第21章免疫检测的质量控制

《第21章免疫检测的质量控制》由会员分享，可在线阅读，更多相关《第21章免疫检测的质量控制（57页珍藏版）》请在装配图网上搜索。

1、临床免疫检验的临床免疫检验的质量控制质量控制 为保证病人临床诊疗或临床实验研究为保证病人临床诊疗或临床实验研究的有效性，临床实验室采取一系列有效的有效性，临床实验室采取一系列有效的措施证明其测定数据能够达到所确定的措施证明其测定数据能够达到所确定的质量标准，这就是质量保证的内容。的质量标准，这就是质量保证的内容。质量保证质量保证(Quality Assurance,QA)(Quality Assurance,QA)为一产为一产品或服务满足特定质量要求提供充分品或服务满足特定质量要求提供充分可信性可信性所必要的所必要的有计划的和系统的措施有计划的和系统的措施。室内质量控制室内质量控制（Inter

2、nal Quality Internal Quality Control,IQC)Control,IQC)由由实验室工作人员实验室工作人员，采取，采取一定的方法和步骤，连续评价本实验室工作一定的方法和步骤，连续评价本实验室工作的可靠性程度。的可靠性程度。一、与质量保证相关的定义一、与质量保证相关的定义室间质量评价室间质量评价 （External Quality External Quality Assessment,EQAAssessment,EQA）为客观比较一实为客观比较一实验室的测定结果与靶值的差异，由验室的测定结果与靶值的差异，由外外单位机构单位机构客观地评价实验室的结果，客观地评价实

3、验室的结果，发现误差并校正结果发现误差并校正结果准确度准确度 (accuracy)(accuracy):待测物的测定值与其真待测物的测定值与其真值的一致性程度。值的一致性程度。偏倚偏倚 (bias)(bias)待测物的测定值与一可接受参待测物的测定值与一可接受参考值之间的差异。考值之间的差异。精密度精密度(precision)(precision)在一定条件下所获得的在一定条件下所获得的独立的测定结果之间的一致性程度。独立的测定结果之间的一致性程度。准确度好的实验，其精密度不一定好；准确度好的实验，其精密度不一定好；准确度差的实验，其精密度则不一定差；反之亦然。准确度差的实验，其精密度则不一定

4、差；反之亦然。测定的精密度与准确度之间的关系测定的精密度与准确度之间的关系 重复性条件重复性条件(repeatability(repeatability conditions)conditions)是指在短的间隔时间是指在短的间隔时间内，在同一实验室对相同的测定项目使内，在同一实验室对相同的测定项目使用同一方法和同一仪器设备，由相同的用同一方法和同一仪器设备，由相同的操作者获得独立的测定结果的条件。操作者获得独立的测定结果的条件。批批 (Run)(Run)在相同条件下所获得的一组测定。在相同条件下所获得的一组测定。均值均值（MeanMean）标准差（标准差（Standard deviation

5、,SD)Standard deviation,SD)变异系数变异系数（Coefficient of variation,CVCoefficient of variation,CV）正态分布正态分布(Gaussian distribution)(Gaussian distribution)当一质控当一质控物用同一方法在不同的时间重复多次测定，得到一物用同一方法在不同的时间重复多次测定，得到一个两头低，中间高，中为所有测定值的均值，左右个两头低，中间高，中为所有测定值的均值，左右对称的对称的“钟形钟形”曲线，又称高斯分布。曲线，又称高斯分布。正态分布的基本统计学含义正态分布的基本统计学含义可用均数

6、、标准差（可用均数、标准差（s s）和概）和概率来说明。率来说明。诊断敏感性诊断敏感性（sensitivity of diagnosissensitivity of diagnosis）指将实际患病者正确地判断为阳性（真阳性）的百分率。指将实际患病者正确地判断为阳性（真阳性）的百分率。诊断特异性诊断特异性（specificity of diagnosisspecificity of diagnosis）指将实际无病者正确地判断为阴性（真阴性）的百分率。指将实际无病者正确地判断为阴性（真阴性）的百分率。二、实验方法诊断效率评价二、实验方法诊断效率评价诊断效率诊断效率（efficiency of

