细胞工程复习课件

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1、一、植物组织培养的过程一、植物组织培养的过程离体的植物器官、组织或细胞离体的植物器官、组织或细胞脱分化（又叫去分化）脱分化（又叫去分化）愈伤组织愈伤组织（排列疏松而无规则，高度液泡（排列疏松而无规则，高度液泡化的呈无定形状态的薄壁细胞）化的呈无定形状态的薄壁细胞）再分化再分化根或芽等器官根或芽等器官植物体植物体*植物组织培养有什么条件？植物组织培养有什么条件？*植物组织培养生殖的类型属于？植物组织培养生殖的类型属于？无性生殖无性生殖离体、一定的离体、一定的营养物质营养物质、激素和其他外界条件（温、激素和其他外界条件（温度、空气、无菌环境、适合的度、空气、无菌环境、适合的PHPH、适时、适时光照

2、光照等。）等。）植物组织培养的应用实例植物组织培养的应用实例*培育无毒苗培育无毒苗*提取紫草素提取紫草素*制造人工种子制造人工种子离体的植物离体的植物器官、组织器官、组织或细胞或细胞脱分化脱分化愈伤组织愈伤组织再分化再分化根或芽等器官根或芽等器官植物体植物体.培育无毒苗用什培育无毒苗用什么材料？么材料？.提取紫草素应培提取紫草素应培养进行到？养进行到？.若想制作人工种若想制作人工种子应选用？子应选用？愈伤组织愈伤组织胚状结构胚状结构根尖、茎尖根尖、茎尖1 1(0808江苏江苏)下列关于植物组织培养的叙述下列关于植物组织培养的叙述中，错误的是中，错误的是A A培养基中添加蔗糖的目的是提供营养和培

3、养基中添加蔗糖的目的是提供营养和调节渗透压调节渗透压B B培养基中的生长素和细胞分裂素影响愈培养基中的生长素和细胞分裂素影响愈伤组织的生长和分化伤组织的生长和分化C C离体器官或组织的细胞都必须通过脱分离体器官或组织的细胞都必须通过脱分化才能形成愈伤组织化才能形成愈伤组织D D同一株绿色开花植物不同部位的细胞经同一株绿色开花植物不同部位的细胞经培养获得的愈伤组织基因相同培养获得的愈伤组织基因相同D二、植物体细胞杂交过程二、植物体细胞杂交过程原生质体制备（酶解法去细胞壁）原生质体制备（酶解法去细胞壁）原生质体融合（人工诱导）原生质体融合（人工诱导）杂种细胞的筛选和培养（植物组织培养）杂种细胞的筛

4、选和培养（植物组织培养）杂种植株的再生与鉴定杂种植株的再生与鉴定物理法：物理法：离心、振动、电刺激等离心、振动、电刺激等化学法：化学法：聚乙二醇等试剂聚乙二醇等试剂纤维素酶、果胶酶等纤维素酶、果胶酶等2 2、下图为用细胞杂交方法培育番茄薯的过程图，请下图为用细胞杂交方法培育番茄薯的过程图，请据图回答：据图回答：番茄细番茄细胞胞马铃薯马铃薯细胞细胞番茄马番茄马铃薯细铃薯细胞胞杂种植物杂种植物幼苗幼苗1 12 2（1 1）过程）过程1 1叫叫_技术；过程技术；过程2 2叫叫_技术；技术；过程过程1 1之前进行之前进行_的处理。的处理。（2 2）番茄马铃薯能相互嫁接，但进行有性杂交却无法获）番茄马铃

5、薯能相互嫁接，但进行有性杂交却无法获得种子，这是因为二者存在着得种子，这是因为二者存在着_现象。现象。（3 3）用这种方法进行杂交的最大优点是）用这种方法进行杂交的最大优点是_。细胞融合细胞融合植物组织培养植物组织培养破除细胞壁破除细胞壁生殖隔离生殖隔离打破了远源杂交不亲和的难题，能获得种间杂种打破了远源杂交不亲和的难题，能获得种间杂种三、动物细胞培养三、动物细胞培养动物胚胎或幼龄动物动物胚胎或幼龄动物 的组织、器官的组织、器官细胞悬浮液细胞悬浮液胰蛋白酶胰蛋白酶细胞间有胶原蛋白细胞间有胶原蛋白10代细胞代细胞原代培养原代培养50代细胞代细胞传代培养传代培养 细胞株细胞株 无限传代无限传代 细

