医学课件病毒学全篇

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1、禽流感病毒禽流感病毒人流感病毒人流感病毒猪流感病毒猪流感病毒禽流感、人流感禽流感、人流感重组病毒重组病毒国家和国家和地区地区疑似病疑似病例例确认确认死亡人数死亡人数详情详情美洲墨西哥5580例1626例48人墨西哥9日宣布，墨全国甲型H1N1流感死亡人数升至48人，确诊病例增至1626例，较前一天增约300例。美国2532人3人美国疾病控制和预防中心发布，截至10日，美国甲型H1N1流感的确诊患者数量已上升至2532人，其中包括3名死亡病例。加拿大284例1人10日加拿大新增甲型H1N1流感病例4例，累计确诊患者总人数升至284人，其中包括1例死亡病例。萨尔瓦多4例尚无截至北京时间5月11日1

2、8时，萨尔瓦多共确诊4例。哥斯达黎加103例8例1例截至11日，哥斯达黎加报告8例确认人患病例，包括一例死亡。哥伦比亚131例3例尚无截至北京时间5月11日18时，哥伦比亚共确诊3例。危地马拉1例尚无截至北京时间5月7日4时，危地马拉确认1例巴拿马15人尚无截至北京时间5月11日18时，巴拿马共确诊15例。古巴1人尚无古巴11日确诊首例甲型H1N1流感病例，患者为来自墨西哥的一名学生。巴西8人尚无截至北京时间5月11日18时，巴西共确诊8例。阿根廷1人尚无截至北京时间5月11日18时，阿根廷共确诊1例。欧 洲西班牙95例尚截至北京时间5月11日18时，西班牙甲型H1N1流感确诊病例为95例。英

3、国1例47例尚无 截至北京时间5月11日18时，英国甲型H1N1流感确诊病例为47例。法国7例13例尚无截至北京时间5月11日18时，法国共确诊13例。德国11例尚无截至北京时间5月11日18时，德国共确诊11例。意大利9例尚无截至北京时间5月11日18时，意大利确认9例荷兰3例尚无截至北京时间5月11日18时，荷兰共确诊3例。瑞士1例尚无截至北京时间5月8日4时，瑞士确认1例。丹麦1例尚无截至北京时间5月8日4时，丹麦确认1例瑞典2例尚无截至北京时间5月11日18时，瑞典确认2例葡萄牙1例尚无截至北京时间5月8日4时，葡萄牙确诊1例。爱尔兰1例尚无截至北京时间5月8日4时，爱尔兰确诊1例。波

4、兰1例尚无波兰卫生部长6日证实，波兰确诊首例甲型H1N1流感病例，患者是一名58岁的女性。奥地利1例尚无确诊首例A型流感病例，目前病人情况稳定。芬兰2例尚无据芬兰通讯社12日报道，芬兰首次确认两例甲型H1N1流感病例。挪威2例尚无截至北京时间5月11日18时，挪威共确诊2例。亚亚 洲洲中国内地1例 香港1例尚无卫生部11日通报，此前四川一例甲型H1N1流感疑似病例已被确诊；香港5月1日宣布确诊首宗甲型H1N1流感个案。以色列4例7例尚无截至北京时间5月11日18时，以色列共确诊7例。韩国30例3例尚无截至北京时间5月8日4时，韩国共确诊3例，30例疑似病例待排查。日本4例尚无截至北京时间5月9

5、日7时，日本共确诊3例。泰国2例尚无泰国政府12日称，泰国确诊了该国2例甲型H1N1流感病例。大洋洲大洋洲澳大利亚1例尚无据澳大利亚联合新闻社9日报道，一名澳大利亚妇女已被确诊为该国首例甲型H1N1流感病例。新西兰90例7例尚无截至北京时间5月11日18时，新西兰共确诊7例。病毒病毒Virus：是一类体积微小，电子显微镜放：是一类体积微小，电子显微镜放大几万甚至几十万倍后观察到，结构简单，只含大几万甚至几十万倍后观察到，结构简单，只含有一种类型的核酸，严格细胞内寄生，对抗生素有一种类型的核酸，严格细胞内寄生，对抗生素不敏感，以复制方式进行增殖的非细胞型微生物。不敏感，以复制方式进行增殖的非细胞

6、型微生物。第十五章第十五章 病病 毒毒 学学 病毒的重要性病毒的重要性 1 多多 75%急性传染急性传染 2 高高 发病率高发病率高 死亡率高死亡率高 一生一生200次次 3 新新 不断出现新的疾病不断出现新的疾病 4 致畸致畸 5 转化转化 肿瘤肿瘤 HPV HSV子宫颈癌子宫颈癌 HBV肝肝 EBV鼻咽癌鼻咽癌 6 无药无药 无特效治疗药物无特效治疗药物一、病毒的大小与形态一、病毒的大小与形态n病毒体病毒体virion完整的成熟病毒颗粒，是细胞外完整的成熟病毒颗粒，是细胞外的结构形式，具有典型的形态结构，并有感染性。的结构形式，具有典型的形态结构，并有感染性。n测量单位为纳米测量单位为纳米

7、n 150nm 大型病毒最大大型病毒最大300 nmn多数病毒呈球形或近似球形，杆状，丝状，少数可多数病毒呈球形或近似球形，杆状，丝状，少数可为子弹状、砖块状，噬菌体可呈蝌蚪状。为子弹状、砖块状，噬菌体可呈蝌蚪状。微生物的大小比较微生物的大小比较葡萄球菌葡萄球菌(1000nm 牛痘病毒牛痘病毒300250nmABCDEFG立克次体立克次体450nm衣原体衣原体390nmA、大肠杆菌噬菌体大肠杆菌噬菌体 (65 95nm)B、腺病毒腺病毒 (70nm)C、脊髓灰质炎病毒脊髓灰质炎病毒 (30nm)D、乙脑病毒乙脑病毒 (40nm)E、蛋白分子蛋白分子 (10nm)F、流感病毒流感病毒 (100n