7、diagnosisefficiency of diagnosis）指能准确区分患者和非患者的能力。指能准确区分患者和非患者的能力。阳性预测值阳性预测值（positive predictive value,PPVpositive predictive value,PPV）是指特定试验方法测定得到的阳性结果中真阳性的是指特定试验方法测定得到的阳性结果中真阳性的比率。比率。阴性预示值阴性预示值(negative predictive value,NPV)(negative predictive value,NPV)是指特定试验方法测定得到的阴性结果中真阴性的是指特定试验方法测定得到的阴性结果中真阴性

8、的比率。比率。标本类型及采集容器标本类型及采集容器标本采集时间及患者准备标本采集时间及患者准备内源性干扰因素内源性干扰因素外源性干扰因素外源性干扰因素一、标本的正确收集及处理一、标本的正确收集及处理最常用的标本：最常用的标本：血液，包括血清、血浆血液，包括血清、血浆和全血。唾液或尿液和全血。唾液或尿液 。建议采用建议采用真空采血管及蝶形针具真空采血管及蝶形针具，以免，以免直接接触血液。采集容器最好为一次性直接接触血液。采集容器最好为一次性无菌密闭容器。无菌密闭容器。标本类型及采集容器标本类型及采集容器激素和治疗药物激素和治疗药物感染性病原体抗原、抗体感染性病原体抗原、抗体肿瘤标志物肿瘤标志物特

9、定蛋白特定蛋白内源性干扰因素内源性干扰因素类风湿因子类风湿因子补体补体异嗜性抗体异嗜性抗体治疗性抗体治疗性抗体自身抗体自身抗体溶菌酶溶菌酶磷脂磷脂药物小分子药物小分子总蛋白浓度等总蛋白浓度等溶血溶血细菌污染细菌污染标本贮存时间过长标本贮存时间过长凝固不全凝固不全反复冻融反复冻融试剂准备试剂准备标本收集标本收集测定方法和仪器操作测定方法和仪器操作 “标准操作程序标准操作程序”(SOP)(SOP)二、标准化操作及流程二、标准化操作及流程人员的合理使用和培训人员的合理使用和培训 操作人员的业务培训（包括检测原理、操作人员的业务培训（包括检测原理、基本操作、日常保养及维护等基本操作、日常保养及维护等)

10、标准品和质控品的分类标准品和质控品的分类标准品和质控品的基本条件标准品和质控品的基本条件三、标准品和质控品的应用三、标准品和质控品的应用标准品即含量确定的处于一定基质中的标准品即含量确定的处于一定基质中的特性明确的物质。特性明确的物质。标准品分级标准品分级:一级标准品一级标准品为国际标准品为国际标准品二级标准品二级标准品为国家标准品为国家标准品三三级标准品级标准品为商品校准品为商品校准品国际临床化学学会（国际临床化学学会（IFCC）对质控品的定义为：）对质控品的定义为：专门用于质量控制目的的标本或溶液；不能用作专门用于质量控制目的的标本或溶液；不能用作校准。校准。质控品可以是液体的、冰冻的、冻

11、干质控品可以是液体的、冰冻的、冻干质控品性能：质控品性能：稳定性，瓶间差，定值和非定值，稳定性，瓶间差，定值和非定值，分析物水平，预处理的要求等分析物水平，预处理的要求等 制备质控品所用的基础材料一般为来自人或动物的制备质控品所用的基础材料一般为来自人或动物的血清或其他体液。经过处理，又添加了其他外加的血清或其他体液。经过处理，又添加了其他外加的材料，如防腐剂等。材料，如防腐剂等。在对某一分析物进行检测时，处于该分析物周围的在对某一分析物进行检测时，处于该分析物周围的其他成分的组合，是该分析物的基质。由于这些组其他成分的组合，是该分析物的基质。由于这些组合成分的存在，对分析物在检测时的影响称为

12、基质合成分的存在，对分析物在检测时的影响称为基质效应。效应。理想状态下，控制品应和检验的患者标本具有相同理想状态下，控制品应和检验的患者标本具有相同的基质状态；的基质状态；这样，质控品将和病人标本具有相这样，质控品将和病人标本具有相同的表现。同的表现。在厂商说明的有效期内，说明书上关于质控品性在厂商说明的有效期内，说明书上关于质控品性能的各个指标，如：冻干品的复溶性能、有何浑能的各个指标，如：冻干品的复溶性能、有何浑浊的表现、各被检分析物实际检测值是否在规定浊的表现、各被检分析物实际检测值是否在规定的范围内等是否和说明书相符，都是产品稳定性的范围内等是否和说明书相符，都是产品稳定性的反映，很重