6、胞系细胞系遗传物质遗传物质未改变未改变遗传物质改变遗传物质改变，无限增殖无限增殖动物细胞培养不能动物细胞培养不能最终培养成生物体最终培养成生物体因为这些组织或器官上的细胞生因为这些组织或器官上的细胞生命力旺盛，分裂能力强命力旺盛，分裂能力强分散成单个细胞分散成单个细胞大部分细胞死亡大部分细胞死亡记记3.(083.(08宁夏宁夏 改改)回答下列有关动物细胞培养的回答下列有关动物细胞培养的问题：问题：在动物细胞培养过程中，当贴壁细胞分裂生在动物细胞培养过程中，当贴壁细胞分裂生长到细胞表面长到细胞表面_时，细胞会停止分裂时，细胞会停止分裂增殖。此时，瓶壁上形成的细胞层数是增殖。此时，瓶壁上形成的细胞

7、层数是_。要使贴壁的细胞从瓶壁上分离下。要使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来，需要用来，需要用_酶处理。分离下来的细酶处理。分离下来的细胞配置成细胞悬浮液，再进行培养，称为胞配置成细胞悬浮液，再进行培养，称为_。相互接触相互接触单层单层胰蛋白胰蛋白传代培养传代培养3.(083.(08宁夏宁夏 改改)回答下列有关动物细胞培养的回答下列有关动物细胞培养的问题：问题：随着细胞传代次数的增多，绝大部分细胞随着细胞传代次数的增多，绝大部分细胞分裂停止，进而出现分裂停止，进而出现_现象；现象；但极少数细胞可以连续增殖，其中有些细胞但极少数细胞可以连续增殖，其中有些细胞会因遗传物质发生改变而变成会因遗传物质发生改

8、变而变成_细胞，细胞，该种细胞的黏着性该种细胞的黏着性_，细胞膜表面蛋，细胞膜表面蛋白质（糖蛋白）的量白质（糖蛋白）的量_，这种传代细，这种传代细胞称为胞称为_。衰老甚至死亡衰老甚至死亡不死不死降低降低减少减少细胞系细胞系3.(083.(08宁夏宁夏 改改)回答下列有关动物细胞培养的回答下列有关动物细胞培养的问题：问题：现用某种大分子染料，对细胞进行染色时，现用某种大分子染料，对细胞进行染色时，观察到死细胞被染色，而活细胞不染色，原因观察到死细胞被染色，而活细胞不染色，原因是是_。检查某种物质对细胞的影响，最好选用细胞检查某种物质对细胞的影响，最好选用细胞分裂到分裂到_期的细胞用显微镜观察其染

9、色期的细胞用显微镜观察其染色体，根据体，根据_ _ _ _ _可判断该物质的毒性。可判断该物质的毒性。由于活细胞的膜具有选择透过性，大分子染料不能进入由于活细胞的膜具有选择透过性，大分子染料不能进入活细胞内，故活细胞不能着色（或由于死细胞的膜丧失活细胞内，故活细胞不能着色（或由于死细胞的膜丧失了选择透过性，大分子染料能够进入死细胞内而着色）了选择透过性，大分子染料能够进入死细胞内而着色）中中变异细胞占全部培养细胞的百分数变异细胞占全部培养细胞的百分数 3.(083.(08宁夏宁夏 改改)回答下列有关动物细胞培养回答下列有关动物细胞培养的问题：的问题：在细胞培养过程中，通常在在细胞培养过程中，通

10、常在_条件条件下保存细胞。因为在这种条件下，细胞中下保存细胞。因为在这种条件下，细胞中_的活性降低，细胞的活性降低，细胞_的的速率降低。速率降低。给患者移植经细胞培养形成的皮肤组织后，给患者移植经细胞培养形成的皮肤组织后，发生了排斥现象，这是因为机体把移植的皮发生了排斥现象，这是因为机体把移植的皮肤组织当作肤组织当作_进行攻击。进行攻击。冷冻冷冻酶酶新陈代谢新陈代谢抗原抗原四、单克隆抗体制备过程：四、单克隆抗体制备过程：注射抗原注射抗原B B淋巴细胞淋巴细胞骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞细胞融合、筛选细胞融合、筛选杂交瘤细胞杂交瘤细胞细胞培养细胞培养筛选，继续培养筛选，继续培养足够数量的、能产生足够数量

