第17章弧菌科

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1、第十七章第十七章 霉形体霉形体 。支 原 体(霉形体)定义:又称为霉形体。是介于细菌与病毒之间、无细胞壁、能独立生活的最小的单细胞原核微生物。1、形态特征 由于无细胞壁,故形态多样,G-。无细胞壁,细胞膜厚2.5-10NM,菌体具高度多形性,G阴性菌,无鞭毛,能通过细菌滤器。以二分裂为主,也可出芽增殖。人工培养营养要求较高。抵抗力较弱,治疗时可选用敏感抗生素。支原体(无细胞壁)在电子显微镜下形态不一,有些为圆形,有些呈梭状在固体培养基上,用放大镜观察,呈乳头状。油煎蛋状菌落油煎蛋状菌落0.10.15mm形形态态结结构构多形态,能通过滤器多形态,能通过滤器无细胞壁无细胞壁染色:染色:Giemsa

2、Giemsa呈紫(呈紫(Gram-Gram-)荚膜(肽聚糖)荚膜(肽聚糖)细胞膜(胆固醇、长链脂肪酸)细胞膜(胆固醇、长链脂肪酸)型特异性抗原:外层蛋白型特异性抗原:外层蛋白顶端结构顶端结构参与吸附参与吸附支 原 体(霉形体)2、生理特性兼性厌氧菌,对营养要求较高,在培养基中需加入酵母浸汁或马血清、牛心浸液,有的菌株初代分离需5%的CO2,95%N2才能生长。菌落呈煎荷包蛋样或乳头突起状。3、致病性大多数是致病菌,少数为腐生菌,引起呼吸系统的疾病抵抗力抵抗力无细胞壁,因而无细胞壁,因而比细菌敏感比细菌敏感 如干、热、酸如干、热、酸,有机溶剂有机溶剂,表面活性剂等表面活性剂等耐耐内酰胺等胞壁合成

3、干扰抗生素内酰胺等胞壁合成干扰抗生素对对其它抗生素敏感其它抗生素敏感(干扰蛋白质合成或作(干扰蛋白质合成或作用于固醇等等),可用于用于固醇等等),可用于治疗治疗培养特性培养特性繁殖方式:二分裂为主,也可出芽繁殖方式:二分裂为主,也可出芽独立营养。要求高独立营养。要求高生长缓慢(生长缓慢(3 310d10d)液体培养不易见混浊液体培养不易见混浊 典型的菌落呈典型的菌落呈油煎蛋样油煎蛋样 (直径(直径0.10.10.15mm0.15mm)支原体治疗支原体治疗红霉素类、泰乐菌素、替米考星;恩诺沙星等喹诺酮类;泰妙菌素;四环素类等培养特性培养特性繁殖方式:二分裂为主,也可出芽繁殖方式:二分裂为主,也可

4、出芽独立营养。要求高独立营养。要求高生长缓慢(生长缓慢(3 310d10d)液体培养不易见混浊液体培养不易见混浊 典型的菌落呈典型的菌落呈油煎蛋样油煎蛋样 (直径(直径0.10.10.15mm0.15mm)CD4T 细胞损伤细胞损伤(获取脂质、固醇获取脂质、固醇;有毒代谢物有毒代谢物;免疫损伤免疫损伤)致病机制致病机制黏附黏附(顶端结构、顶端结构、P1P1蛋白等蛋白等)如神经毒素、核酸如神经毒素、核酸酶、蛋白酶、磷脂酶、蛋白酶、磷脂酶、酶、O2-,氨氨 粘膜上皮损害粘膜上皮损害(粘膜肿胀、坏死、脱落,微纤毛运动减弱粘膜肿胀、坏死、脱落,微纤毛运动减弱)慢性呼吸道病慢性呼吸道病 (CRD)鸡毒支

5、原体没有细胞壁,有复杂的营养需求可在鸡胚中繁殖(7日龄鸡胚卵黄囊接种)MG抵抗力不强。对热敏感能凝集鸡、火鸡的红细胞 鸡毒支原体感染引起呼吸道症状为主的慢性呼吸道病(Chronic respiratory disease)。疾病发展缓慢,病程长,成年鸡多为隐性感染,可在鸡群长期存在和蔓延。一般发病不高,如有不利因素会使本病更加严重。病原:病原:败血支原体(败血支原体(Mycoplasma Gallisepticum)滑液囊支原体(滑液囊支原体(Mycopasma Synoviae)气气囊囊炎炎病病理理变变化化鸡支原体感染鸡支原体感染传播方式传播方式鸡支原体感染 支原体的控制感染鸡感染鸡种蛋种蛋

