诊断学(实验)教学课件:骨髓细胞学检查

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1、骨髓细胞学检查骨髓细胞学检查主要内容主要内容l概述概述l血细胞的生成、发育规律及形态特点血细胞的生成、发育规律及形态特点l骨髓细胞学检查的方法和内容骨髓细胞学检查的方法和内容l常用血细胞组织化学染色常用血细胞组织化学染色l细胞免疫学分型细胞免疫学分型l细胞遗传学分析细胞遗传学分析l常见血液病的形态学特点常见血液病的形态学特点*概 述骨髓是什么造血器官的演变胚胎期胚胎期出生后出生后红骨髓红骨髓 全部造血任务至生命终止,分布与年龄相关全部造血任务至生命终止,分布与年龄相关髓外造血髓外造血 某些病理情况某些病理情况骨髓检查的意义l血液细胞形态学研究的主要方法血液细胞形态学研究的主要方法 骨髓细胞学检

2、查的临床应用骨髓细胞学检查的临床应用 诊断造血系统疾病诊断造血系统疾病 直接诊断直接诊断 各型白血病、多发性骨髓瘤、各型白血病、多发性骨髓瘤、恶性组织细恶性组织细 胞病等。胞病等。协助诊断协助诊断 再生障碍性贫血、巨幼细胞性贫血、再生障碍性贫血、巨幼细胞性贫血、原发性血小板减少性紫癜、白细胞减少原发性血小板减少性紫癜、白细胞减少 症、淋巴瘤、骨髓纤维化等。症、淋巴瘤、骨髓纤维化等。急性淋巴细胞白血病(急性淋巴细胞白血病(ALL)多发性骨髓瘤(多发性骨髓瘤(MM)诊断其他非造血系统疾病诊断其他非造血系统疾病某些原虫感染某些原虫感染如疟疾、黑热病如疟疾、黑热病 某些代谢性疾病某些代谢性疾病如高雪氏

3、病、尼曼如高雪氏病、尼曼-匹克病匹克病 某些转移性癌肿某些转移性癌肿 类白血病反应、脾功能亢进、结缔组织病类白血病反应、脾功能亢进、结缔组织病原因不明的发热、恶病质、肝脾淋巴结肿大、骨痛、原因不明的发热、恶病质、肝脾淋巴结肿大、骨痛、紫癜紫癜、黄疸、血沉增快黄疸、血沉增快等等 适应证适应证*外周血细胞成份及形态学异常(一系或多系细胞外周血细胞成份及形态学异常(一系或多系细胞 增多或减少,出现原始或幼稚细胞)增多或减少,出现原始或幼稚细胞)*原因不明的发热、恶病质、肝脾淋巴结肿大、骨原因不明的发热、恶病质、肝脾淋巴结肿大、骨 痛、紫癜痛、紫癜、黄疸、血沉增快黄疸、血沉增快等等*治疗观察和其他检查

4、治疗观察和其他检查 化疗中的动态观察化疗中的动态观察 骨髓细胞培养骨髓细胞培养 骨髓细菌培养骨髓细菌培养 染色体核型分析染色体核型分析 肿瘤药敏肿瘤药敏 1 禁忌症 *凝血因子缺陷性疾病:血友病 *局部感染 晚期妊娠?骨髓穿刺方法骨髓穿刺方法穿刺部位穿刺部位髂后上棘、髂前上棘、胸骨、胫骨上端髂后上棘、髂前上棘、胸骨、胫骨上端消毒消毒铺巾铺巾麻醉麻醉穿刺穿刺取材取材涂片涂片注意事项l抽取髓液少于抽取髓液少于0.2ml。注意事项骨髓细胞学检查的内容及方法骨髓细胞学检查的内容及方法骨髓标本的分类部位骨髓片的制作骨髓片的制作取材、涂片、染色取材、涂片、染色低倍镜检查低倍镜检查1.1.观察骨髓涂片的取材

