二价金属离子对磷脂聚集态的影响

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1、二价金属离子对磷脂聚集态的影响The influence of divalent metal ions on theaggregation properties of EYPC化学与分子工程学院2000 级 俞科兵College of chemistry and molecular engineering Yu Kebing摘要主要通过浊度分析和激光光散射光谱研究了二价金属离子(Ca2+、Cu2+、Zn2+ 和Mn2+)对卵磷脂(EYPC)聚集态的影响。结果表明：自由的二价金属离子对 EYPC囊泡有破坏作用，并使EYPC囊泡发生相转变，形成胶束；而与胆汁酸钠 (NaTC, NaGC, NaTD

2、C, NaDC)结合的二价金属离子使EYPC囊泡半径减小， 但不破坏 EYPC 囊泡。关键词: 卵磷脂，二价金属离子，胆盐，聚集态，紫外分析AbstractThe methods of light scattering and UV spectroscopy are applied to follow the effects of divalent metal ions on EYPC vesicles. We conclude free divalent metal ions act to precipitate unilamellar PC vesicles whereas, in com

3、bination with sodium taurocholate, sodium glycocholate, sodium deoxycholate or sodium deoxytaurocholate, these ions act to decrease the size of PC vesicles and some induce a phase transition from PC vesicles to mixed micelles.Keywords: phosphatidylcholine, divalent metal ions, bile salts, aggregatio

4、n properties, UV-vis1前言1.1 胆汁酸胆汁酸是胆汁中存在的一大类胆烷酸的总称，人体中由胆固醇合成而来。胆 酸可分为初级胆汁酸和次级胆汁酸。初级胆汁酸主要为胆酸和鹅脱氧胆酸，二者 在结构上区别为胆酸含三个羟基(3a ,7a ,12a )而鹅脱氧胆酸为两个羟基(3 a，7a)。初级胆汁酸羧基侧链与其他分子结合后生成初级结合胆汁酸，比如牛 磺胆酸，甘氨胆酸等。初级胆汁酸失去一个 7-a 羟基后生成次级胆汁酸，如脱 氧胆酸，脱氧牛磺胆酸等。1.2 磷脂酰胆碱磷脂酰胆碱也称为卵磷脂(phosphatidylcholine PC，结构见图1),系统 名称为1,2-二酰基一sn 甘油一

5、3磷酸胆碱 (1,2-diacyl-sn-glycero-3-phosphocholine)。在磷脂结构中，1,2 位羟基上接 的是长链的非极性基团，称为尾部。而3位羟基上接的是极性的磷酸胆碱，称为 头部。当磷脂溶于水溶液中时，其极性部位指向水相而非极性部位由于不溶于水 而聚集在一起形成中间疏水区，外边亲水的磷脂聚集体，而具体的结构根据磷脂 浓度的不同有所差异。当 PC 浓度小于 cmc(critical micelle concentration) 时，磷脂形成单层的膜结构；当PC浓度大于cmc但小于cvc (critical vesicle concentration)时，磷脂形成球状胶束

6、或棒状胶束；当PC浓度大于cvc时，磷 脂将形成双层囊泡或多层囊泡。在胆囊里这些不同结构的磷脂完成了胆固醇的溶 解和转运。图1 EYPC的分子结构图Fig.1 The structure of EYPC1.3研究背景在胆汁中90以上的磷脂为卵磷脂，并与胆盐和胆固醇形成混合囊泡或胶 团，实现溶解和排泄胆固醇的生理功能，其中胆盐起增溶磷脂的作用，一旦这一 过程发生异常将导致胆固醇的析出，形成结石。因此，有关胆盐和磷脂间相互作 用以及由此引起磷脂相转变的研究已有相当多的报道。Catharina P. Nibbering 等i的研究表明，EYPC/TC比值改变时,胶团的平均水化动力学半径(R)发生变化