6、感染雏鸡感染雏鸡感染鸡感染鸡呼吸道呼吸道排泄物排泄物与易感鸡与易感鸡直接接触直接接触通过飞沫媒介通过飞沫媒介(野鸟、人及(野鸟、人及器具等与易器具等与易感鸡间接接触感鸡间接接触感染鸡感染鸡发病发病带菌者带菌者鸡慢性呼吸道病的发生与危害鸡慢性呼吸道病的发生与危害 1.1.可使产蛋率下降可使产蛋率下降10-40%10-40%2.2.每只种鸡在产蛋周期内少产每只种鸡在产蛋周期内少产1818枚蛋枚蛋 3.3.种蛋孵化率下降种蛋孵化率下降10-20%10-20%4.4.弱雏增加弱雏增加10%10%5.5.经蛋传给下一代、病原代代相传、连经蛋传给下一代、病原代代相传、连 绵不断绵不断 6.6.易诱发大肠杆

7、菌、新城疫、支气管炎、喉易诱发大肠杆菌、新城疫、支气管炎、喉炎、禽流感等炎、禽流感等 7.7.与大肠杆菌并发可造成鸡群大量死亡与大肠杆菌并发可造成鸡群大量死亡 肉鸡生长发育明显受阻,体重减少肉鸡生长发育明显受阻,体重减少38%38%,饲养期延长,饲料转化率降低,饲养期延长,饲料转化率降低21%21%,存活率降低,存活率降低10%10%支原体在鸡舍不同媒介上的存活时间支原体在鸡舍不同媒介上的存活时间012345羽毛饲料木材木屑稻草靴子棉花MgTSMgFSMgUS1MgUS2流行病学流行病学 饲养密度大、鸡舍污浊、粪便集饲养密度大、鸡舍污浊、粪便集 蓄、氨气过高(氨气从蓄、氨气过高(氨气从20PP

8、M20PPM增加到增加到50PPM50PPM时,时,CRDCRD的发病率增加的发病率增加10001000倍)、倍)、气候突变、温差过大,气候突变、温差过大,维生素维生素A A缺乏等应激可促使本病暴发缺乏等应激可促使本病暴发 (三好三坏三好三坏)传播传播 1.直接传播直接传播 感染鸡呼出的带有病原的小滴经感染鸡呼出的带有病原的小滴经呼吸道传染同舍同笼的鸡呼吸道传染同舍同笼的鸡 2.经卵传播经卵传播 经卵传播病原给下一代经卵传播病原给下一代 3.疫苗传播疫苗传播 用非用非SPFSPF蛋蛋(胚胚)制做的疫苗免疫制做的疫苗免疫(NDND苗苗MGMG阳性率高)阳性率高)流 行 特 点易感动物 鸡和火鸡,

9、4-8周龄鸡和火鸡最敏感。传播方式 传播慢,垂直和水平传播。发病季节 寒冷季节多发。环境因素 对疾病的发展影响很大。影响鸡支原体感染流行的因素有:年龄:鸡对支原体的抵抗力随年龄增长而加强,因此,鸡支原体感染在雏鸡阶段尤为明显。接种疫苗;在饲养管理过程中,常常会因接种ND、IB、IBD等疫苗时易暴发支原体病,因此在接种疫苗时,最好在饮水中加入不影响免疫的硫氰酸红霉素,能有很好的预防效果。症 状 呈慢性经过。表现为浆液或粘液性鼻液,使鼻孔堵塞妨碍呼吸,频频摇头、喷嚏、咳嗽、眼睑肿胀。当炎症蔓延下部呼吸道时,则喘气和咳嗽更为显著,并有呼吸道罗音。病 理 变 化鼻道、气管、支气管和气囊内含有混浊的粘稠

10、渗出物,气管粘膜出血。气囊炎、气囊壁变厚和混浊,严重者有干酪样渗出物。蛋鸡感染后出现输卵管炎。患病早期气囊有黄白色气泡腹腔有大量泡沫气囊炎气囊浑浊、干酪物严重感染会出现干酪物三炎现象三炎现象气囊壁轻度浑浊肝周炎、心包炎病鸡一侧肺肉样变肺脏充血、出血、肉样变滑液囊炎诊 断初步诊断 流行特点、症状、病理变化病原分离 血清学方法 SPA、HI、ELISA临床症状单纯性感染本病死亡率低,并发感染的死亡率达30。产蛋鸡感染多呈隐性经过,仅表现产蛋下降,孵化率下降。新孵出的雏鸡增重受阻。此病常与大肠杆菌合并感染,出现发热、下痢等症状。支原体也能在7日龄鸡胚的卵黄囊内生长繁殖,通常在57天内死亡。经多次传代