8、m)G、烟草花叶病毒烟草花叶病毒二、病毒的结构二、病毒的结构 化学组成化学组成n根本结构根本结构n 核衣壳核衣壳 Nucleocapsidn核心核心 Core n衣壳衣壳 Capsid n其它结构其它结构n包膜包膜 Envelopen刺突刺突 Spike病毒体结构模式图病毒体结构模式图壳粒壳粒衣壳衣壳 核心核心核衣壳核衣壳包膜包膜包膜病毒包膜病毒包膜粒子包膜粒子 病毒核心即核酸病毒核心即核酸viral coren多样性多样性DNA dsDNA ssDNA dsRNARNA ssRNA 分节段分节段RNA 线状、环状线状、环状大小悬殊大小悬殊复制方式多样复制方式多样存在形式多样存在形式多样病毒核

9、酸的功能病毒核酸的功能n功能功能n病毒遗传变异的物质根底病毒遗传变异的物质根底 n决定病毒的种属特异性决定病毒的种属特异性n决定病毒的感染性决定病毒的感染性n编码病毒结构蛋白和功能蛋白编码病毒结构蛋白和功能蛋白n大型病毒的核酸分子量相对大，能编码病毒大型病毒的核酸分子量相对大，能编码病毒的全部结构蛋白和病毒复制所需的许多酶的全部结构蛋白和病毒复制所需的许多酶n小病毒的核酸分子小，可能不编码这些酶，小病毒的核酸分子小，可能不编码这些酶，因此复制时要宿主细胞提供因此复制时要宿主细胞提供病毒核酸的特性病毒核酸的特性n具有感染性具有感染性n将提纯的病毒核酸如肠道病毒将提纯的病毒核酸如肠道病毒RNA如转

10、至活细胞内，即可启动病毒复制而如转至活细胞内，即可启动病毒复制而感染细胞，并从可感染细胞中获得子代感染细胞，并从可感染细胞中获得子代完整病毒颗粒。完整病毒颗粒。n逆转录性逆转录性n一些病毒颗粒中含逆转录酶，可以将病一些病毒颗粒中含逆转录酶，可以将病毒毒RNA逆转成逆转成DNAnVery condensed genomesn有内含子，有内含子，ORF间有重叠间有重叠 Overlapping genesnUsing different reading frames reading both strands病毒蛋白质病毒蛋白质由病毒核酸编码由病毒核酸编码n结构蛋白结构蛋白 组成病毒体的成分组成病毒体

11、的成分n 衣壳蛋白衣壳蛋白n 包膜蛋白包膜蛋白n 基质蛋白基质蛋白连接衣壳蛋白与包膜蛋白连接衣壳蛋白与包膜蛋白的局部，的局部，n 有跨膜及锚定功能区有跨膜及锚定功能区n非结构蛋白非结构蛋白n 酶类酶类n 特殊功能的蛋白特殊功能的蛋白n n 病毒衣壳病毒衣壳viral capsidn核心外的蛋白质核心外的蛋白质n由壳粒由壳粒capsomere组成；它是衣壳的组成；它是衣壳的形态学亚单位，多肽分子是它的化学亚单形态学亚单位，多肽分子是它的化学亚单位。位。n功能功能n保护病毒核酸，免受核酸酶的破坏保护病毒核酸，免受核酸酶的破坏n参与病毒感染细胞的过程参与病毒感染细胞的过程n病毒外表蛋白病毒外表蛋白+

12、宿主细胞膜受体宿主细胞膜受体 n具有抗原性具有抗原性核壳粒的排列方式核壳粒的排列方式n螺旋对称型螺旋对称型helical symmetryn20面体对称型面体对称型icosahedral symmetryn复合对称型复合对称型complex symmetryRNA/DNA壳粒壳粒五邻体五邻体六邻体六邻体20面体对称型面体对称型病毒包膜病毒包膜viral envelopen是包绕在病毒核衣壳外面的脂质双层膜是包绕在病毒核衣壳外面的脂质双层膜n主要成分是蛋白质、多糖及脂类，常以糖蛋白或主要成分是蛋白质、多糖及脂类，常以糖蛋白或脂蛋白形式存在脂蛋白形式存在n蛋白质是由病毒基因编码，多糖、脂类来自宿主

13、蛋白质是由病毒基因编码，多糖、脂类来自宿主细胞膜、核膜细胞膜、核膜包膜特性与功能包膜特性与功能n有包膜的病毒以有包膜的病毒以“出芽出芽budding方式释放时方式释放时获得获得n包膜子粒包膜子粒peplomere或刺突或刺突spike赋予病赋予病毒特殊功能，如血凝素毒特殊功能，如血凝素HA和神经氨酸酶和神经氨酸酶NAn包膜病毒对脂溶剂如乙醚、氯仿敏感，能被消包膜病毒对脂溶剂如乙醚、氯仿敏感，能被消除包膜而失活除包膜而失活鉴定；它还与病毒的入侵途径相鉴定；它还与病毒的入侵途径相关有呼吸道；无肠道。关有呼吸道；无肠道。包包 膜膜 功功 能能n维护病毒体结构的完整性维护病毒体结构的完整性n具有介导与

14、宿主细胞膜亲和及融合的性能具有介导与宿主细胞膜亲和及融合的性能n具有病毒抗原的特异性刺突具有病毒抗原的特异性刺突n毒素样作用，包膜脂蛋白使机体发热、血压毒素样作用，包膜脂蛋白使机体发热、血压降低、全身中毒降低、全身中毒 三三、病毒的分类、病毒的分类 Classification of Virusesn20042004年国际病毒分类委员会将动植物年国际病毒分类委员会将动植物病毒病毒40004000余种分为余种分为7 73 3科、科、1111亚科、亚科、289289属属分类原那么分类原那么 Basis of Classificationn核酸类型和结构核酸类型和结构nRNA/DNA,ds/ss,l

