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1、1实验119 碘-淀粉比色法测定淀粉酶董雷鸣2一、概述（一）淀粉酶的分类（一）淀粉酶的分类-淀粉酶（人体）-淀粉酶（植物、微生物）3（二）含淀粉酶的人体组织（二）含淀粉酶的人体组织胰腺唾液腺（腮腺）胃、胆囊、输卵管、子宫、脾、空肠、回肠、骨骼肌等 4（三）淀粉的分类（三）淀粉的分类直链淀粉（糖淀粉）支链淀粉（胶淀粉）5直链淀粉(糖淀粉)的结构6碘淀粉包合物碘淀粉包合物结构7支链淀粉(胶淀粉)的结构8葡萄糖单位连接键分子量自然界中的比例直链50-250个-1，4糖苷键150000 -60000010-20%支链250-500个-1，4糖苷键-1，6糖苷键1000000 -600000080-90
2、%9(一一)原理原理二、实验-淀粉酶淀粉 葡萄糖+麦芽糖+糊精+碘液兰色包合物兰色包合物10(二二)试剂试剂 淀粉溶液（0.4g/L）碘应用液11(三三)操作操作加入物空白管测定管缓冲淀粉溶液(37预温)0.50.5稀释血清0.1 混匀，置37水浴准确15min碘应用液0.50.5蒸馏水3.13.0混匀，蒸馏水调零，波长660nm，比色。12(四四)单位定义单位定义 100ml血清中的淀粉酶，在37,15min水解淀粉5mg为1个单位。13(五五)计算计算空白管吸光度测定管吸光度 100 15 0.40.5 空白管吸光度 0.01 15 5淀粉酶（U）=100ml血清中的淀粉酶，在37,15m
3、in水解淀粉5mg为1个单位。（）400=（ml）（min）（mg）14(六六)参考值参考值 血清 80-180U 尿液 100-1200U15(七七)临床意义临床意义 升高 急性胰腺炎、流行性腮腺炎；急性胆囊炎、肠梗阻、胰腺癌、胆石症、溃疡病穿孔及吗啡注射后。降低 肝炎、肝硬化、肝癌；肾功能障碍。16急性胰腺炎时血、尿淀粉酶升高的不同表现开始升高时间高峰时间恢复时间血清8-12h12-24h2-5d尿液12-24h5-7d1-2w17(八八)注意事项注意事项 草酸盐、枸橼酸盐、EDTA-Na2及氟化钠对淀粉酶有抑制作用，肝素无抑制作用。唾液含高浓度淀粉酶，须防止带入。缓冲淀粉溶液若出现浑浊或
4、絮状物，应重新配制。18实验115 比色法测定血清碱性磷酸酶董雷鸣19一、概述含碱性磷酸酶酶的人体组织含碱性磷酸酶酶的人体组织骨骼肝脏肠黏膜细胞胎盘等20(一一)原理原理二、实验碱性磷酸酶磷酸苯二钠 磷酸 +酚酚+4-氨基氨替比林铁氰化钾醌类化合物醌类化合物21(二二)试剂试剂 碳酸盐缓冲液(pH 10)磷酸苯二钠底物溶液 铁氰化钾溶液 酚标准应用液 酚标准应用液22(三三)操作操作(Beckman CX7全自动生化分析全自动生化分析系统系统)23Beckman CX7的规格的规格 检测量 900个检验结果/小时 检测项目及种类（共33项）电解质、急诊项目、普通生化、特殊生化、免疫、蛋白、药物
5、检测、毒品检测 检测样品种类 血清、血浆、尿液、脑脊液24(四四)单位定义单位定义 100ml血清在37与底物作用15min,产生1mg酚为1个金氏单位。25(五五)参考值参考值 成人 3-13金氏单位 儿童 5-28金氏单位26(六六)临床意义临床意义 血清ALP活力测定常为肝胆疾病和骨骼疾病的临床辅助诊断指标。27 活性升高 骨paget病、恶性肿瘤骨转移或肝转移、佝偻病、骨软化、骨折愈合期、成骨细胞瘤；胆道梗阻、甲旁亢等。活性降低（少见）呆小病、磷酸酶过少症、维生素C缺乏症等。28(七七)注意事项注意事项 底物溶液中不应有游离酚，如有酚则空白管显红色，说明磷酸苯二钠开始分解，应弃去不用。铁氰化钾溶液应避光保存，出现蓝绿色应废弃。加入铁氰化钾溶液后必须立即混匀，否则显色不完全。
碘-淀粉比色法测定淀粉酶课件