11、后,病变出现更为典型和规律,表现胚体萎缩,全身水肿,皮肤、尿囊膜及卵黄膜出血,肝肿大。在鸡胚死后不久的卵黄囊和绒毛尿囊膜上的病原浓度最高。防 制建立无支原体病的种鸡群免疫预防加强对环境因素的控制、避免应激抗生素有一定的疗效 防制措施防制措施饲养管理饲养管理 1.1.加强饲养管理,提供平衡饲料加强饲养管理,提供平衡饲料 2.2.注意清洁卫生,舍内不准积粪尿注意清洁卫生,舍内不准积粪尿 3.3.笼内不拥挤避免各种应激因素笼内不拥挤避免各种应激因素 4.4.注意饲料中的霉菌毒素含量注意饲料中的霉菌毒素含量(主(主要是黄曲霉毒素)要是黄曲霉毒素)5.5.使用使用 SPF SPF 疫苗疫苗(无污染、滴度

12、高,无污染、滴度高,特别是新城疫)特别是新城疫)防制措施防制措施免疫预防免疫预防 1.使用活苗或灭活苗使用活苗或灭活苗-支原体支原体 2.预防免疫抑制性疾病预防免疫抑制性疾病(IBD、MD、呼肠孤病毒感染、鸡贫血因子等)呼肠孤病毒感染、鸡贫血因子等)3.注意免疫程序,防止疫苗反应的注意免疫程序,防止疫苗反应的发生发生免疫免疫灭活苗灭活苗 可控制疾病的发生,需免疫至少可控制疾病的发生,需免疫至少2次次 优点:安全、保存方便优点:安全、保存方便 缺点:局部免疫力不够缺点:局部免疫力不够 使用:皮下,肌肉注射使用:皮下,肌肉注射活苗活苗 可控制感染可控制感染 优点:局部免疫力好优点:局部免疫力好 缺

13、点:保存?缺点:保存?使用:滴鼻点眼使用:滴鼻点眼投药预防与治疗投药预防与治疗 1.1.使用对支原体敏感的药物使用对支原体敏感的药物 2.2.合理用药才能取得最佳效果合理用药才能取得最佳效果 3.3.控制继发感染控制继发感染,降低损失降低损失 4.4.免疫呼吸道活疫苗前使用药免疫呼吸道活疫苗前使用药 物可预防疫苗反应的发生物可预防疫苗反应的发生支原体治疗支原体治疗红霉素类泰乐菌素替米考星恩诺沙星太妙菌素等猪气喘病猪气喘病猪气喘病(Mycoplasmal pneumonia of swine)猪气喘病又名猪霉形体肺炎,国外称为猪地方流行猪气喘病又名猪霉形体肺炎,国外称为猪地方流行性肺炎,是由猪肺

14、炎霉形体引起猪性肺炎,是由猪肺炎霉形体引起猪 的一种慢性接触性的一种慢性接触性传染病。其主要症状是咳嗽和气喘。病理变化以形成肺传染病。其主要症状是咳嗽和气喘。病理变化以形成肺和支气管周围炎症为特征。和支气管周围炎症为特征。病原病原猪肺炎霉形体,是多形态微生物,常见的为球猪肺炎霉形体,是多形态微生物,常见的为球状、杆状、丝状状、杆状、丝状、环状和两极状,大小在、环状和两极状,大小在110-225nm之间,革兰氏阴性。之间,革兰氏阴性。本菌对本菌对 培养基的营养要求高,且要在培养基的营养要求高,且要在5%-10%CO2的条件下培养的条件下培养5-7天可见小菌落。天可见小菌落。它主要存在于病它主要存

15、在于病 猪的肺猪的肺、肺门淋巴结内。、肺门淋巴结内。本菌对外界抵抗力不强,排出体本菌对外界抵抗力不强,排出体 外后,生存外后,生存不超过不超过36小时,小时,30%草木灰及草木灰及20%石灰乳都石灰乳都能很快将其杀死。能很快将其杀死。流行特点流行特点在自然情况下,本病仅猪易感,不同品种、年在自然情况下,本病仅猪易感,不同品种、年龄、性别的猪龄、性别的猪 都能感染。流行都能感染。流行 初期,母猪的初期,母猪的发病率和死亡率较高。发病率和死亡率较高。主要传染源是病猪和隐性感染猪,通过呼吸道主要传染源是病猪和隐性感染猪,通过呼吸道 使易感猪感染。猪舍潮湿,通风不良,猪群拥使易感猪感染。猪舍潮湿,通风

16、不良,猪群拥挤等不良因素易造成本病的发生。挤等不良因素易造成本病的发生。本病的发本病的发 生无明显季节性,但以寒冷的冬春生无明显季节性,但以寒冷的冬春季节易发生。新疫区呈暴发性,病势剧烈季节易发生。新疫区呈暴发性,病势剧烈,传播迅速,发病率和死亡率比较高。老疫区多传播迅速,发病率和死亡率比较高。老疫区多为慢性经过。为慢性经过。症状症状 潜伏期潜伏期3-15天。本病以咳嗽、气喘为主要症天。本病以咳嗽、气喘为主要症状。特别在早状。特别在早 晚或运动、吃食时,常发生短晚或运动、吃食时,常发生短咳。而后呼吸次数达咳。而后呼吸次数达40-50次次/分,呼吸快而分,呼吸快而浅,有明显的腹式浅,有明显的腹式