7、。hEYPC含量增加，R增加；TC含量增加，R降低。并且稀释EYPC/NaTC溶液可以使胶 hh束(micelles)转化为囊泡(vesicles)。胆汁中除含有大量上述有机物外，还含有 大量金属离子，其中包括相当含量的二价金属离子，如：Ca2 +、Cu2+、Mn2+等。近 几年的研究2-6表明金属离子与胆盐作用将改变其胶化性质，从而影响其生物功 能。我们的研究结果表明7，二价金属离子能够通过配位与胆盐作用，改变胆盐 的聚集状态。但相关的二价金属离子与卵磷脂作用改变其聚集状态，尤其是对胆 盐/卵磷脂混合胶团聚集态的影响尚未见报道。在本文中，我们通过浊度、激光 光散射、透射电镜分析研究了二价金属

8、离子(Ca2+、Cu2+、Zn2+和Mn2+)在胆盐 (TC,GC,TDC )存在的环境中与卵磷脂作用改变其胶团的聚集状态，为研究胆固醇 结石的形成机理提供依据。2实验部分2.1 试剂胆汁酸钠(TC,TDC,DC)为Sigma公司生化试剂，纯度大于97%；蛋黄卵磷脂(EYPC)为北京百泰生化技术公司生化试剂。CaCl2、CuCl2、MnCl2、ZnCl2、NaCl 均为分析纯试剂。2.2 卵磷脂囊泡的制备将一定量的EYPC溶解于氯仿中，在N气氛下自然干燥后，置于真空干燥器2中干燥12小时。将得到的固体EYPC用二次重蒸水溶解，经透射电子显微镜观察, 证实得到是EYPC的囊泡溶液，浓度为2gdm

9、-3。2.3 卵磷脂/牛磺胆酸盐混合体系的制备将一定量的EYPC溶解于氯仿中，再将一系列量的TC溶解于甲醇中，混合后 在N气氛下自然干燥，置于真空干燥器中干燥12小时，将得到的固体用二次重2蒸水溶解，然后超声6小时，得到不同比例的EYPC/TC混合溶液，其中EYPC的 浓度均为2g dm-3。2.4 卵磷脂/胆固醇混合体系的制备将一定量EYPC溶解于氯仿中，再加一定量的胆固醇(chol)溶于其中，其中一部分加入一定量牛磺胆酸钠，分别在N气氛下自然干燥，真空干燥12小时，2 将得到的固体用二次重蒸水溶解并超声 6小时，得到两份溶液。其一为卵磷脂和 胆固醇的混合体系，其中两者比例为 2:1；其二为

10、卵磷脂、胆固醇、牛磺胆酸钠 的混合体系，三者比例为2:1:6。EYPC的浓度均为2 gdm-3。2.5 浊度测定将 c =0.2mol dm-3 的 TC 与 c 2+=1.0 mol dm-3 (M2+二Ca2+、Cu2+、Mn2+、Zn2+) 溶液混合：制成M2+/TC摩尔比不同的混合溶液。将M2+, TC，M2+/TC混合溶液滴加 到上述EYPC溶液中，充分作用后用Shimado UV-3100型的UV-Vis光谱仪在500nm 下测定其吸光度的变化。2.6激光光散射(QLS)用 ALV/DLS/SLS 5722F QLS 光谱仪测量 EYPC 囊泡溶液、 EYPC/TC 及 EYPC/

11、TC/M2+混合溶液中平均水化动力学半径(R)。激光光源采用氩离子激光，波 h长632.8 nm；散射角90。所有样品经12,000Xg离心30 min，在25 C水浴中 恒温15min后进行测试。3结果及讨论3.1金属离子与EYPC的相互作用图2. 2gdm-3 EYPC溶液的TEM照片Fig.2 the TEM photo of EYPC aqueous solution (2 g dm-3)图2是2 gdm-3 EYPC溶液的电镜照片。从图中可见，在溶液中磷脂的存 在方式一般为多层囊泡的结构，在加入金属离子后，金属离子将会诱导磷脂囊泡 向胶束结构的转变。这个变化反映在溶液的物化性质上表现