15、inear/circular,n fragment/no-fragment)n病毒体形状和大小病毒体形状和大小n病毒体形态结构病毒体形态结构n对脂溶剂敏感性对脂溶剂敏感性DNA viruses1、dsDNA,Presence of an envelope Poxviridae 痘病毒科痘病毒科 Herpesviridae 疱疹病毒科疱疹病毒科2、dsDNA,absence of an envelope Adenoviridae 腺病毒科腺病毒科 Papovaviridae 乳多空病毒科乳多空病毒科3、ssDNA,absence of an envelope Parvoriridae 细小病毒科

16、细小病毒科 ndsRNA，fragments，absence envelope n Reoviridae呼肠病毒科呼肠病毒科 Birnaviridae双双RNA病毒科病毒科n-ssRNA,no fragment,Presence envelope n Paramyxoviridae 副粘病毒科副粘病毒科 Rhabdoviridae 弹状病毒科弹状病毒科n-ssRNA，fragments，Presence envelope n Orthomyxoviridae 正粘病毒科正粘病毒科 Bunyaviridae 布尼亚病毒布尼亚病毒科科n Arenaviridae 沙粒病毒科沙粒病毒科 n+ssRN

17、A,no fragments,absence envelope n Picornaviridae小小RNA病毒科病毒科 Caliciviridae 杯状病毒科杯状病毒科n Astroviridae 星状病毒科星状病毒科n+ssRNA,no fragments,Presence envelope n Coronaviridae冠状病毒科冠状病毒科 Flaviviridae 黄病毒科黄病毒科n Togaviridae 披膜病毒科披膜病毒科RNA Viruses 亚病毒亚病毒subvirus是近年来发现的比一般病毒更是近年来发现的比一般病毒更小的传染因子。小的传染因子。包括包括卫星病毒卫星病毒sat

18、ellites类病毒类病毒viroid拟病毒拟病毒virusoid朊病毒朊病毒virino卫星病毒卫星病毒satellites n多数多数与与植物病毒有关植物病毒有关n有有两类：两类：n一类可编码自身衣壳蛋白；一类可编码自身衣壳蛋白；n另一类为卫星病毒另一类为卫星病毒RNA分子分子n需辅助需辅助病毒才能复制病毒才能复制 类病毒类病毒 Viroids 1971年年,美国美国Diener等在研究马铃薯纺锤形块疾病时报等在研究马铃薯纺锤形块疾病时报道并命名。道并命名。类病毒的大小仅为最小病毒的类病毒的大小仅为最小病毒的120左右。由单股环状左右。由单股环状RNA组成，杆状结构，无蛋白衣壳。对核酸酶敏

19、感，对热、组成，杆状结构，无蛋白衣壳。对核酸酶敏感，对热、有机溶剂抵抗。有机溶剂抵抗。致病机制可能是由于致病机制可能是由于RNA分子直接干扰宿主细胞的核酸分子直接干扰宿主细胞的核酸代谢。代谢。类病毒主要使植物致病，尤其引起马铃薯、柑橘、椰子、类病毒主要使植物致病，尤其引起马铃薯、柑橘、椰子、啤酒花等多种重要经济植物的严重病害。啤酒花等多种重要经济植物的严重病害。类病毒的特征类病毒的特征n很很小小(200-400nt)，杆状，杆状 RNA 分分 子，子，有有二级结构二级结构n无无衣壳或包膜衣壳或包膜 n在核内增殖，严格在核内增殖，严格细胞内寄生细胞内寄生n 多多与植物疾病相关与植物疾病相关 拟病

20、毒拟病毒 是在研究类病毒过程中发现的一种是在研究类病毒过程中发现的一种引起苜宿等植物病毒的亚病毒。引起苜宿等植物病毒的亚病毒。拟病毒是拟病毒是300400个核苷酸，有个核苷酸，有高度二级结构的单股环状高度二级结构的单股环状RNA分子。分子。拟病毒在二级结构上与类病毒相似拟病毒在二级结构上与类病毒相似，且与许多类病毒有序列同源性。，且与许多类病毒有序列同源性。朊病毒朊病毒 1982年美国年美国Prusiner首先首先报道羊瘙痒病是由一种分子量报道羊瘙痒病是由一种分子量为为30104的蛋白质感染因的蛋白质感染因子引起的。子引起的。朊病毒也称蛋白侵染子朊病毒也称蛋白侵染子prion，对蛋白酶、氨基酸

21、，对蛋白酶、氨基酸化学修饰剂、蛋白质变性剂敏化学修饰剂、蛋白质变性剂敏感，而对核酸酶、核着酸修饰感，而对核酸酶、核着酸修饰剂和核酸变性剂等有抵抗，剂和核酸变性剂等有抵抗，这显示朊病毒是蛋白质成这显示朊病毒是蛋白质成分而不是核酸。分而不是核酸。朊病毒蛋白质朊病毒蛋白质PrP的的分子量为分子量为2700030000，是构，是构成阮病毒的根本单位。成阮病毒的根本单位。其本身无感染性，由其本身无感染性，由3个个PrP分子构成的朊病毒单体那分子构成的朊病毒单体那么有极强的感染性。么有极强的感染性。朊病毒朊病毒引起的疾病除引起的疾病除羊病痒病羊病痒病外，外，人的人的克雅病克雅病、库鲁病库鲁病和和格斯综合征

22、格斯综合征可能是可能是朊病毒引起的。另外，人类朊病毒引起的。另外，人类慢性退化性功慢性退化性功能紊乱疾病能紊乱疾病，如老年痴呆、多发性硬化症，如老年痴呆、多发性硬化症等也可能与朊病毒有关。等也可能与朊病毒有关。病毒的增殖病毒的增殖n活细胞活细胞n敏感细胞敏感细胞n复制复制(replication)：n以病毒基因为模板以病毒基因为模板,藉藉DNA多聚酶或多聚酶或RNA多聚酶多聚酶及其它因素的作用及其它因素的作用,指令细胞停止合成细胞的蛋指令细胞停止合成细胞的蛋白质与核酸，转为复制病毒的基因组，转录、转白质与核酸，转为复制病毒的基因组，转录、转译出相应的病毒蛋白，最终释放出子代病毒。译出相应的病毒