17、 呼吸。后期呼吸变为慢而呼吸。后期呼吸变为慢而深,张口喘气。深,张口喘气。体温和食欲一般变化不大,当继发感染时,体体温和食欲一般变化不大,当继发感染时,体 温升高,食欲减少,仔猪常窒息死亡。隐性感温升高,食欲减少,仔猪常窒息死亡。隐性感染猪没有明显症状,有时发生轻咳,全身情况染猪没有明显症状,有时发生轻咳,全身情况 良好,生长发育几乎正常。良好,生长发育几乎正常。病变病变以肺及支气管周围炎症为特征,肺脏病变组织肿大,呈灰红色,硬度增加外观似肌肉样,胰肉样变,淋巴结出现弥漫性增 生 pdx:两侧肺之尖叶,心叶和主叶前下缘呈对称性胰变pdx:肺副叶胰样变pdx:支气管和纵隔淋巴结肿大pdx:胰变肺

18、切片,细支气管周围淋巴组织增生,肺泡中炎性渗出液猪气喘病张口呼吸,呈犬坐姿势肺炎、肺间质性炎症,呈胰样外观-尖叶、心叶、膈叶前下脚肺胰样变,分布于心叶、尖叶和副叶 肺副叶胰样变 肺中后期病变,肺的尖叶、心叶、中间叶呈深紫红色实变 大面积肺炎及气肿羊胸膜肺炎诊断诊断根据流行特点,本病仅发生于猪,其它畜禽不根据流行特点,本病仅发生于猪,其它畜禽不发病;临床上以咳发病;临床上以咳 嗽、气喘为主,嗽、气喘为主,病理变化病理变化见到肺脏有见到肺脏有“肉变肉变”或或“胰变胰变”,肺门淋巴结,肺门淋巴结水肿,即可作出初步诊断,确诊时需水肿,即可作出初步诊断,确诊时需 进行肺进行肺 部部X线透视或做血清学试验

19、。本病应与猪流行线透视或做血清学试验。本病应与猪流行性感冒,猪肺疫、猪肺丝虫、猪蛔虫及病甘薯性感冒,猪肺疫、猪肺丝虫、猪蛔虫及病甘薯 中毒病区别开。患肺丝虫的病猪用左旋咪唑治中毒病区别开。患肺丝虫的病猪用左旋咪唑治疗后,能出现痉挛性咳嗽,疗后,能出现痉挛性咳嗽,咳嗽后吐出的粘咳嗽后吐出的粘液中有肺丝虫,剖检在支气管内有肺丝虫。猪液中有肺丝虫,剖检在支气管内有肺丝虫。猪蛔虫,虽有咳嗽,但几天内自蛔虫,虽有咳嗽,但几天内自 行消失。病甘行消失。病甘薯中毒病,有喂病甘薯的历史,吃甘薯多的猪薯中毒病,有喂病甘薯的历史,吃甘薯多的猪症状严重,用土霉素与卡那霉素症状严重,用土霉素与卡那霉素 治疗无效。治疗

20、无效。剖检见肺高度水肿,切开肺流出大量血水与泡剖检见肺高度水肿,切开肺流出大量血水与泡沫,肺无沫,肺无“肌变肌变”或或“胰变胰变”。防制防制治疗:治疗的方法很多,多数只有临床治愈治疗:治疗的方法很多,多数只有临床治愈疗效,不易根除病原。而且疗效,不易根除病原。而且 疗效与病疗效与病 情轻重、情轻重、猪的抵抗力、饲养管理条件、气候等因素有猪的抵抗力、饲养管理条件、气候等因素有关。治疗时可选用下列药物:关。治疗时可选用下列药物:n土霉素碱粉:每千克体重土霉素碱粉:每千克体重40-50毫克,加毫克,加10%磺胺嘧啶钠注射液磺胺嘧啶钠注射液5-20毫升毫升,混溶后,混溶后1次肌肉注次肌肉注射,每天射,

21、每天1次,连用次,连用3-5天,疗效显著。天,疗效显著。n盐酸土霉素,每千克体重盐酸土霉素,每千克体重40毫克,加毫克,加5%葡萄葡萄糖氯化钠糖氯化钠5-20毫升,溶解后毫升,溶解后1 次肌肉注射次肌肉注射,每天,每天1次,连用次,连用5-7天。天。n卡那霉素,每千克体重卡那霉素,每千克体重5-6万单位,肌肉注射,万单位,肌肉注射,每天每天2次,连用次,连用3-5天。天。预防:应采取综合性防疫措施,控制本病的发生和流预防:应采取综合性防疫措施,控制本病的发生和流行。要尽量做到行。要尽量做到 自繁自养,新引入的猪应隔离自繁自养,新引入的猪应隔离1个月,个月,确认健康方可混群。平时应注意观察猪的咳