12、为溶液浊度的变化。 图3为EYPC溶液中加入1 mol dm-3的金属离子溶液后体系的浊度变化曲线。当 体系里加入一价金属离子Na+时，体系浊度变化不大，且Na+达到一定浓度时，吸光度不再发生变化。而当体系中加入二价金属离子(Ca2+, Cw+, Mn2+, Zn2+)时，体 系的浊度随着金属离子的 加入而急剧增大 ，并且在金属离子 浓度约为 0.03 mol dm-3时趋于恒定。FTIR的结果表明沉淀为EYPC。由此可见二价金属离子在 较低的浓度下即可破坏 EYPC 的囊泡结构，降低其溶解度使之析出沉淀；而不同二价离子的作用能力有点差异，原因在于它们之间不同的电子结构使得它们在配 位性能及电

13、性上有差异。ecnabrosbA4208642086422221111100000.00 0.05 0.10 0.15 0.20Concentration of Mn+ (molj 口dm-3 )图3. EYPC囊泡溶液中加入血后体系浊度的变化(图中HO作为参比)2Fig.3 The changes of turbidity of the EYPC aqueous solution by adding Mn+3.2胆盐和EYPC的相互作用ecnabrosbA505053322100000oJI0一一 TDC一 H20一山一 TC一一 C 一*一 DC t GC0.05I I I I I I I

14、 I I-0.0050.000 0.0050.010 0.015 0.020 0.0250.0300.0350.040Concentration of Bile salts (moljndm-3图 4. EYPC 溶液加入不同胆盐后体系浊度的变化Fig.4 The changes of turbidity of EYPC aqueous solution by adding bile salts由于在囊泡向胶束、或胶束向囊泡的转变过程中，YPC将失去其囊泡结构（直 径约为 200nm 左右），形成胶束结构（直径约为 5nm 左右）；或失去胶束结构，形 成囊泡结构。在这个一破一立的过程中，EYP

15、C的溶解度将发生很大的改变。因 此观测溶液浊度变化可以捕捉 EYPC 相转变及聚集态变化的信息1。在图 4 中，随着各种胆盐的加入，体系的浊度缓缓降低，但没有观察到体系 的浊度出现峰值，表明其中并没有发生由囊泡向胶束的相转变过程。从激光光散 射的分析结果可以看到（见表1）,加入TC （c=0.02mol dm-3）后，体系的R值 从201nm降为67nm,意味着加入TC使EYPC囊泡的半径减少，与文献报道一致1。表 1 不同体系中聚集态的水化动力学半径 （R）hTable 1 The changes of hydrodynamic radius （R） in different systems

16、 （thehconcentration of TC is 0.02 mol dm-3)SystemEYPCEYPC+TCEYPC+TC/Ca(l:l)EYPC+TC/Ca (1:5)R (nm)h20167472.7* R: means of at least three measurementsh各种不同胆盐的变化趋势能明显的分成两类：DC, TDC和C, TC, GC。这恰 与胆盐自身的性质一致。 DC, TDC 为两羟基胆盐， C, TC, GC 为三羟基胆盐，在 结构上有一个羟基的差异，这说明在胆盐和 EYPC 的作用过程中，羟基参与了与 EYPC 的反应，并且不同数目的羟基有相异的作

17、用效果。在形成复合囊泡的过程 中，胆盐的甾环平面改变了囊泡中 EYPC 层的曲率，从而分化成半径较小的囊泡。0.0000.005 0.010 0.0150.020Concentration of TC (molj口dm-33.3 TC,金属离子混合溶液与EYPC的相互作用2.8 .2.6 -2.4 :2.2 :2.0 :1.8 :1.6 -1.4 :1.2 -1.0 :0.8 0.6 :0.4 :0.2 :0.0 :-0.2 4图 5. EYPC 溶液加入 TC/Mn+ 后体系浊度的变化Fig. 5 The changes of turbidity of EYPC aqueous soluti