5、、制片、染色是否满意观察骨髓涂片的取材、制片、染色是否满意骨髓涂片染色比较:骨髓涂片染色比较:A 染色偏酸,细胞核、颗粒结构不清楚,红细胞染色偏染色偏酸,细胞核、颗粒结构不清楚,红细胞染色偏 红。红。B 染色适中,细胞核结构、颗粒、胞浆染色较好,易于染色适中,细胞核结构、颗粒、胞浆染色较好,易于 分辨。分辨。C 染色偏碱,细胞核、胞浆染色太深,细胞不易辨认,染色偏碱,细胞核、胞浆染色太深,细胞不易辨认,红细胞染成蓝色。红细胞染成蓝色。A B C2.2.确定骨髓增生程度确定骨髓增生程度 骨髓增生程度 成熟红细胞 有核细胞%常见原因 :有核细胞增生极度活跃 1 :1 50%以上以上 各类型白血病增

6、生明显活跃 10 :1 10%以上以上 白血病、增贫、ITP增生活跃 20 :1 5%左右左右 正常、某些贫血增生减低 50 :1 1%以下以下 再障、粒细胞减少症增生极度减低 200 :1 0.5%以下以下 重型再障 低倍镜:极度活跃低倍镜:极度活跃(Extreme hyperplasia)低倍镜:低倍镜:明显活跃明显活跃(Marked hyperplasia)低倍镜:低倍镜:增生活跃增生活跃(Active proliferation)低倍镜:低倍镜:增生减低增生减低(Hypoplasia)低倍镜:低倍镜:极度减低极度减低(Marked hypoplasia)高倍镜高倍镜:增生活跃:增生活跃

7、增生低下(高倍镜)增生低下(高倍镜)增生明显低下(高倍镜)增生明显低下(高倍镜)高倍镜高倍镜:增生明显活跃:增生明显活跃高倍镜高倍镜:增生明显活跃:增生明显活跃+红系造血岛红系造血岛低倍镜检查低倍镜检查观察计数巨核细胞观察计数巨核细胞 注意有无特殊细胞注意有无特殊细胞 2735。油镜检查油镜检查 1.1.有核细胞分类有核细胞分类 选择染色良好、细胞分布均匀、结构清晰选择染色良好、细胞分布均匀、结构清晰的部位,连续分类计数的部位,连续分类计数200200500500个有核细胞,个有核细胞,最后按系统计算出各阶段的有核细胞的百分率。最后按系统计算出各阶段的有核细胞的百分率。油镜检查油镜检查正常正常

8、 24:1油镜检查油镜检查 3.观察细胞形态有无异常。观察细胞形态有无异常。4.观察有无其它特殊细胞和寄生虫观察有无其它特殊细胞和寄生虫 骨髓转移癌骨髓转移癌寄生虫感染寄生虫感染疟原虫感染疟原虫感染归纳归纳骨髓增生程度骨髓增生程度各系统之间的比例及各系统之间的比例及同一系统内各阶段细胞的比例关系同一系统内各阶段细胞的比例关系单个细胞形态有无异常单个细胞形态有无异常有无骨髓片内不应有的异常细胞或寄生虫有无骨髓片内不应有的异常细胞或寄生虫结果报告结果报告(需同时结合血涂片进行分析需同时结合血涂片进行分析)血细胞的生成、发育规律及形态特点血细胞的生成、发育规律及形态特点血细胞的生成多能(全能)干细胞

9、多能(全能)干细胞髓系干细胞髓系干细胞 淋巴系干细胞淋巴系干细胞 红系祖细胞红系祖细胞 粒、单核粒、单核系祖细胞系祖细胞嗜酸粒祖细胞嗜酸粒祖细胞 嗜碱粒祖细胞嗜碱粒祖细胞 巨核系祖细胞巨核系祖细胞T T淋巴系祖细胞淋巴系祖细胞 B B淋巴系祖细胞淋巴系祖细胞 原红原红早幼红早幼红 中幼红中幼红晚幼红晚幼红 网织红网织红 红细胞红细胞 原粒原粒 早幼粒早幼粒 中幼粒中幼粒 晚幼粒晚幼粒 杆状核杆状核原单原单幼单幼单单核细胞单核细胞原巨原巨幼巨幼巨颗粒巨颗粒巨 产板巨产板巨血小板血小板T T原淋原淋T T幼淋幼淋T T淋巴细胞淋巴细胞B B原淋原淋B B幼淋幼淋B B淋巴细胞淋巴细胞浆细胞浆细胞(