22、嗽和呼吸确认健康方可混群。平时应注意观察猪的咳嗽和呼吸 情况,经仔细检查确认是病猪的应予以隔离治疗。情况,经仔细检查确认是病猪的应予以隔离治疗。治愈的病猪,不能再返回健康群。患病母治愈的病猪,不能再返回健康群。患病母 猪所生的乳猪所生的乳猪,在断乳后经检查,认为正常的,也应隔离饲养。猪,在断乳后经检查,认为正常的,也应隔离饲养。注意饲料调配注意饲料调配,猪圈要干燥,避免拥挤。,猪圈要干燥,避免拥挤。进行免疫接种。目前,猪气喘病弱毒菌苗有两种,一进行免疫接种。目前,猪气喘病弱毒菌苗有两种,一种是猪气喘病冻干兔化弱毒菌苗,适用种是猪气喘病冻干兔化弱毒菌苗,适用 于疫场于疫场(区区),疫苗对猪安全,

23、攻毒保护率疫苗对猪安全,攻毒保护率70-80%,免疫期,免疫期8个月,个月,使用方法见说明书。另一使用方法见说明书。另一 种是猪气喘病种是猪气喘病168株弱毒菌株弱毒菌苗,适于疫场、区使用,疫苗对杂交猪较安全,对纯苗,适于疫场、区使用,疫苗对杂交猪较安全,对纯繁二花脸等繁二花脸等 仍不够安全,攻毒保护率为仍不够安全,攻毒保护率为80.8-96.0%,使用方法见说明书。使用方法见说明书。沈阳地区鸡霉形体的分离鉴定沈阳地区鸡霉形体的分离鉴定 表 6 药敏纸片对 MG 菌落生长抑制试验结果 药敏纸片 抑菌圈 直径(mm)菌株 青霉素 庆大霉素 土霉素 红霉素 四环素 新霉素 链霉素 氯林可霉素 卡那

24、霉素 氯霉素 先锋霉素 SY1 9.5 25 8.5 26 10 28 25 12 30 SY2 9.0 21.5 10.5 28 8.5 23 24 9 31 SY4 8.5 28 13 19 7.5 18 26.5 13 29.5 SY5 11.0 18 8.0 25 11.5 24.5 25 15 28 鸡败血霉形体(MG)可引起家禽慢性呼吸道病(CRD),是当前影响禽类生产的常见疾病之一。其特征性的症状是呼吸啰音、咳嗽、气管炎、气囊炎、流眼泪等。鸡败血霉形体发病率高,虽然引起的死亡率较低,但由于引起胴体的降级、饲料利用率降低以及造成幼雏的淘汰率上升、成年母鸡的产蛋率下降和医疗费用的额外

25、增加等,往往给养禽业带来巨大的经济损失。霉形体是一类缺乏细胞壁的原核微生物,在分类上属于软皮纲,在具有自体繁殖能力和合成自身大分子的微生物中,体积最小,构造也最简单。禽霉形体感染(Avian Mycoplasmosis)是由霉形体引起禽类感染发病的一类疾病的总称,主要指鸡败血霉形 体(M.g a l l i s e p t i c u m,M G)、火 鸡 霉 形 体(M.meleagridis,MM)、滑液霉形体(M.synoviae,MS)和依阿华霉形体(M.iowae,MI)等引起的一类疾病,这类疾病中,尤其是鸡败血霉形体感染常引起较严重的呼吸道疾病,对家禽生产有较大的危害,因而受到世界

26、养禽业的普遍重视。鸡败血霉形体(又称为鸡毒支原体)可引起家禽慢性呼吸道病(Chronic respiratory disease of poultry,CRD),是当前影响禽类生产的常见疾病之一。本病流行于世界各国,给养禽业带来的损失,往往是无法估量的。发病鸡表现为呼吸道症状,临床症状通常慢性病程长。人工感染的潜伏期421天,自然感染可能更长。其特征性的症状是呼吸啰音、咳嗽、气管炎、气囊炎、流眼泪等。病初先流浆性或黏性鼻液,打喷嚏,鼻孔周围和颈部羽毛常被玷污。炎症蔓延到下呼吸道,发生咳嗽,呼吸困难,气管啰音,食欲不振,生长停顿,逐渐消瘦。后期,如果鼻腔和眶下窦蓄积渗出物,则引起眼睑肿胀,眼部突