23、蛋白，最终释放出子代病毒。病毒复制周期病毒复制周期n复制周期复制周期replication cyclen吸附、穿入、脱壳、生物合成、装配与释放吸附、穿入、脱壳、生物合成、装配与释放n病毒本身没有独立的蛋白合成酶系统，必须借助宿病毒本身没有独立的蛋白合成酶系统，必须借助宿主细胞的蛋白合成体系合成病毒蛋白主细胞的蛋白合成体系合成病毒蛋白n病毒复制周期时间因病毒而异病毒复制周期时间因病毒而异n腺病毒腺病毒25hn小小RNA病毒病毒6-8hn流感病毒流感病毒15-30h吸附吸附:静电结合静电结合:非特异，可逆的；非特异，可逆的；，Na+、Mg+、Ca+等有关等有关;受体结合受体结合:病毒外表接触蛋白病

24、毒外表接触蛋白+易感细易感细胞受体特异胞受体特异,不可逆不可逆;,化学化学反响。反响。eg.犬类不感染麻疹犬类不感染麻疹,而人不感染犬而人不感染犬瘟病毒瘟病毒 *一种细胞上不可能具有全部病毒受一种细胞上不可能具有全部病毒受体，只有细胞外表存体，只有细胞外表存 在该病毒受体时，才能发生感染。在该病毒受体时，才能发生感染。*阻止吸附是目前预防病毒感染的重阻止吸附是目前预防病毒感染的重要研究课题之一。消要研究课题之一。消 除细胞外表受体阻止病毒与受体接除细胞外表受体阻止病毒与受体接触，或特异抗体触，或特异抗体 穿入穿入Penetrationn吞饮吞饮pinocytotic vacuolen无包膜病毒

25、被宿主细胞吞噬，进入胞无包膜病毒被宿主细胞吞噬，进入胞内内n融合融合fusion)n有包膜病毒的包膜与宿主细胞膜直接有包膜病毒的包膜与宿主细胞膜直接融合，病毒核衣壳进入细胞融合，病毒核衣壳进入细胞n直接进入直接进入脱壳脱壳:在在溶酶体酶溶酶体酶作用下脱壳作用下脱壳,释放基因组核酸。释放基因组核酸。HIV influenza virus 生物合成生物合成Biosynthesisn早期蛋白合成阶段早期蛋白合成阶段n转录、翻译而产生病毒生物合成中必需的酶类及某些抑转录、翻译而产生病毒生物合成中必需的酶类及某些抑制或阻断细胞核酸和蛋白质合成的非结构蛋白制或阻断细胞核酸和蛋白质合成的非结构蛋白n晚期蛋白

26、合成阶段晚期蛋白合成阶段n复制病毒核酸，转录、翻译而产生病毒的结构蛋白复制病毒核酸，转录、翻译而产生病毒的结构蛋白n隐蔽期隐蔽期n生物合成阶段细胞生物合成阶段细胞查不到查不到完整病毒，用血清学方法也测完整病毒，用血清学方法也测不到病毒抗原不到病毒抗原n各病毒隐蔽期长短不一，如各病毒隐蔽期长短不一，如Poliovirus为为34小时，而小时，而Adenovirus为为1618小时。小时。装配装配Assemblyn无包膜病毒无包膜病毒n先形成空心衣壳，核酸从衣壳裂隙进入形成核衣先形成空心衣壳，核酸从衣壳裂隙进入形成核衣壳壳n有包膜病毒有包膜病毒n核衣壳与细胞的膜系统胞膜或核膜结合形成核衣壳与细胞的

27、膜系统胞膜或核膜结合形成包膜包膜n包膜的蛋白质包括糖蛋白是由病毒基因组编包膜的蛋白质包括糖蛋白是由病毒基因组编码，故具有病毒的特异性和抗原性码，故具有病毒的特异性和抗原性n装配的部位装配的部位n除痘病毒外，除痘病毒外，DNA病毒均在细胞核内装配病毒均在细胞核内装配n除正粘病毒外，大多数除正粘病毒外，大多数RNA病毒那么在细胞质病毒那么在细胞质内装配内装配释放释放releasen无无包膜病毒包膜病毒n均以均以破胞方式破胞方式释放释放n有有包膜的病毒包膜的病毒n以以出芽方式出芽方式释放到细胞外释放到细胞外n通常细胞不死亡，仍能继通常细胞不死亡，仍能继续分裂增殖续分裂增殖dsDNAdsDNA病毒复制

28、示意图病毒复制示意图dsDNA virus ReplicationViral genomeTranscriptionEarly mRNATranslationEarly proteins(enzymes)Semi-conservativetranscriptionTranscriptionLate mRNATranslationLate proteins(structural proteins)AssemblyReleaseExamplesHSVAdenovirus+ssRNA病毒复制示意图病毒复制示意图+ssRNA逆转录病毒复制示意图逆转录病毒复制示意图HIV 复制过程复制过程疱疹病毒的复制

29、过程疱疹病毒的复制过程病毒异常增殖病毒异常增殖n缺陷病毒缺陷病毒Defective virusn顿挫感染顿挫感染Abortive infectionn缺陷病毒缺陷病毒 defective virus：病毒遗传变：病毒遗传变异的突变或基因工程操作，使病毒基因不完整异的突变或基因工程操作，使病毒基因不完整或基因位点改变，影响了病毒复制或成熟的一或基因位点改变，影响了病毒复制或成熟的一个或几个基因功能，不能复制出完整的具有感个或几个基因功能，不能复制出完整的具有感染性的病毒颗粒。染性的病毒颗粒。n天然缺陷病毒：天然缺陷病毒：n腺病毒相关病毒缺陷病毒与腺病毒辅助腺病毒相关病毒缺陷病毒与腺病毒辅助病毒病