18、on by adding TC and Mn+ mixtures(The molar ratio of TC to Mn+ is 1:5)我们以前的研究结果表明，二价金属离子在溶液中能够与胆盐发生配位作用 使胆盐的聚集状态发生改变。将TC/M2+摩尔比为1:5(M2+的浓度远远大于TC的浓 度)的混合溶液滴入EYPC囊泡溶液后，体系的浊度曲线出现峰值(见图5)，浊 度峰值出现在TC浓度约0.006 moldm-3及Mn+浓度约0.03 moldm-3处，并且对 于不同的二价金属离子浊度峰值出现的位置有细微的差别，Mn2+体系出现得早一 些，而Ca2+和Cu2+的体系则晚一点，Zn2+体系出现得

19、最晚。加入金属离子后体系浊 度的最大值依次为：Mn2+Cu2+Ca2+Zn2+,而一价金属离子Na+则不出现浊度峰值。 浊度峰值的出现意味着随着TC/M2+的加入，体系出现了聚集态结构的变化。当体 系浊度达到最大值时，FTIR的结果表明，体系中出现的沉淀为EYPC。继续增加TC/M2+至0.016 mol dm-3/0.08 mol dm-3，体系澄清，吸光度甚至低于原始值。 激光光散射分析的结果表明(见表1),当TC/Ca2+的浓度加到0.018 mol dm-3/0.09 mol dm-3时，Rh值由原始的201nm变为2.7nm。说明随着TC/M2+的加入，体系 中发生了从囊泡向胶束的聚

20、集态相转变。也就是说，当TC/M2+达到一定浓度(0.006 mol dm-3/0.03 mol dm-3)时，体系原有的聚集态结构被破坏；随着 TC/M2+的继续增加，体系中形成了新的聚集态结构。0.00 111110.000 0.005 0.010 0.015 0.020Concentration of TC (moljdm-3一 Cu:TC=1:1000ecnabrosbA5052020 030Mn:TC=1:1Ca:TC=1:1Na:TC=1:1图 6. EYPC 囊泡溶液中加入 TC/Mn+ (1:1) 后体系浊度的变化Fig.6 The changes of turbidity o

21、f the EYPC aqueous solution by adding taurocholate(TC) and Mn+ mixtures (the molar ratio of TC to Mn+ is 1:1)将TC/Mn+的浓度比改为1:1，从图6可以看到，对于Na+体系与TC/Mn+的浓度 比为1:5的相比具有相同的变化趋势；而对于M2+体系，随着TC/M2+浓度的增加， 体系的浊度曲线没有出现峰值，而是先降低，而后出现一个平台，然后又降低， 最终降低到一定值后，溶液澄清，浊度不再下降，在整个实验范围内，体系浊度 一直没有增加，EYPC的囊泡结构没有被破坏，也没有发生由囊泡向胶束的

22、转换。 反而随着TC/M2+的加入，体系的浊度逐渐减小。由于在溶液里TC-和M2+形成MTC+ 的配合物，因此可以认为当M2+浓度等于TC时,溶液中M2+基本以结合的形式存在。 由此可见，与TC结合的结合态M2+对EYPC囊泡没有破坏作用，而且由于TC与EYPC形成混合结构使得 EYPC 在水中的溶解度增加，因而体系的浊度降低。而激光光 散射的分析结果亦表明（表1）,当TC/Ca2+的浓度为0.02mol dm-3/0.02 mol dm-3, 体系为澄清态时，聚集态粒子的R为47nm。说明在EYPC的囊泡溶液中加入浓度 h比为1:1的TC/M2+溶液后，体系没有相转变过程发生。由此可见，对于

23、不同比例 的 TC/M2+, EYPC 的变化过程有很大区别。从图 7,8,9,10 中可以看出，不同金属离子和 TC 所形成的混合溶液对 EYPC 结构的影响有差异，引起 EYPC 相变化的 M2+/TC 比例有区别。对于 Ca2+/TC 和 CU2+/TC,能引起EYPC相变的最小比例为2:13:1之间；而Me+/TC能引起EYPC 的最小比例为1:12:1之间；对于Zn2+/TC,其比例在3:15:1。对于小于此比例 的M2+/TC混合溶液不能引发EYPC体系的相变。由此说明即使同一价态不同金属 对磷脂体系的作用还是有区别，因此两者作用方式不仅是电价作用，而且还存在配位作用。502250

