再收集雄蝇。当两亲本在新的培养瓶中生活当两亲本在新的培养瓶中生活78天后，天后，可见培养基面上有许多幼虫在爬动，这是可见培养基面上有许多幼虫在爬动，这是子代的幼虫，这时可将
5、两亲本倒出，以免子代的幼虫，这时可将两亲本倒出，以免和子代混淆。和子代混淆。当子一代果蝇羽化出来后，要观察性状和当子一代果蝇羽化出来后，要观察性状和计数。同时，根据要求可进行计数。同时，根据要求可进行F1代自交或代自交或测交项目。测交项目。（四）配置组合（各配置正反交）（四）配置组合（各配置正反交）1 单因子 残翅 X 正常翅 正常翅 X 残翅每组合两瓶，每瓶2-3对 2.二因子 红眼残翅 X 白眼正常翅 每组合两瓶，每瓶2-3对3 伴性遗传 白眼 X 红眼 红眼 X 白眼每组合两瓶，每瓶2-3对4 三因子杂交 白眼小翅焦刚毛X正常个体每组合两瓶，每瓶2-3对 收集处女蝇收集处女蝇 配制组合（
6、配制组合（2-3对）对）7-8天天F1幼虫出现幼虫出现倒出成蝇倒出成蝇3-4天天F1成蝇成蝇出现出现观察记载统计数目观察记载统计数目 测交测交 自交自交隐性亲本隐性亲本X F1 F1 2-3对对（新培养瓶中）（新培养瓶中）6-7天天 测交后代测交后代 F2 幼虫出现幼虫出现 倒掉亲本蝇倒掉亲本蝇3-4天天 成蝇成蝇 成蝇成蝇 出现出现麻醉麻醉观察观察数量数量X2检验检验1.果蝇要适度麻醉，挑蝇果蝇要适度麻醉，挑蝇用毛笔，忌用镊子和其他工用毛笔，忌用镊子和其他工具，以免影响果蝇生长繁育具，以免影响果蝇生长繁育注意事项注意事项2.挑处女蝇时，挑处女蝇时，每次只挑每次只挑12小时内羽化成小时内羽化成
7、虫，超过虫，超过12小时的成虫已逐渐小时的成虫已逐渐有交配能力有交配能力,必须一只不留地倒必须一只不留地倒出处死出处死,才能进行第才能进行第二次挑选二次挑选3.刚羽化的果蝇色淡白，体软绵，刚羽化的果蝇色淡白，体软绵，难辨，务必小心区别难辨，务必小心区别 4.使用毛笔和瓷板，要用酒精棉球使用毛笔和瓷板，要用酒精棉球消毒，同时必须凉干才能使用。消毒，同时必须凉干才能使用。5.每个杂交组合放果蝇每个杂交组合放果蝇23对，用毛笔把果蝇扫进对，用毛笔把果蝇扫进试管，试管要平放，待蝇醒后，试管，试管要平放，待蝇醒后，方能竖起，避免果蝇粘在培养方能竖起，避免果蝇粘在培养基上被闷死，杂交组合配基上被闷死，杂交
8、组合配好后，放回培养箱。好后，放回培养箱。6.培养箱温度保持在培养箱温度保持在18，不要随意更改或调整其他旋不要随意更改或调整其他旋钮，以免影响整个实验。钮，以免影响整个实验。观察结果统计日期 正 交 反 交红眼果蝇（雌：雄）白眼果蝇（雌：雄）红眼果蝇（雌：雄）白眼果蝇（雌：雄）合 计单因子杂交F1代的结果统计亲本1：亲本2：杂交日期：观察结果统计日期 正 交 反 交红眼果蝇（雌：雄）白眼果蝇（雌：雄）红眼果蝇（雌：雄）白眼果蝇（雌：雄）合 计单因子杂交自交F2代的结果统计 观察结果统计日期 正 交 反 交红眼果蝇（雌：雄）白眼果蝇（雌：雄）红眼果蝇（雌：雄）白眼果蝇（雌：雄）合 计单因子杂交测交的结果统计长翅殘翅合计实验观察数（O）理论数3:1（C）偏差（OC）(o-c)2/c实验结果卡方测验表作业作业 根据实验经过和结果写根据实验经过和结果写1份实验份实验报告，要求结合遗传学有关的报告，要求结合遗传学有关的内容进行分析和讨论。内容进行分析和讨论。
基础生物学实验（三）：实验2 果蝇杂交实验