27、出如肿瘤状,内有干酪样物,使一侧或两侧眼睛受压而发生萎缩,严重时可造成失明。病鸡和隐性感染鸡是本病的传染源,经蛋传染常是此病代代相传的主要原因,在感染公鸡的精液中,也发现病原体的存在,因此配种也可能发生感染。本病在鸡群内传播速度慢,受感染的鸡可终生带菌,并可经带菌飞沫,尘埃和人员及设备传播。各种日龄的禽类均可感染,但以雏禽发病最严重。全年各季均可发生,但以寒冬及早春最为严重。本病在老疫区和老病场(舍)常呈隐性经过。病愈康复鸡虽然具有一定的免疫力,但体内仍带菌,在鸡群中继续散播病原。如与大肠杆菌混合感染时,可见纤维素性心包炎和肝周炎。有的关节发生炎症变化,触之有波动感,腿无力,行走困难。在火鸡除

28、气囊炎外,主要造成传染性窦炎(Infectious Sinusistis)。鸡败血霉形体发病率高,虽然引起的死亡率较低,但由于引起胴体的降级、饲料利用率降低以及造成幼雏的淘汰率上升、成年母鸡的产蛋率下降和医疗费用的额外增加等,往往给养禽业带来巨大的经济损失。影响鸡败血霉形体感染流行的因素,除鸡败血霉形体自身的致病性外,鸡的年龄也是重要因素,鸡对霉形体流行感染力随着年龄的增长而加强。混合感染对鸡败血霉形体感染也有相当大的影响,即使是致病力弱的鸡败血霉形体感染,也常会因为接种传染性支气管炎、新城疫等疫苗而爆发临诊的霉形体病。能促使鸡败血霉形体感染加剧的病毒除以上二者因素外,还有传染性喉气管炎病毒、

29、禽腺病毒、甲型流感病毒和呼肠孤病毒以及引起免疫抑制的病毒,如马立克病毒、传染性法氏囊病毒等。上述病原的合并感染,会使呼吸道病变明显加重,即所谓的协同作用。而且生产中也有感染鸡败血霉形体后激发热射病造成大批死亡和严重经济损失的报道。鸡败血霉形体的致病作用可能与其产生的神经氨酸苷酶、过氧化氢、溶血素、溶菌酶或外毒素有关,鸡败血霉形体以其小泡状体经过宿主细胞的叶酸受体吸附于上皮细胞上并侵入固有层,上述物质使上皮细胞纤毛停止活动、脱落,上皮细胞逐渐退化死亡,上皮细胞脱落,组织出现炎症反应,抗原性发生变化甚至出现自身免疫反应。不同的霉形体对细胞组织的趋向性也不尽相同。霉形体感染鸡的呼吸道后,主要破坏其气

30、管的纤毛,使之部分或全部脱落,导致排斥异物和自体气管黏膜分泌物的功能部分或全部丧失,使得进入呼吸道的异物及气管黏膜产生的分泌物无法向上排出而沉降到细支气管末端和肺泡中,逐渐使部分肺小叶发生病变,多数发病的肺小叶融合到一起,造成部分区域肺组织肉变、硬变、和坏死,使肺脏功能失调,出现呼吸困难。对于本病的治疗,曾有多种抗生素用来治疗鸡败血霉形体感染,其中最为有效的应为四环素类、泰妙灵和泰乐菌素。鸡败血霉形体对以下几种抗生素敏感:链霉素、土霉素、红霉素、炭霉素、螺旋霉素、泰乐菌素、林可霉素和壮观霉素。但据报道,鸡败血霉形体的某些菌株对链霉素、红霉素、螺旋霉素和泰乐菌素有很强的抵抗力。由于本病经常诱发或

31、继发多种细菌性疾病,造成混合感染,所以最好选用广谱抗菌的药物。抗生素治疗并不能阻止鸡败血霉形体感染的发生,使用抗生素仅能减缓该病的临床症状。一般来说,母鸡开产时或产蛋高峰时最易发生鸡败血霉形体感染,若在这段时间内给予预防性的抗生素可以非常有效地减少产蛋量的损失。此外,还可以通过接种鸡败血霉形体弱毒菌苗或灭活菌苗以及建立鸡败血霉形体阴性鸡群等方式达到本病的预防和净化,由于本病的发生有明显的诱因,因此预防工作显得更为重要。在预防工作中,首要的是对各种病毒疾病要做好预防接种工作。其次是加强饲养管理精心地管好鸡群,夏天做好防暑降温,冬天做好防寒保暖。一年四季都要做好鸡舍的通风,给鸡创造一个较好的生存条