10、同上中性粒细胞)(同上中性粒细胞)分叶核分叶核组织细胞组织细胞原免疫原免疫细胞细胞原浆细胞原浆细胞幼浆细胞幼浆细胞红细胞生成素(EPO)(同上中性粒细胞)(同上中性粒细胞)粒单核系集落刺激因子(GM-CSF)巨核细胞集落刺激因子(Meg-CSF)血小板生成素(TPO)丝裂原抗原粒细胞集落刺激因子(G-CSF)血细胞发育过程中 形态变化的一般规律细胞大小及外形细胞大小及外形大小大小 胞体大小(巨核细胞除外)外形外形 圆形或椭圆形不规则形(红系、粒系、淋系除外)细胞核细胞核 大小大小 大小(巨核小大)核形核形 圆形或椭圆形不变(红系、淋系)/凹陷并分(粒 系)/不规则形(单核系)/巨大核(巨核系)

11、染色质染色质 细致、疏松粗糙、密集紧缩成块,着色由浅变深 (DNA增加)核膜核膜 不明显明显核仁核仁 清晰模糊消失 细胞浆细胞浆量量 少多颜色颜色 深蓝浅蓝浅红(红、粒、巨核系)不变(淋、单核 系)颗粒颗粒 无有,非特异性特异性(粒系)核浆比核浆比 大小各类血细胞的形态学特点正常外周血各种血细胞形态正常外周血各种血细胞形态)l嗜酸粒细胞嗜酸粒细胞(中幼、晚幼、杆状核、分叶核)l嗜碱粒细胞嗜碱粒细胞(中幼、晚幼、杆状核、分叶核)嗜酸性中幼粒细胞:胞体直径1520um。胞核与中性中幼粒细胞相似。胞质内充满粗大、均匀、排列紧密、有折光感的桔红色特异性嗜酸性颗粒。细胞呈圆形或椭圆形,直径1016um。

12、胞核明显凹陷呈肾形,但其凹陷程度一般不超过假设核直径的一半。核染质粗糙呈粗块状,排列紧密。胞质量多,呈淡红色。内含嗜酸性颗粒。嗜酸性杆状核粒细胞:细胞呈圆形,直径1015um。胞核狭长,弯曲呈带状,两端钝圆。核染色质粗糙呈块状,染深紫红色。胞质中含特异性嗜酸性颗粒 嗜酸性分叶核粒细胞:胞体直径1116um。胞核多分为近似对称的两叶。胞质中充满密集粗大、大小均匀的桔红色嗜酸性颗粒。嗜碱性中幼粒细胞:胞体直径1015um。胞核与上述细胞相似,但轮廓不清,染色质结构模糊。胞质内含数量不多、大小不一但较粗大、分布散乱的紫黑色特异性嗜碱性颗粒,颗粒也可覆盖在细胞核上。嗜碱性晚幼粒细胞:细胞呈圆形或椭圆形

13、,直径1016um稍小。胞核明显凹陷呈肾形,但其凹陷程度一般不超过假设核直径的一半。核染质粗糙呈粗块状,排列紧密。胞质量多,呈淡红色。内含不同的特异性颗粒 嗜碱性杆状核粒细胞:细胞呈圆形,直径1015um。胞核狭长,弯曲呈带状,两端钝圆。核染色质粗糙呈块状,染深紫红色。胞质中含特异性嗜碱性颗粒 嗜碱性分叶核粒细胞:胞体直径1012um。胞核分叶不明显,或呈堆积状。胞质中有稀疏的大小不一、分布不均、呈紫黑色的嗜碱性颗粒,颗粒常覆盖在核上,致使核的轮廓和结构模糊不清。l淋巴细胞系统淋巴细胞系统原淋巴细胞(lymphoblast):细胞呈圆形或椭圆形,直径1018um。胞核大,圆或椭圆形,稍偏位。核