24、5110 ecnabrosbA0.000 0.005 0.010 0.015 0.020The concentration of TC (moljdm-一 Ca:TC=5:1一 Ca:TC=3:1Ca:TC=2:1Ca:TC=1:1Ca:TC=1:2图 7. EYPC 溶液中加入不同浓度比例的 Ca2+/TC 后体系的变化Fig.7 The changes of turbidity of the EYPC aqueous solution by adding C2+a andTC mixture2.52.0一一 Cu:TC=5:1 一*一 Cu:TC=3:1 _A_ Cu:TC=2:1Cu:T

25、C=1:1Cu:TC=1:25 0 5 01 1 0 0ecnabrosbA0.000 0.005 0.010 0.015 0.020The concentration of TC (moljdm-3 )图 8. EYPC 溶液中加入不同浓度比例的 Cu2+/TC 后体系的变化Fig.8 The changes of turbidity of the EYPC aqueous solution by adding C2+u andTC mixtureecnabrosbA8642 0 8642 0 86 422 2 2 2 2 1 1 1 1 1 0 0 0 0一一 Mn:TC=2:1 一Mn:

26、TC=1:2Mn:TC=1:1T Mn:TC=5:1-0.20.0000.0050.0100.0150.020The concentration of TC (moljdm-3 )图 9. EYPC 溶液中加入不同浓度比例的 Mn2+/TC 后体系的变化Fig.9 The changes of turbidity of the EYPC aqueous solution by adding M2+n andTC mixtureecnabrosbA0.00.0000.0050.0100.0150.020The concentration of TC (moljndm-3一 Zn:TC=5:1一

27、Zn:TC=3:1 *一 7n:TC=2142080604020图 10. EYPC 溶液中加入不同浓度比例的 Zn2+/TC 后体系的变化Fig.10 The changes of turbidity of the EYPC aqueous solution by adding Zn2+ andTC mixture3.4不同胆盐，Ca2混合溶液与EYPC的作用规律3.0一一 TDC:Ca=1:5 GC:Ca=1:5 占 TC:Ca=1:5ecnabrosbA5050221150000.0000.0050.0100.0150.020Concentration of Bile salts (mo

28、ljndm-3图 11. EYPC 溶液中加入不同种类胆盐与 Ca2+ 离子混合溶液后的浊度变化 (BS:Ca2+=1:5)Fig.11 The changes of turbidity of the EYPC aqueous solution by adding bile saltand Ca2+ mixture从图11可以看出，作为三羟基胆盐的GC和TC有相似的变化规律，而与二 羟基胆盐TDC有明显的不同。GC,TC与Ca2+形成的混合溶液（1:5）均能使EYPC发 生相转变，相反加入1:5的TDC/Ca2+至EYPC中后，体系的浊度逐渐由0.35降低 到 0.1，过程中不出现浊度峰，说明

29、体系并没有发生相转变。这与图4 的结果一 致。进一步证明在胆盐和 EYPC 的作用过程中，胆盐上起决定作用的基团是甾环 平面，上面的羟基处于一个重要的位置，直接影响与 EYPC 的作用位点；而胆酸 衍生部分即末端羧基结合基团的性质对于胆盐与 EYPC 相互作用的结果影响不太 大。图 12. TC 的立体结构Fig.12 The stereo structure of steroid rings of TC: C: O图 13. TDC 的立体结构Fig. 13 The stereo structure of steroid rings of TDC3.5 EYPC,TC 混合溶液与锰离子的相互

30、作用表 2 不同 EYPC,TC 比例溶液的水化动力学半径分布曲线的峰值分布EYPC/TC=1/3EYPC/TC=1/1EYPC/TC=3/1峰值/nm6.7642.38.1766.18.6078.4相对高度10.710.4710.051EYPC/TC=5/19.7031.10.271在不同相对比例的 EYPC,TC 配比制备的溶液中， EYPC 有不同聚集状态。表 2 中给出的激光光散射数据指明了不同配比的 EYPC/TC 溶液有不同的粒径分布。文 献报道22-23当磷脂与较低浓度胆盐（CmC ）作用时，磷脂囊泡的形状将会有所被改 变；当磷脂/胆盐1/2 时，主要形成双层盘状胶束；当磷脂/胆