13、要。的反映，很重要。好的质控品可以在规定的保存条件下，至少稳定好的质控品可以在规定的保存条件下，至少稳定1 12 2年。年。实验室最好购买够用实验室最好购买够用1 1年的年的1 1个批号的质控品个批号的质控品只有将瓶间差异控制到最小，才能使检测结果间只有将瓶间差异控制到最小，才能使检测结果间的变异真正反映日常检验操作的不精密度。的变异真正反映日常检验操作的不精密度。冻干的质控品复溶的操作一定要严加控制，注意冻干的质控品复溶的操作一定要严加控制，注意复溶操作的标准化，否则实验室自身造成新的瓶复溶操作的标准化，否则实验室自身造成新的瓶间差。间差。液体质控品，消除了复溶过程引入的误差；但是液体质控品

14、，消除了复溶过程引入的误差；但是较昂贵，且总含有防腐剂类的添加物，对某些检较昂贵，且总含有防腐剂类的添加物，对某些检测方法引入了基质效应的误差。测方法引入了基质效应的误差。厂商在定值质控品上提供的预期范围很宽，厂商在定值质控品上提供的预期范围很宽，包含了质控品的缓慢变化使实际检测值有偏包含了质控品的缓慢变化使实际检测值有偏离初始均值的倾向。离初始均值的倾向。千万不能将预期制范围认为是质控的允许范千万不能将预期制范围认为是质控的允许范围。围。不论定值还是不定值的质控品，使用时，必不论定值还是不定值的质控品，使用时，必须用自己的检测系统确定自己的均值和标准须用自己的检测系统确定自己的均值和标准差，

15、用于日常工作的过程控制中。差，用于日常工作的过程控制中。临床最关心各项目（分析物）的医学决定临床最关心各项目（分析物）的医学决定水平浓度的检验结果的质量；水平浓度的检验结果的质量；实验室更关心检测系统（方法）性能的在实验室更关心检测系统（方法）性能的在临界限值处的质量表现。临界限值处的质量表现。在选择质控品时，应该有几个浓度的、浓在选择质控品时，应该有几个浓度的、浓度分布较宽的、最好是医学决定水平的、度分布较宽的、最好是医学决定水平的、有可报告范围的上下限值的质控品。有可报告范围的上下限值的质控品。依据实验室和临床的要求作出选择。依据实验室和临床的要求作出选择。检验人员在使用前必须认真阅读质控

16、品的检验人员在使用前必须认真阅读质控品的使用说明书，明确要求后再开始使用。使用说明书，明确要求后再开始使用。（1 1）严格按说明书操作；）严格按说明书操作；（2 2）冻干质控品的复溶要确保所用溶剂的质量；）冻干质控品的复溶要确保所用溶剂的质量；（3 3）冻干质控品复溶时所加溶剂的量要准确，并尽量保）冻干质控品复溶时所加溶剂的量要准确，并尽量保持每次加入量的一致性；持每次加入量的一致性；（4 4）冻干质控品复溶时应轻轻摇匀，使内容物完全溶解，）冻干质控品复溶时应轻轻摇匀，使内容物完全溶解，切忌剧烈振摇；切忌剧烈振摇；（5 5）质控品应严格按使用说明书规定的方法保存，不使）质控品应严格按使用说明书

17、规定的方法保存，不使用超过保质期的质控品；用超过保质期的质控品；（6 6）质控品要在与患者标本同样测定条件下进行测定。）质控品要在与患者标本同样测定条件下进行测定。临床免疫检验实验室应有充分合理的空间、临床免疫检验实验室应有充分合理的空间、良好的照明、空调及湿度维持设备良好的照明、空调及湿度维持设备实验室仪器设备应保养良好，实验用品要实验室仪器设备应保养良好，实验用品要达到相应的要求达到相应的要求。四、实验室的环境、设施和设备四、实验室的环境、设施和设备第三节第三节 质量保证、室内质质量保证、室内质控控和室间质评之间的关系和室间质评之间的关系 IQCIQC仅覆盖标本收集、实验室测定过程和结仅覆