30、毒n丁型肝炎病毒缺陷病毒与乙型肝炎病毒丁型肝炎病毒缺陷病毒与乙型肝炎病毒辅助病毒辅助病毒)n缺陷干扰颗粒缺陷干扰颗粒defective interfering particles,DIP)n 缺陷病毒不能复制，但却能干扰同种成熟病缺陷病毒不能复制，但却能干扰同种成熟病毒体进入细胞。毒体进入细胞。辅助病毒辅助病毒helper virus 能提供给缺陷病能提供给缺陷病毒所需要的因子主要是酶、蛋白质的毒所需要的因子主要是酶、蛋白质的病毒。病毒。缺陷病毒缺陷病毒+辅助病毒辅助病毒增殖增殖顿挫感染流产性感染：有些细胞不能为顿挫感染流产性感染：有些细胞不能为病毒复制提供必须物质，不能复制出具有病毒复制提供

31、必须物质，不能复制出具有传染性的病原体，这种感染过程为流产性传染性的病原体，这种感染过程为流产性感染；感染；这种细胞为非容许细胞这种细胞为非容许细胞 non-permissive cell。容许性细胞容许性细胞非容许性细胞非容许性细胞顿挫感染顿挫感染 Abortive infectionn原因原因n宿主细胞不能提供病毒复制所需宿主细胞不能提供病毒复制所需的酶、能量或成份的酶、能量或成份n病毒虽被复制，但不能装配释放病毒虽被复制，但不能装配释放n人腺病毒在人胚肾细胞可复制，人腺病毒在人胚肾细胞可复制，在猴肾细胞那么不能复制在猴肾细胞那么不能复制三、病毒的干扰现象 两种或两株病毒感染同一细胞或机体

32、时，发生一种病毒抑制另一种病毒增殖的现象。一类型 不同病毒间，同种、同型、同株病毒间，灭活活病毒间二干扰机制n干扰素的产生：广谱干扰素的产生：广谱 最主要原因最主要原因n 是由病毒作用于宿主细胞，由细胞分泌的是由病毒作用于宿主细胞，由细胞分泌的一类具有广谱抗病毒作用的糖蛋白，具有抗病毒一类具有广谱抗病毒作用的糖蛋白，具有抗病毒增殖活性，抑制细胞分裂，抗肿瘤，免疫调节等增殖活性，抑制细胞分裂，抗肿瘤，免疫调节等一系列生物活性。一系列生物活性。n竞争干扰：外表受体竞争干扰：外表受体 作用底物作用底物 复制区域复制区域n改变宿主细胞代谢途径：改变宿主细胞代谢途径：阻止阻止mRNA翻译翻译n缺陷干扰颗

33、粒：干扰成熟病毒进入细胞缺陷干扰颗粒：干扰成熟病毒进入细胞三干扰现象的意义n干扰现象与机体的免疫：干扰素及其诱生剂治疗n指导疫苗的合理应用n鉴定病毒 四、病毒的感染与免疫四、病毒的感染与免疫n病毒感染的传播方式病毒感染的传播方式n病毒感染的类型病毒感染的类型n病毒感染对宿主细胞的直接作用病毒感染对宿主细胞的直接作用n病毒感染与免疫病毒感染与免疫 病毒感染的传播病毒感染的传播n传播方式传播方式n传播途径传播途径 1、病毒感染的传播方式、病毒感染的传播方式 水平传播水平传播 horizontal transmission：空气传播空气传播 咳嗽、交谈、咳嗽、交谈、打喷嚏等打喷嚏等 粪粪 口传播口传

34、播 肠道排泄肠道排泄V污污染食物染食物 水水 皮肤及黏膜传播皮肤及黏膜传播 唾液单唾液单疱、腮疱、腮 渗出液渗出液 疣患者破损处疣患者破损处 经血传播经血传播HBV HCV HIV 节肢动物叮咬节肢动物叮咬乙脑乙脑 出血热出血热 登登革革 垂直传播垂直传播 Vertical transmission：病毒由母体胎盘、产道病毒由母体胎盘、产道传给传给 胎儿胎儿 2、病毒感染的传播途径、病毒感染的传播途径 据病毒侵入门户不同，不同病毒可从不同的途径据病毒侵入门户不同，不同病毒可从不同的途径 进入宿主，又从宿主体内排出；进入宿主，又从宿主体内排出；一般的途径有：呼吸道、消化道、创伤感染、一般的途径有

35、：呼吸道、消化道、创伤感染、接触感染、血液传播、性传播、接触感染、血液传播、性传播、节肢动物媒介等。节肢动物媒介等。一种病毒可以一种或多种途径侵入宿主机体。一种病毒可以一种或多种途径侵入宿主机体。二感染类型临床病症：临床病症：隐性感染亚临床感染隐性感染亚临床感染 显性感染感染性疾病显性感染感染性疾病病症长短：急性感染病症长短：急性感染 持续性感染持续性感染慢性感染慢性感染潜伏感染潜伏感染慢发病毒感染慢发病毒感染急性病毒感染急性病毒感染的迟发并发症的迟发并发症形成持续性病毒感染的原因n机体免疫功能弱，无力完全去除病毒n病毒存在与受保护的部位，可逃避宿主的免疫作用n抗原性太弱，机体难以产生免疫应答

36、将其去除n产生缺陷性干扰颗粒，改变感染过程，形成持续性感染n病毒基因整合到细胞的基因组中，长期与宿主细胞共存1慢性感染 感染后病毒在体内持续存在，并经常性或间歇性地向体外排除，出现病症，也可无病症。典型V HBV感染可致无病症携带者，长期不愈的肝功损害的病症，伴随肝硬化，开展为肝癌。2潜伏病毒 病毒在原发感染后，病毒基因存在于一定的组织或细胞中，长期潜伏，与宿主细胞保持一定程度的相对平衡，在机体抵抗力降低时，潜伏V激活增殖，引起显性感染。典型V 疱疹病毒引起伴随终身、反复发作的以皮肤损伤为特征的感染口唇疱疹 病症消失病毒潜伏三叉神经节细胞内抵抗力 再次发作3慢发病毒 病毒感染后有很长的潜伏期，