31、盐1/2 时，主要 生成均匀的球状胶团。而不同的磷脂结构对金属离子的作用结果有所差异。ecnabrosbA2211005050.00 0.05 0.10 0.15 0.20 0.25 0.30Concentration of Mn2+ (moldm-3 )图 14. EYPC,TC 混合溶液中加入 Mn2+ 后体系浊度的变化Fig.14 Change of turbidity of the EYPC and TC mixture by adding Mn2+图 14 反映了 Mn2+ 加入至不同 EYPC/TC 配比的溶液后体系浊度的变化规律。 从图中可以看出，对于EYPC/TC为5:1, 3

32、:1的溶液，由于磷脂囊泡为主要结构, 在Mn2+的作用下囊泡被破坏形成沉淀而使体系浊度急剧增加o EYPC/TC为1:1时, 体系中主要是双层盘状胶束，这种结构对Mn2+离子有比较好的抵抗作用，因此在 加入Mn2+的过程中，体系的浊度并不发生很大变化。EYPC/TC为1:3时，体系中 主要为球状胶团，而胶团结构对Mn2+的抵抗能力较弱，因此加入Mn2+后，胶团被 聚集形成沉淀，体系的浊度快速上升。而对于 EYPC/TC 为 1:5 的溶液，由于体系 中游离着很多的自由TC，可以与加入了的Mn2+发生配位络合，而结合态的金属离 子对磷脂没有破坏作用，所以浊度曲线表现为一条平直的曲线。因此 EYP

33、C/TC 为1:1或1:5左右的溶液比较稳定，能够抑制自由Mn2+的破坏作用。图6中从c (TC) 为4 mmol dm-3开始的一个缓冲平台也说明此时形成了一种相对稳定的聚集体 (此时EYPC/TC为0.6)EYPC和TC的混合囊泡在胆囊里作为胆固醇的主要载体, 能起增溶胆固醇的作用，但是在加入自由的金属离子以后，磷脂囊泡被破坏，溶 解的胆固醇析出，最后将形成胆结石。3.6 M2+与EYPC,胆固醇混合体系的相互作用ecnabrosbACu2+;PC:ch=2:1Ca2+;PC:ch=2:1Mn2+：PC：ch=2：10.00 0.05 0.10 0.15 0.20 0.25Concentr

34、ation of M2+ (molj口dm-3 )图15. EYPC，胆固醇混合体系中加入M2+后体系浊度变化642222ecnabrosbA0 8 6 4 221111Fig.15 The changes of turbidity of the EYPC and chol mixture by adding M2+0.8 1 1 1 1 10.00 0.05 0.10 0.15 0.20Concentration of M2+ (molj口dm-3 )图16. EYPC,TC,胆固醇混合体系中加入M2+后体系浊度变化Fig.16 The changes of turbidity of the

35、 EYPC，TC and chol mixture by adding M2+磷脂在生理上的其中一个作用是溶解胆固醇，防止在胆囊里发生由于胆固醇 的沉淀而引起的胆结石病症。图 15 和图 16 表示在混合体系中加入各种金属离子 时体系浊度的变化情况。通常金属离子和磷脂囊泡作用有两种情形：金属离子破 坏 PC 囊泡并使之形成沉淀或是金属离子融合 PC 囊泡形成更大的多层囊泡。图 15中Ca2+,CU2+形成的浊度曲线比较一致而与Mn2+的曲线有较大区别。加入此三种 金属离子后体系浊度升高，说明与 PC 囊泡的作用方式均以破坏囊泡为主，而继 续加入MN2+后，体系浊度反而有点降低，说明MN2+有一