32、件。该病一旦发生,重要的是去除发病诱因,改善环境。这样有利于减少疾病发生,有利于提高治疗效果。如果有其他的病毒性疾病发生,则以控制病毒性疾病为主。为了防止本病的继发感染可适当地投药加以控制。本病呈世界性分布,在我国也普遍发生。在20世纪50年代后期,美国、日本、前苏联、法国、英国等国家,先后成立了专门的机构开展本病的研究。我国对本病的研究始于20世纪60年代,随着养鸡业的发展,对其危害也日愈重视。冀锡霖等(1982),对我国20个省市进行血清学调查表明,阳性率达80%,可见其流行范围之广。据调查,我国鸡的鸡血霉形体的感染阳性率在50%80%.近几年来,MG感染在沈阳地区流行病中占有很高的比例,

33、经流行病学调查为平均33%,可见其危害日益严重。为此我们进行了鸡败血霉形体的分离鉴定,以便为沈阳及辽宁省地区的防治和净化提供科学的依据,使养禽业得到更好的发展。3 3 实验结果实验结果 3.1 霉形体分离培养结果霉形体分离培养结果n初次分离时直接接种于液体培养基中的病料培养1周未见生长,后盲传3代后见有生长(酚红变黄),生长者接种于固体培养基中,可见霉形体疑似菌落生长。在不加青霉素和醋酸铊的液体培养基中连传5代再接种于固体培养基中,仍可见霉形体典型菌落(油煎蛋菌落),经培养,排除了细菌的L型。选取来自5只鸡(分离率者)体内典型菌落各1个,作为菌株,命名为SY1、SY2、SY3、SY4、SY5.

34、3.2 形态观察形态观察n姬姆萨染色后光镜下可见菌体大多呈球点状,有的排列成链球状,菌体被染成紫色。3.3 分离物生化特性试验结果分离物生化特性试验结果n见表2.表 2 霉形体生化物性试验结果 糖发酵 精 氨 酸水解 四 唑 氮还原 固 醇 需要 NAD需要 菌株 Strain 葡萄糖 麦芽糖 甘露醇 乳糖 蔗糖 Glucose Maltose Mannose Lactose Sucrose SY1 SY2 SY3 SY4 W SY5 W 注:“”阳性反应 “”阴性反应 “W”弱阳性反应 从表2结果可以看出,SY1、SY2、SY4、SY5初步定为鸡败血霉形体。SY3初步定为鸡霉形体。3.4 霉

35、形体的血清学试验结果霉形体的血清学试验结果n本次实验共分离到5个霉形体菌株,经生化试验已经确定SY3不是鸡败血霉形体菌株,故只对SY1、SY2、SY4、SY5进行血清学平板凝集、经试管凝集、血凝抑制、生长抑制试验,结果表明SY1、SY2、SY4、SY5株进一步确认为鸡败血霉形体。3.4.1 霉形体的平板凝集试验结果霉形体的平板凝集试验结果n在血清凝集反应中,MG抗血清能使分离株SY1、SY2、SY4、SY5发生凝集,2分钟内形成明显的粗大颗粒,而SY3未见反应。3.4.2 霉形体的试管凝集试验结果霉形体的试管凝集试验结果n见表3.表3 试管凝集试验结果 MG抗血清稀释倍数 抗原 14 18 1

36、16 132 164 1128 1256 1512 11024 抗原对照 SY1+SY2+SY3 SY4+SY5+注:“+”、“+”、“+”、“+”分别表示100%、75%、50%、和25%菌体被凝集。3.4.3 霉形体的红细胞凝集抑制试验(霉形体的红细胞凝集抑制试验(HI)结果结果n见表4.表4 MGHI试验结果 MG阳性血清稀释倍数 抗原 14 18 116 132 164 1128 1256 1512 11024 抗原对照 红细胞对照 SY1 +SY2 +SY4 +SY5 +注:“+”、“+”、“+”、“+”分别表示100%、75%、50%、和25%红细胞被凝集。3.4.4 生长抑制试验

37、结果生长抑制试验结果n37C培养48h后,测定各分离株抑菌环直径大小如下,见表5.表5 抑菌环直径大小 SY1 SY2 SY3 SY4 SY5 4.7mm 5.6mm 0mm 6.1mm 5.2mm 抑菌环直径 菌株 传播方式传播方式鸡支原体感染 支原体的控制感染鸡感染鸡种蛋种蛋感染雏鸡感染雏鸡感染鸡感染鸡呼吸道呼吸道排泄物排泄物与易感鸡与易感鸡直接接触直接接触通过飞沫媒介通过飞沫媒介(野鸟、人及(野鸟、人及器具等与易器具等与易感鸡间接接触感鸡间接接触感染鸡感染鸡发病发病带菌者带菌者支原体支原体(Mycoplasmataceae)(Mycoplasmataceae)支原体为无细胞壁的支原体为无