37、无病毒别离出，无病症，经数年或数十年后，可发生某些进行性疾病，并致死。典型V：朊病毒Kuru病4急性病毒感染的迟发并发症n急性后一年或数年发生致死性并发症n典型V 麻疹病毒引起的亚急性硬化性全脑炎SSPE三病毒感染对宿主细胞的直接作用三病毒感染对宿主细胞的直接作用n溶细胞效应溶细胞效应n稳定状态感染稳定状态感染n形成包涵体形成包涵体n细胞转化细胞转化1.溶细胞效应n短时间内细胞被裂解而死亡，常见于无包膜、杀伤性强的病毒，多数引起急性感染。l抑制宿主细胞大分子物质的生物合成抑制宿主细胞大分子物质的生物合成l干扰蛋白质合成的启始干扰蛋白质合成的启始l病毒病毒mRNAmRNA比宿主细胞比宿主细胞mR

38、NAmRNA转译效力更强，竞争转译效力更强，竞争性的抑制了宿主细胞性的抑制了宿主细胞mRNAmRNA的转译。的转译。l溶酶体的改变：病毒感染细胞后，溶酶体破坏，溶酶体的改变：病毒感染细胞后，溶酶体破坏，细胞自溶。细胞自溶。l病毒物质的直接毒性作用：衣壳致细胞病变病毒物质的直接毒性作用：衣壳致细胞病变l细胞器的改变：非特异损伤细胞器的改变：非特异损伤 细胞膜、线粒体、细胞膜、线粒体、核蛋白体损伤核蛋白体损伤2、稳定状态感染 某些病毒进入细胞后能够复制，却不引起细胞裂解 以细胞膜的改变为特征：A、细胞融合：由于病毒酶或感染细胞所释放的溶酶体酶作用 于细胞外表，导致感染细胞与邻近的细胞融合；借此病毒

39、扩散至未感染的细胞。麻疹 VB、细胞外表出现病毒基因编码新抗原，引起自身免疫反响：镶嵌在宿主细胞膜上的病毒抗原蛋白，释放信号成分 病毒致细胞癌变后，病毒核酸发生整合而共表达3、包涵体形成、包涵体形成 在被病毒感染的细胞内在被病毒感染的细胞内所存在的、与正常细所存在的、与正常细 胞结构不同的、新生的、胞结构不同的、新生的、可着色的斑块结构。可着色的斑块结构。其在细胞中的位置因病其在细胞中的位置因病毒种类而异：毒种类而异：核内疱疹核内疱疹V、质内痘、质内痘V、核和质麻疹核和质麻疹 V包涵体的本质是：包涵体的本质是：病毒颗粒的聚集体病毒颗粒的聚集体 病毒积聚的过剩衣病毒积聚的过剩衣壳蛋白壳蛋白 病毒

40、感染引起的细病毒感染引起的细胞反响物胞反响物 4、细胞转化细胞转化 某些病毒在感染细胞后将其核酸整合某些病毒在感染细胞后将其核酸整合到宿主细胞的染色体中引起整合感染，可到宿主细胞的染色体中引起整合感染，可引起细胞某些遗传性状的改变称为细胞转引起细胞某些遗传性状的改变称为细胞转化。化。转化的细胞增殖过快，失去细胞间的接触抑制，是引起肿瘤的重要原因。(四四)病毒感染机体的免疫病理反病毒感染机体的免疫病理反响响 1体液免疫病理作用体液免疫病理作用 A、许多病毒能诱发细胞外表出现新、许多病毒能诱发细胞外表出现新抗原，与其相应抗体结合，在补体抗原，与其相应抗体结合，在补体参与下，引起细胞的破坏；为参与下

41、，引起细胞的破坏；为型型超敏反响；超敏反响；B、抗体介导损伤的另一机制是抗原、抗体介导损伤的另一机制是抗原抗体复合物沉积在一定部位时，激抗体复合物沉积在一定部位时，激活补体，吸引中型粒细胞引起局部活补体，吸引中型粒细胞引起局部组织损伤，即组织损伤，即型超敏反响。型超敏反响。2细胞免疫病理作用细胞免疫病理作用 细胞毒性细胞毒性T细胞细胞CTL能杀伤能杀伤带有病毒抗原的靶带有病毒抗原的靶 细胞，造成组织细胞坏死，细胞，造成组织细胞坏死，属于属于型超敏反响。型超敏反响。3抑制宿主免疫功能抑制宿主免疫功能 与病毒侵犯免疫细胞有关，如与病毒侵犯免疫细胞有关，如HIV对对CD4T细胞细胞 的结合和侵入。的

42、结合和侵入。病毒感染的检测方法病毒感染的检测方法病毒感染的实验室诊断方法病毒感染的实验室诊断方法一一 标本的采集与送检标本的采集与送检检查成败的关检查成败的关键键 1.标本采集标本采集:发病初期或急性期；部位发病初期或急性期；部位;2.标本处理标本处理:无菌操作，无菌操作，抗生素抗生素50甘油盐水，低温保存；甘油盐水，低温保存；3.冷藏送检冷藏送检:12小时送检小时送检;-70保存保存;4.血清学检查应采双份标本。血清学检查应采双份标本。常见别离病毒标本的选择常见别离病毒标本的选择 病毒病毒咽拭子咽拭子粪便粪便血液血液脑脊液脑脊液 唾液唾液 组织组织 柯萨奇柯萨奇A和和B组组+心心 单纯疱疹病

43、毒单纯疱疹病毒+脑膜脑膜 腮腺炎病毒腮腺炎病毒+流感病毒流感病毒+轮状病毒轮状病毒+HAV+HIV+精液精液 二病毒感染的快速诊断二病毒感染的快速诊断 形态学检查形态学检查 光镜检查光镜检查 电镜检查：直接检查；免疫电镜检查电镜检查：直接检查；免疫电镜检查 检测病毒抗原检测病毒抗原 免疫学检测：免疫荧光，免疫学检测：免疫荧光，ELISA，RIA ELISA for HIV antibodyMicroplate ELISA for HIV antibody:coloured wells indicate reactivity 三病毒的别离培养三病毒的别离培养 别离培养别离培养 动物接种动物接种:

44、最原始最原始,易感动物的选择；易感动物的选择；鸡胚接种鸡胚接种:多种病毒敏感，取材方便多种病毒敏感，取材方便 细胞培养细胞培养:最主要最主要;包括器官培养、移植培养和细胞培养包括器官培养、移植培养和细胞培养原代原代 和次代细胞，二倍体细胞株和和次代细胞，二倍体细胞株和传代细胞系传代细胞系 常用于病毒别离的细胞常用于病毒别离的细胞 细胞种类细胞种类可分离的病毒可分离的病毒 原代细胞原代细胞 非洲绿猴肾细胞非洲绿猴肾细胞 人单核细胞人单核细胞 人胚肾、肺细胞人胚肾、肺细胞 恒河猴猕猴肾细胞恒河猴猕猴肾细胞HSV、RSV、VZV、腮腺炎病毒、风疹病毒腮腺炎病毒、风疹病毒 HIV、HTLV、HHV-6

45、腮腺炎病毒、腺病毒腮腺炎病毒、腺病毒ECHO、脊髓灰质炎病毒、柯萨奇脊髓灰质炎病毒、柯萨奇A、B组、组、RSV 二倍体细胞株二倍体细胞株 人胚肺成纤维细胞株人胚肺成纤维细胞株 WI-38、MRC5 CMV、VZV、鼻病毒鼻病毒腮腺炎病毒、腺病毒腮腺炎病毒、腺病毒 传代细胞系传代细胞系 Hela Hep-2 Vero 柯萨奇柯萨奇A、B组、组、RSV腺病毒、腺病毒、RSVHSV、RSV、风疹病毒风疹病毒、轮状病毒、麻疹病毒、轮状病毒、麻疹病毒 细胞的变化细胞的变化:CPE红细胞吸附红细胞吸附病毒的数量和感染性测定：病毒的数量和感染性测定：蚀斑测定蚀斑测定 TCID50的测定的测定新别离病毒的鉴定

46、新别离病毒的鉴定病毒抗原的检测：免疫荧光法检测病毒抗原的检测：免疫荧光法检测病毒核酸的检测病毒核酸的检测血清学诊断细胞代谢改变；血清学诊断细胞代谢改变；四 病毒的鉴定n细胞病变细胞病变(Cytopathic effect,CPE)n包涵体包涵体Inclusion Bodies病毒在培养细胞的病毒在培养细胞的细胞效应细胞效应正常正常 BHK-21CPE/BHK-21 狂犬病毒包涵体狂犬病毒包涵体内基小体内基小体Negri body巨细胞病毒包涵体巨细胞病毒包涵体病毒数量和感染性病毒数量和感染性测定测定1、蚀斑试验、蚀斑试验2、ID50 或或 TCID50 病毒感染鸡胚、动物或细胞后，引起病毒感染

47、鸡胚、动物或细胞后，引起 50%发生死亡或病变的发生死亡或病变的最小量最小量。病毒感染单层细胞后，产生的局限性病灶，称病毒感染单层细胞后，产生的局限性病灶，称蚀斑；蚀斑是由一个感染性病毒体增殖形成的，即蚀斑；蚀斑是由一个感染性病毒体增殖形成的，即为一个蚀斑形成单位，病毒悬液中的感染性病毒量为一个蚀斑形成单位，病毒悬液中的感染性病毒量以以每毫升每毫升的蚀斑形成单位来表示。的蚀斑形成单位来表示。病毒核酸检测技术病毒核酸检测技术 PCR 斑点斑点分子杂交分子杂交(dot-blot)Southern印迹印迹(DNA),Northern印迹印迹(RNA,mRNA),原位原位分子杂交分子杂交,微板微板核酸

48、杂交核酸杂交(chip)基因芯片基因芯片microarray chip 理想标记物应具备的条件理想标记物应具备的条件1敏感性敏感性高高 2.容容易易标记标记 3.标记后标记后不影响不影响序列序列特异性特异性和和杂交温度杂交温度4杂交信号杂交信号检测检测方便方便 5.标记物标记物稳定稳定易易保存保存，对环境，对环境污染污染小小 检测结果判定 感染病毒的感染病毒的临床意义临床意义必须结合必须结合流行病学资料、临床表现、病毒种流行病学资料、临床表现、病毒种类及机体的病理变化类及机体的病理变化作综合分析作综合分析，才能判定！才能判定！理化因素对病毒的影响理化因素对病毒的影响n灭活灭活Inactivat

49、ionn病毒受理化因素作用后，失去感染性病毒受理化因素作用后，失去感染性n灭活病毒仍保存某些特性，如抗原性、灭活病毒仍保存某些特性，如抗原性、红细胞吸附、细胞融合等红细胞吸附、细胞融合等六、病毒感染的防治原那么物理因素物理因素n温度温度n病毒耐冷不耐热。病毒耐冷不耐热。-70C长期保存。冻融可杀死长期保存。冻融可杀死病毒病毒n60C 30 min或或100C数秒即可杀死病毒，但数秒即可杀死病毒，但HBV需需100C 10 min方可杀死方可杀死n有包膜病毒比无包膜病毒对热更敏感有包膜病毒比无包膜病毒对热更敏感npHn多数在多数在pH 59范围稳定范围稳定n肠道病毒耐酸肠道病毒耐酸pH 35n射