36、定的融合囊泡的能力，形 成更大的多层囊泡，增加了磷脂对胆固醇的溶解能力，所以体系浊度会有所降低。这一点和某些稀土离子的行为比较相似。图16的结果与图15类似：加入金属离 子后，磷脂、胆盐的混合胶团被破坏，溶解在里面的胆固醇和磷脂一起被沉淀出来，使浊度上升。当金属离子浓度0.04mol dm-3附近时，体系浊度达到最大4结论自由的二价金属离子对EYPC囊泡的破坏作用远远大于Na+,这种破坏作用是 产生EYPC相转变（从磷脂到囊泡）的动力；与TC结合的M2+对EYPC没有破坏作 用,也不能使囊泡发生相转变；适当比例的EYPC/TC混合囊泡是一种比较稳定的 存在，能够抑制自由Ca2+的破坏作用。在胆

37、盐和磷脂的作用过程中，胆盐上的作 用位点为它的甾环平面，其结构对于两者的相互作用效果起了很大影响。致谢首先应当感谢李政道先生和已故的秦惠女士，正是他们热心的资助，才使 我提前走入实验室，享受发现的快乐。实验室的具体工作是在杨展澜副教授的指导下完成的。每次与杨老师讨论 实验进展，设计实验方案，分析试验结果时都能得到她的精心指导，使我受益匪 浅。这篇论文的完成，同样凝结着她的心血，在这里，同样向她致以最最诚挚的 谢意。在此期间本实验室的老师和同学为我的学习和工作提供了许多便利，与他 们的讨论常常是我思想的源泉。在此向他们表达我深深的谢意。最后，向生我、养我，永远给我以莫大关怀的父母致以最诚挚的感谢

38、，他 们所给予我的，是我永远无法报答的。参考文献1. Catharina P. Nibbering, Peter M. Frederik, Gerard P. van Berge-Henegouwen, Henk A. vanVeen, Jan van Marle, Karel J. van Erpecum, Biochimica et Biophysica Acta 2002, 1583: 2132. Liu ZJ, Wu JG, Zhao W, Wu PQ, Soloway RD, Xu GX. Acta Scientiarum NaturaliumUniversitis Pekinens

39、is, 1994, 30(6): 641 刘之俊，吴瑾光，赵纬，吴佩强，R. D. soloway, 徐光宪，北京大学学报(自然科学版)(Beijing Daxue Xuebao) 1994, 30(6): 6413. Tomoki Tanaka, Yukihiro Tamba, Shah Md. Masum, Yuko Yamashita, Masahito Yamazaki, Biochimica et Biophysica Acta 2002, 1564: 1734. Feroci G, Fini A, Fazio G, Roda A, Zuman P, Microchemical Jo

40、urnal, 1997, 55 (3): 3825. Fini A, Feroci G, Fazio G, Zuman P, Journal of Inorganic Biochemistry, 1997, 68 (4): 2516. Feroci G, Fini A, Fazio G, Zuman P, Analytical Chemistry, 1995, 67 (22): 40777. Y. Sun, Z-L. Yang, L. Zhang, T-D. Hu, R.D. Soloway, S-F. Weng, J-G. Wu, Spectrochimica Acta Part A 200

41、2, 58: 14898. Elizabeth Mukidjam, Stephen Barnes, Gabriel A. Elgavish, J. Am. Chem. Soc., 1986, 108(22): 70829. Moore, E. Hepatology 1984, 4: 228S10. Gilat T, Somjen GJ, BBA-Rev Biomembranes, 1996, 1286 (2): 9511. Different interactions of egg-yolk phosphatidylcholine and sphingomyelin with detergen

42、t bile salts. Catharina P. Nibbering, Peter M. Frederik, Gerard P. van Berge-Henegouwen, Henk A. van Veen, Jan van Marle, Karel J. van Erpecum, Biochimica et Biophysica Acta 1583 (2002) 213- 22012. NMR studies of the binding of sodium and calcium ions to the bile salts glycocholate and taurocholate

43、in dilute solution, as probed by the paramagnetic lanthanide dysprosium, Elizabeth Mukidjam, Stephen Barnes, Gabriel A. Elgavish, J. Am. Chem. Soc., 1986, 108:22, 7082-708913. Moore, E. Hepatology 1984, 4, 228S-243S14. La3+ and Gd3+ induce shape change of giant unilamellar vesicles of phosphatidylch