14、染色质细致,呈颗粒状,但较原粒细胞稍粗,着色较深,染色质在核膜内层及核仁周围有浓集现象,使核膜浓厚而清晰。核仁多为12个,小而清楚,呈淡蓝色或无色。胞质量少,呈透明天蓝色,不含颗粒。幼淋巴细胞:圆形或椭圆形,直径1016um。胞核圆形或椭圆形,有时可有浅的切迹。核染色质较致密粗糙,核仁模糊或消失。胞质量较少,淡蓝色,一般无颗粒,或可有数颗深紫红色嗜天青颗粒。大淋巴细胞:呈圆形,直径1318um。胞核圆形或椭圆形,偏于一侧或着边。染色质常致密呈块状,排列均匀,深染呈深紫红色。胞质丰富,呈透明天蓝色,可有少量大而稀疏的嗜天青颗粒。小淋巴细胞:呈圆形或椭圆形,直径610um。胞核圆形或椭圆形,或有切

15、迹,核着边,染色质粗糙致密呈大块状,染深紫红色。胞质量极少,仅在核的一侧见到少量淡蓝色胞质,有时几乎不见而似裸核,一般无颗粒。原浆细胞:圆形或椭圆形,直径1520um。胞核圆形,占细胞的2/3以上,常偏位。核染色质呈粗颗粒网状,紫红色。核仁25个。胞质量多,呈灰蓝色,不透明,核的一侧可有半圆形淡染区,不含颗粒。幼浆细胞:细胞多呈椭圆形,直径1216um。胞核圆形,占细胞的1/2,偏位。核染色质开始聚集,染深紫红色,可呈车轮状排列,核仁基本消失。胞质量多,呈不透明灰蓝色,近核处有淡染区,有时可见空泡或少数嗜天青颗粒。浆细胞:细胞呈圆形或卵圆形,直径820um。胞核圆形,偏位。核染色质凝聚块,深染

16、,排列呈车轮状。胞质丰富,呈不透明深蓝色或蓝紫色,核的一侧常有明显的淡染区。常可见小空泡,偶见少数嗜天青颗粒。ABC原单核细胞:圆形或椭圆形,直径1525um。胞核较大,圆形或椭圆形。核染色质纤细疏松呈网状,染淡紫红色。核仁13个,大而清楚。胞质丰富,呈浅灰蓝色,半透明如毛玻璃样,边缘常不整齐,有时可有伪足突出,不含颗粒。幼单核细胞:圆形或不规则形,直径1525um。胞核圆形或不规则形,可有凹陷、切迹、扭曲或折叠。染色质较原单核细胞稍粗,但仍呈疏松丝网状,染淡紫红色。核仁模糊或消失。胞质量多,呈灰蓝色,边缘可有伪足突出,浆内可见许多细小、分布均匀的淡紫红色嗜天青颗粒。单核细胞:圆形或不规则形,

17、直径1220um,边缘常见伪足突出。胞核形状不规则,常呈肾形、马蹄形、笔架形、“S”形等,并有明显扭曲折叠。染色质疏松细致,呈淡紫红色丝网状。胞质丰富,呈淡灰蓝色或淡粉红色,可见多数细小、分布均匀、细尘样淡紫红色颗粒。原巨核细胞:细胞呈圆形或椭圆形,胞体较大,直径1530um。胞核大,占细胞的极大部分,呈圆形或椭圆形。染色质呈深紫红色,粗粒状,排列紧密。可见淡蓝色核仁23个,核仁大小不一,不清晰。胞质量较少,呈不透明深蓝色,边缘常有不规则突起。幼巨核细胞:细胞呈圆形或不规则形,胞体明显增大,直径3050um。胞核开始有分叶,核形不规则并有重叠。染色质凝聚呈粗颗粒状或小块状,排列紧密。核仁模糊或