50、线和射线和UVnX线、线、射线可将病毒核酸致死性断裂，从而杀死射线可将病毒核酸致死性断裂，从而杀死病毒病毒nUV：使核苷酸形成二聚体：使核苷酸形成二聚体TU，抑制病毒复，抑制病毒复制，但可光复活，不宜用来制备疫苗制，但可光复活，不宜用来制备疫苗化学因素化学因素n脂溶剂：乙醚、氯仿、去氧胆酸盐脂溶剂：乙醚、氯仿、去氧胆酸盐n有包膜病毒敏感。无包膜病毒无作用如肠道病有包膜病毒敏感。无包膜病毒无作用如肠道病毒毒n乙醚试验可鉴别病毒有无包膜乙醚试验可鉴别病毒有无包膜n消毒剂：过氧乙酸、甲醛、戊二醛、卤素消毒剂：过氧乙酸、甲醛、戊二醛、卤素n杀死大多数病毒，但病毒对消毒剂抵抗力比细菌杀死大多数病毒，但病

51、毒对消毒剂抵抗力比细菌强，尤其是无包膜病毒强，尤其是无包膜病毒n常用甲醛来制备灭活疫苗常用甲醛来制备灭活疫苗n其他其他n抗生素：对病毒无作用抗生素：对病毒无作用n中草药：有一定作用中草药：有一定作用二二 抗病毒治疗抗病毒治疗 金刚烷胺金刚烷胺,阿糖腺苷阿糖腺苷,无环鸟苷无环鸟苷,羟丙氧甲基鸟嘌羟丙氧甲基鸟嘌呤呤 叠氮脱氧胸苷叠氮脱氧胸苷(AZT),干扰素干扰素 干扰素诱生剂干扰素诱生剂,中草药中草药抗病毒化学药物的作用机制n阻断病毒脱壳阻断病毒脱壳n阻断病毒核酸合成阻断病毒核酸合成 n核苷类似物核苷类似物nucleoside analogue、核苷酸类似物核苷酸类似物nucleotide an

52、alogue和非核苷类似物和非核苷类似物n主要应用于疱疹病毒、逆转录病毒主要应用于疱疹病毒、逆转录病毒n阻断病毒蛋白质合成阻断病毒蛋白质合成n阻断病毒释放阻断病毒释放抗病毒化学药物作用的靶位点抗病毒化学药物作用的靶位点作用靶点作用靶点药物药物n复制早期复制早期n由病毒由病毒DNA或或RNA聚合酶聚合酶介导的核酸合成介导的核酸合成n病毒前体蛋白切割病毒前体蛋白切割n病毒病毒mRNA翻译蛋白翻译蛋白n病毒释放病毒释放n金刚烷胺甲基金刚烷胺金刚烷胺甲基金刚烷胺n无环鸟苷丙氧鸟苷脱氧鸟苷无环鸟苷丙氧鸟苷脱氧鸟苷penciclovirfamciclovircidofovir阿糖阿糖腺苷腺苷idoxuri

53、dine3氟胸腺嘧啶甲酸磷霉氟胸腺嘧啶甲酸磷霉素素AZTddIddCd4T3TCnevirapine病毒唑拉米夫啶病毒唑拉米夫啶n赛科纳瓦英迪纳瓦瑞托纳瓦耐菲纳瓦赛科纳瓦英迪纳瓦瑞托纳瓦耐菲纳瓦n干扰素干扰素fomiversinnZanamiviroseltamivir阻断病毒核酸合成的药物阻断病毒核酸合成的药物靶病毒靶病毒分子结构分子结构药药 物物疱疹病毒疱疹病毒逆转录病毒逆转录病毒其他病毒其他病毒核苷类似物核苷类似物非核苷类似物非核苷类似物核苷类似物核苷类似物核苷酸类似物核苷酸类似物非核苷类似物非核苷类似物核苷类似物物核苷类似物物无环鸟苷丙氧鸟苷无环鸟苷丙氧鸟苷cidofovir阿糖腺苷碘

54、苷阿糖腺苷碘苷三氟胸苷三氟胸苷甲酸磷霉素甲酸磷霉素AZTddIddCd4T3TCAdefovirNevirapinedelavirdineefavirenz病毒唑病毒唑 二病毒感染的预防二病毒感染的预防疫苗疫苗 1、灭活疫苗、灭活疫苗:核酸灭活核酸灭活,抗抗原性存在原性存在;2、减毒活疫苗、减毒活疫苗:自然或人工自然或人工筛选低毒筛选低毒 的变异的变异株株;潜在风险有：回复毒力、并潜在风险有：回复毒力、并发症、活化潜伏病毒、引起持发症、活化潜伏病毒、引起持续感染续感染 3、亚单位疫苗亚单位疫苗:纯化包膜或衣壳上蛋白亚单位纯化包膜或衣壳上蛋白亚单位;4、多肽疫苗多肽疫苗:如提取如提取HBV HB

55、sAg的多肽成分的多肽成分;基因工程制备基因工程制备HBsAg。免疫制剂免疫制剂 免疫血清免疫血清,胎球胎球,丙球丙球 等。等。现代疫苗学开展策略现代疫苗学开展策略 将病原微生物基因克隆到适宜的载体，再导入适将病原微生物基因克隆到适宜的载体，再导入适宜的表达系统中表达中和性免疫原遗传信息；宜的表达系统中表达中和性免疫原遗传信息；选择缺失基因的减毒病原体载体，插入一些外源选择缺失基因的减毒病原体载体，插入一些外源基因，当这些活载体疫苗进行流产性复制时，表基因，当这些活载体疫苗进行流产性复制时，表达出的抗原暴露于宿主免疫系统；达出的抗原暴露于宿主免疫系统；预防多种疾病、接种次数少的多价联合疫苗；预防多种疾病、接种次数少的多价联合疫苗；利用质粒利用质粒DNA诱导免疫应答的核酸疫苗；诱导免疫应答的核酸疫苗；疫苗的免疫增强物及对免疫系统的调节；疫苗的免疫增强物及对免疫系统的调节；特定免疫原或免疫调节提呈的新型微载体系统。特定免疫原或免疫调节提呈的新型微载体系统。复习题目1.病毒体 核衣壳 缺陷病毒 IFN CPE 顿挫感染2.病毒的根本特征3.病毒的结构蛋白的生物功能4.以dsDNA为例描述病毒增殖的过程5.病毒持续性感染的类型及代表6.病毒感染对宿主细胞的作用