44、oline, Tomoki Tanaka, Yukihiro Tamba, Shah Md. Masum, Yuko Yamashita, Masahito Yamazaki, Biochimica et Biophysica Acta 2002, 1564, 173-18215. The vesicle-to-micelle transition of phosphatidylcholine vesicles induced by nonionic detergents: efects of sodium chloride, sucrose and urea, Anne Walter, Gw

45、endolyn Kuehl, Kerri Barnes, Gregg Vander Waerdt, Biochimica et Biophysica Acta 2000, 1508, 20-3316. Reactions of small aggregates of taurine conjugates of dihydroxy bile salts with divalent transition metal ions, Feroci G, Fini A, Fazio G, Roda A, Zuman P, MICROCHEMICAL JOURNAL, 55 (3): 382-391 MAR

46、 199717. Interaction of iron(II) with bile salts, Fini A, Feroci G, Fazio G, Zuman P, JOURNAL OF INORGANIC BIOCHEMISTRY, 68 (4): 251-256 DEC 199718. Interaction between dihydroxy bile-salts and divalent heavy-metal ions studied by polarography, Feroci G, Fini A, Fazio G, Zuman P, Analytical Chemistr

47、y, 67 (22): 4077-4085 nov 15 199519. The interaction of Cu2+ions and NaDC micelles, Y. Sun, Z-L. Yang, L. Zhang, T-D. Hu, R.D. Soloway, S-F. Weng, J-G. Wu, Spectrochimica Acta Part A 58 (2002) 1489149820. 激光光散射及荧光光谱法研究金属离子对牛磺胆酸钠胶团性质的影响，刘之俊，吴瑾光， 赵纬，吴佩强，R. D. soloway，徐光宪，北京大学学报(自然科学版),1994, 30:6, 641-

48、65021. Gilat T, Somjen GJ, Phospholipid vesicles and other cholesterol carriers in bile,BBA-Rev Biomembranes 1286 (2): 95-115 JUN 10 199622. Tuvia Gilat, Giora J.Somjen, Biochemica Biophysica Acta, 1996, 1286:95-11523. Muller K., Biochemistry, 1983, 20:404-414作者简介：俞科兵，男，1982 年 1 月出生于宁波，高中就读于浙江省鄞县中学，

49、于2000 年 1 月参加全国化学竞赛决赛冬令营，获得一等奖并于同年保送进入北京大学化 学与分子工程学院。在校期间学习良好，并于2002年 3月初进入北京大学稀土 材料及应用国家重点实验室分子光谱组见习研究至今。研究方向为二价金属离子 对于胆盐及磷脂聚集态的影响。至今已在物理化学学报上发表论文一篇，另 有学术会议论文一篇。感悟与寄语： 科研是辛苦的：我得面对这一大堆枯燥而又乏味的数据，终日里不得不与冷 冰冰的仪器打交道，而且有时还不得不面对失败。它需要我去投入精力和时间， 加上百分百的耐心。然而科研又是快乐的：当我从纷繁的数据中理出一条头绪时， 当我从实验的结果中悟出科学的规律时，当我的论文终

50、于被刊发时，收获的喜悦 油然而生。感谢“ 政”给了我一个机会，使得我能有机会学习如何面对困难， 如何承受挫折，如何由失败走向成功。零距离接触科研，此间的财富会使我终身 受益。指导教师简介：杨展澜：副教授， 1998 年在北京大学化学学院获得博士学位，同年留校任 教，从事化学的无机化学的教学工作。主要研究领域为生物无机化学，感兴趣的 研究方向为（1）生物矿化以生物体中的难溶无机盐与磷脂、蛋白及生物表 面活性剂的相互作用为基础，研究生物分子膜诱导的难溶无机盐的沉积状态、图 形和堆砌结构。（2）金属离子与生物分子的相互作用研究在生物分子间相 互作用中金属离子的影响及作用，以及金属离子对磷脂相转变的影响。发表 SCI 收录论文 50 篇，获教育部科技进步一等奖一项。