18、消失。胞质量增多,呈蓝色或灰蓝色,近核处可出现淡蓝色或淡红色淡染区,可有少量嗜天青颗粒。颗粒型巨核细胞:胞体明显增大,直径5070um,甚至达100um,外形不规则。胞核明显增大,高度分叶,形态不规则,分叶常层叠呈堆集状。染色质粗糙,排列致密呈团块状,染深紫红色。胞质极丰富,呈淡紫红色,其内充满大量细小紫红色颗粒,有时可见边缘处颗粒聚集成簇,但周围无血小板形成。产血小板型巨核细胞(成熟型巨核细胞):胞质内颗粒明显聚集成簇,有血小板形成,胞质周缘部分已裂解为血小板,使细胞边缘不完整,其内侧和外侧常有成簇的血小板出现。其余的特征均与颗粒型巨核细胞相同。巨核细胞裸核:产血小板型巨核细胞的胞质裂解成血

19、小板完全脱落后,仅剩细胞核时,称为裸核。颗粒巨核细胞颗粒巨核细胞l其他细胞其他细胞EDA吞噬细胞:单核细胞逸出血管进入组织后转变成吞噬细胞(原称组织细胞、巨噬细胞)。胞体大小变异甚大,直径1550um,有时可至80um。细胞外形呈圆形、椭圆形或不规则形。胞核呈圆形、椭圆形、肾形或不规则形,偏位。核染色质较粗、深染,或疏松、淡染,呈网状结构。可见核仁或无核仁。胞质丰富,呈不透明灰蓝色或蓝色,不含颗粒或有少量嗜天青嗜天青颗粒,常见有小空泡。血细胞的细胞化学染色血细胞的细胞化学染色过氧化物酶染色(POX,peroxidase)骨髓片POX染色骨髓片POX染色APL:呈强阳性反应AML-M4:部分呈阳

20、性反应,部分成弱阳性反应AML-M5:呈弱阳性ALL:呈阴性,0.30,以中、晚幼红细胞为主,体积小,以中、晚幼红细胞为主,体积小,胞核小而致密,浆量少,着色偏碱胞核小而致密,浆量少,着色偏碱(血红蛋白合成减少)(血红蛋白合成减少)缺铁性贫血缺铁性贫血缺铁性贫血缺铁性贫血小细胞低色素性红细胞小细胞低色素性红细胞铁染色铁染色 缺铁性贫血缺铁性贫血 正常骨髓正常骨髓 溶血性贫血溶血性贫血(hemolytic anemia)特点特点红系明显代偿增生,红系明显代偿增生,0.50,G/E倒置倒置以中幼红为主,易见核分裂以中幼红为主,易见核分裂可见大红细胞、嗜多色性红细胞和可见大红细胞、嗜多色性红细胞和H

21、owell-Jolly小体小体 单核细胞吞噬红细胞单核细胞吞噬红细胞溶血性贫血溶血性贫血溶血性贫血溶血性贫血巨幼细胞性贫血(巨幼细胞性贫血(megaloblastic anemia)特点特点出现各阶段巨幼红细胞出现各阶段巨幼红细胞G/E比值减低,红系比值减低,红系0.40以早、中幼红细胞为主以早、中幼红细胞为主形态:胞体及核巨大,染色质疏松,浆量形态:胞体及核巨大,染色质疏松,浆量 丰富,核浆发育不平衡,核落后于浆丰富,核浆发育不平衡,核落后于浆粒系、巨核系也有巨幼样变,核分叶过多粒系、巨核系也有巨幼样变,核分叶过多嗜多染红细胞嗜多染红细胞中中性性粒粒细细胞胞巨原红细胞巨原红细胞分叶过多分叶过