38、细胞壁的原核生物原核生物,是是能独立营养的能独立营养的最小的细胞最小的细胞型微型微生物。与人类致病相关的有支原体生物。与人类致病相关的有支原体属和脲原体属两个属属和脲原体属两个属四、鸡毒支原体 Mycoplasma gallisepticum(MG)鸡毒支原体感染引起呼吸道症状为主的慢性呼吸道病(Chronic respiratory disease)。疾病发展缓慢,病程长,成年鸡多为隐性感染,可在鸡群长期存在和蔓延。一般发病不高,如有不利因素会使本病更加严重。病 原 鸡毒支原体没有细胞壁,有复杂的营养需求可在鸡胚中繁殖(7日龄鸡胚卵黄囊接种)MG抵抗力不强。对热敏感能凝集鸡、火鸡的红细胞支

39、原 体(霉形体)2、生理特性兼性厌氧菌,对营养要求较高,在培养基中需加入酵母浸汁或马血清、牛心浸液,有的菌株初代分离需5%的CO2,95%N2才能生长。菌落呈煎荷包蛋样或乳头突起状。3、致病性大多数是致病菌,少数为腐生菌,引起呼吸系统的疾病流 行 特 点易感动物 鸡和火鸡,4-8周龄鸡和火鸡最敏感。传播方式 传播慢,垂直和水平传播。发病季节 寒冷季节多发。环境因素 对疾病的发展影响很大。症 状 呈慢性经过。表现为浆液或粘液性鼻液,使鼻孔堵塞妨碍呼吸,频频摇头、喷嚏、咳嗽、眼睑肿胀。当炎症蔓延下部呼吸道时,则喘气和咳嗽更为显著,并有呼吸道罗音。病 理 变 化鼻道、气管、支气管和气囊内含有混浊的粘

40、稠渗出物,气管粘膜出血。气囊炎、气囊壁变厚和混浊,严重者有干酪样渗出物。蛋鸡感染后出现输卵管炎。患病早期气囊有黄白色气泡腹腔有大量泡沫支原体病的危害支原体病的危害支原体病的危害支原体病的危害气囊炎诊 断初步诊断 流行特点、症状、病理变化病原分离 血清学方法 SPA、HI、ELISA临床症状单纯性感染本病死亡率低,并发感染的死亡率达30。产蛋鸡感染多呈隐性经过,仅表现产蛋下降,孵化率下降。新孵出的雏鸡增重受阻。此病常与大肠杆菌合并感染,出现发热、下痢等症状。支原体也能在7日龄鸡胚的卵黄囊内生长繁殖,通常在57天内死亡。经多次传代后,病变出现更为典型和规律,表现胚体萎缩,全身水肿,皮肤、尿囊膜及卵

41、黄膜出血,肝肿大。在鸡胚死后不久的卵黄囊和绒毛尿囊膜上的病原浓度最高。防 制建立无支原体病的种鸡群免疫预防加强对环境因素的控制、避免应激抗生素有一定的疗效影响鸡支原体感染流行的因素有:年龄:鸡对支原体的抵抗力随年龄增长而加强,因此,鸡支原体感染在雏鸡阶段尤为明显。接种疫苗;在饲养管理过程中,常常会因接种ND、IB、IBD等疫苗时易暴发支原体病,因此在接种疫苗时,最好在饮水中加入不影响免疫的硫氰酸红霉素,能有很好的预防效果。形形态态结结构构多形态,能通过滤器多形态,能通过滤器无细胞壁无细胞壁染色:染色:GiemsaGiemsa呈紫(呈紫(Gram-Gram-)荚膜(肽聚糖)荚膜(肽聚糖)细胞膜(

42、胆固醇、长链脂肪酸)细胞膜(胆固醇、长链脂肪酸)型特异性抗原:外层蛋白型特异性抗原:外层蛋白顶端结构顶端结构参与吸附参与吸附抵抗力抵抗力无细胞壁,因而无细胞壁,因而比细菌敏感比细菌敏感 如干、热、酸如干、热、酸,有机溶剂有机溶剂,表面活性剂等表面活性剂等耐耐内酰胺等胞壁合成干扰抗生素内酰胺等胞壁合成干扰抗生素对对其它抗生素敏感其它抗生素敏感(干扰蛋白质合成或作(干扰蛋白质合成或作用于固醇等等),可用于用于固醇等等),可用于治疗治疗培养特性培养特性繁殖方式:二分裂为主,也可出芽繁殖方式:二分裂为主,也可出芽独立营养。要求高独立营养。要求高生长缓慢(生长缓慢(3 310d10d)液体培养不易见混浊液体培养不易见混浊 典型的菌落呈典型的菌落呈油煎蛋样油煎蛋样 (直径(直径0.10.10.15mm0.15mm)油煎蛋状菌落油煎蛋状菌落0.10.15mm气气囊囊炎炎病病理理变变化化鸡支原体感染鸡支原体感染支原体治疗支原体治疗红霉素类、泰乐菌素、替米考星;恩诺沙星等喹诺酮类;泰妙菌素;四环素类等

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