11、的、能产生特定抗体的细胞群特定抗体的细胞群体外培养体外培养注射到小鼠腹腔注射到小鼠腹腔单克隆抗体单克隆抗体（选择性培养基）（选择性培养基）思考：思考：此过程制备此过程制备的单克隆抗体能否的单克隆抗体能否用于人体疾病的治用于人体疾病的治疗？为什么？疗？为什么？不能，小鼠的效应不能，小鼠的效应细胞产生的抗体与人细胞产生的抗体与人的效应细胞产生的的效应细胞产生的抗体不同抗体不同4.4.（0909山东山东 改）人类在预防与改）人类在预防与诊疗传染性疾病过程中，常使用诊疗传染性疾病过程中，常使用疫苗和抗体。已知某传染性疾病疫苗和抗体。已知某传染性疾病的病原体为的病原体为RNARNA病毒，该病毒表病毒，该

12、病毒表面的面的A A蛋白为主要抗原，其疫苗蛋白为主要抗原，其疫苗生产和抗体制备的流程之一如下生产和抗体制备的流程之一如下图，请回答：图，请回答：（1 1）过程）过程代表的是代表的是 。（2 2）过程）过程构建构建A A基因表达载体时，基因表达载体时，必须使用必须使用 和和 两种工具酶。两种工具酶。逆转录逆转录限制性内切酶限制性内切酶DNADNA连接酶连接酶 （3 3）过程）过程采用的实验技术采用的实验技术是是 ，获得的，获得的X X是是 。（4 4）单克隆抗体制备过程中，）单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和骨髓瘤细胞和B B淋巴细胞诱导融淋巴细胞诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂合后，要用特定

13、培养基筛选出杂交瘤细胞。在这种培养基上不能交瘤细胞。在这种培养基上不能存活、增殖的细胞是（填序号）：存活、增殖的细胞是（填序号）：_B B淋巴细胞淋巴细胞小鼠骨髓瘤细胞小鼠骨髓瘤细胞B B淋巴细胞淋巴细胞自身融合细胞自身融合细胞小鼠骨髓瘤细胞小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞自身融合细胞杂交瘤细胞杂交瘤细胞细胞融合细胞融合杂交瘤细胞杂交瘤细胞 （5 5）与传统的从血清中提取的）与传统的从血清中提取的抗体相比，单克隆抗体的优点是抗体相比，单克隆抗体的优点是 （6 6）用此单抗制成）用此单抗制成“生物导生物导弹弹”，其中抗体的作用是：，其中抗体的作用是：化学性质单一、特异化学性质单一、特异性强、灵敏度高性

14、强、灵敏度高将药物定向带到患病细胞所在部位将药物定向带到患病细胞所在部位 （7 7）对健康人进行该传染病免）对健康人进行该传染病免疫预防时，可选用图中基因工程疫预防时，可选用图中基因工程生产的生产的 所制备的疫苗。所制备的疫苗。对该传染病疑似患者确诊时，可对该传染病疑似患者确诊时，可从疑似患者体内分离病毒，与已从疑似患者体内分离病毒，与已知病毒进行知病毒进行 比比较；或用图中的较；或用图中的 进进行特异性结合检测。行特异性结合检测。A A蛋白蛋白核酸（基因）序列核酸（基因）序列抗抗A A蛋白的单克隆抗体蛋白的单克隆抗体细胞细胞生命的物质生命的物质基础基础构成生物体构成生物体的化学元素的化学元素

15、构成细胞的构成细胞的化合物化合物大量元素大量元素微量元素微量元素无机物：水、无机盐无机物：水、无机盐有机物：糖类、脂质、有机物：糖类、脂质、propro植物植物动物动物细胞细胞工程工程细胞膜细胞膜 成分、结构、功能成分、结构、功能细胞核细胞核 结构、功能结构、功能细胞质细胞质细胞质基质细胞质基质 功能功能细胞器细胞器液泡液泡线粒体线粒体叶绿体叶绿体内质网内质网核糖体核糖体高尔基体高尔基体中心体中心体溶酶体溶酶体结构结构功能功能细胞细胞增殖增殖无丝无丝分裂分裂减数减数分裂分裂有丝有丝分裂分裂分裂分裂间期间期分裂期分裂期前期前期中期中期后期后期末期末期细胞细胞分化分化生物体生物体癌变癌变衰老衰老细胞细胞结构结构功能功能