22、多 再生障碍性贫血(再生障碍性贫血(aplastic anemia)急性型急性型 全血细胞减少,红髓病变广泛,多部位穿刺显示造血全血细胞减少,红髓病变广泛,多部位穿刺显示造血 细胞减少,仅少数的成熟细胞,非造血细胞(浆细胞、细胞减少,仅少数的成熟细胞,非造血细胞(浆细胞、组织嗜碱细胞、网状细胞等)增多。组织嗜碱细胞、网状细胞等)增多。慢性型慢性型 全血细胞减少的程度与病程进展有关,可有灶性增生,全血细胞减少的程度与病程进展有关,可有灶性增生,要作多部位穿刺,巨核细胞明显减少或缺如。要作多部位穿刺,巨核细胞明显减少或缺如。若病情恶化,与急性相似。若病情恶化,与急性相似。再障患者的骨髓活检结果,可

23、见骨髓腔内的造血组织被脂肪组织替代再障患者的骨髓活检结果,可见骨髓腔内的造血组织被脂肪组织替代再障骨髓造血岛再障骨髓造血岛白血病白血病(Leukemia)急性白血病急性白血病 急性淋巴细胞性白血病急性淋巴细胞性白血病 急性非淋巴细胞性白血病急性非淋巴细胞性白血病慢性白血病慢性白血病 慢粒、慢淋、慢单慢粒、慢淋、慢单 病理特征病理特征造血组织中某一类血细胞过度增生,并浸润和破坏其它组织造血组织中某一类血细胞过度增生,并浸润和破坏其它组织。ANLL-M1活检,大量活检,大量AML细胞充满髓腔细胞充满髓腔 ANLL-M1 ANLL-M2aANLL-M3aANLL-M7ANLL-M5bALL-L3AL

24、L-L2原发性血小板减少性紫癜原发性血小板减少性紫癜(ITP)特点特点 巨核细胞明显增生巨核细胞明显增生 急性型以原始及幼稚型巨核细胞为主急性型以原始及幼稚型巨核细胞为主 慢性型以颗粒巨核细胞为主慢性型以颗粒巨核细胞为主 两型的成熟巨核细胞均减少两型的成熟巨核细胞均减少ITP(低倍镜)低倍镜)ITP大量幼稚巨核细胞大量幼稚巨核细胞巨核细胞成熟障碍巨核细胞成熟障碍巨大血小板巨大血小板总结总结l骨髓细胞学检查的临床应用原则骨髓细胞学检查的临床应用原则 适应症、禁忌症(掌握)适应症、禁忌症(掌握)穿刺部位、注意事项(了解)穿刺部位、注意事项(了解)l血细胞在发育过程中形态演变的一般规律以血细胞在发育

25、过程中形态演变的一般规律以及各系血细胞的形态特点及各系血细胞的形态特点 造血干细胞的特性(了解)造血干细胞的特性(了解)血细胞的生成过程(了解)血细胞的生成过程(了解)血细胞在发育过程中形态演变的一般规律(掌握)血细胞在发育过程中形态演变的一般规律(掌握)红、粒、淋巴、单核、巨核系细胞的形态特征(了红、粒、淋巴、单核、巨核系细胞的形态特征(了解)解)l骨髓涂片检查的方法、内容和结果分析骨髓涂片检查的方法、内容和结果分析 骨髓细胞学检查的步骤骨髓细胞学检查的步骤(熟悉)(熟悉)骨髓增生程度的分级(掌握)骨髓增生程度的分级(掌握)正常骨髓各系列细胞及其各发育阶段细胞的比正常骨髓各系列细胞及其各发育阶段细胞的比 例(掌握)例(掌握)各系列细胞比例改变的临床意义(掌握)各系列细胞比例改变的临床意义(掌握)l细胞免疫分型(了解)细胞免疫分型(了解)l细胞遗传学分析(了解)细胞遗传学分析(了解)复习思考题复习思考题骨髓检查有哪些适应症和禁忌症?骨髓检查有哪些适应症和禁忌症?骨髓检查包括哪些内容?骨髓检查包括哪些内容?正常骨髓的粒红比例是多少?其升高和降正常骨髓的粒红比例是多少?其升高和降低分别见于哪些情况?低分别见于哪些情况?病例分析病例分析9129

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