18、盖标本收集、实验室测定过程和结果报告及其解释分析步骤；而果报告及其解释分析步骤；而EQAEQA还包括一个较还包括一个较大范围的实验室活动，诸如在标本接收中样本大范围的实验室活动，诸如在标本接收中样本处理的可靠性，以及测定结果的报告和解释。处理的可靠性，以及测定结果的报告和解释。QAQA覆盖了更宽范围的活动，最为重要的是标本覆盖了更宽范围的活动，最为重要的是标本收集、结果报告和解释阶段。收集、结果报告和解释阶段。QAQA还应评价实验还应评价实验报告的发出周期（及时性）、完整性和简洁性。报告的发出周期（及时性）、完整性和简洁性。实验室工作的质量保证在确保患者治疗质量上实验室工作的质量保证在确保患者

19、治疗质量上有重要意义。有重要意义。免疫检验质量控制中常用统计免疫检验质量控制中常用统计学方法的选择学方法的选择定性定性免疫检验免疫检验 定量定量免疫检验免疫检验 统计学质量控制统计学质量控制:使用室内质控物与临床常使用室内质控物与临床常规标本同时检测，然后根据室内质控物的测定规标本同时检测，然后根据室内质控物的测定结果，采用统计学的原理方法判断所进行的临结果，采用统计学的原理方法判断所进行的临床常规标本测定是否在控的一种质量控制措施。床常规标本测定是否在控的一种质量控制措施。一、免疫检验质量控制中常用统计学一、免疫检验质量控制中常用统计学方法的选择方法的选择检验误差有两类：一是检验误差有两类：

20、一是系统误差，系统误差，一是一是随机误差随机误差。系统误差通常表现为质控物测定均值的漂移，是由操系统误差通常表现为质控物测定均值的漂移，是由操作者所使用的仪器设备、试剂、标准品或校准物出现作者所使用的仪器设备、试剂、标准品或校准物出现问题而造成的，这种误差可以通过前述的措施方法加问题而造成的，这种误差可以通过前述的措施方法加以控制，是可以排除的。以控制，是可以排除的。随机误差则表现为测定随机误差则表现为测定SDSD的增大，主要是由实验操作的增大，主要是由实验操作人员的操作等随机因素所致，其出现难以完全避免和人员的操作等随机因素所致，其出现难以完全避免和控制。控制。统计学质控的功能就是发现误差的

21、产生统计学质控的功能就是发现误差的产生及分析误差产生的原因，采取措施予以及分析误差产生的原因，采取措施予以避免。避免。开展统计质量控制前，应将可以控制的开展统计质量控制前，应将可以控制的误差产生因素尽可能地加以控制，这不误差产生因素尽可能地加以控制，这不但是做好室内质控的前提，也是保证常但是做好室内质控的前提，也是保证常规检验工作质量的先决条件。规检验工作质量的先决条件。最佳条件下的变异（最佳条件下的变异（Optimal conditions Optimal conditions variance,OCVvariance,OCV）和常规条件下的变异（）和常规条件下的变异（Routine Rou

22、tine conditions variance,RCVconditions variance,RCV）；）；当当RCVRCV与与OCVOCV接近，或小于接近，或小于2 OCV2 OCV时，则时，则RCVRCV是可以是可以接受的。以上为批间变异。接受的。以上为批间变异。批内变异的测定；批内变异的测定；室内质控物的测定准确度的评价。室内质控物的测定准确度的评价。临床免疫检测质控图的选择、绘制临床免疫检测质控图的选择、绘制及质控结果判断及质控结果判断 也称也称ShewhartShewhart质控图，是由美国的质控图，是由美国的Shewhart Shewhart 于于19241924年首先提出，并用

23、于工业产品的质量控制。年首先提出，并用于工业产品的质量控制。二十世纪五十年代初，二十世纪五十年代初，Levey-JenningsLevey-Jennings将其引入将其引入临床检验的质量控制临床检验的质量控制 。经。经HenryHenry和和SegaloveSegalove的改的改良，即为目前常用的良，即为目前常用的Levey-JenningsLevey-Jennings质控图。质控图。(1)(1)统计学含义统计学含义:稳定条件下，在稳定条件下，在2020个个IQCIQC结果中不结果中不应有多于应有多于1 1个结果超过个结果超过2SD2SD（95.5%95.5%可信限）限度；可信限）限度；在在

24、10001000个测定结果中超过个测定结果中超过3SD3SD（99.7%99.7%可信限）的可信限）的结果不多于结果不多于3 3个。如以个。如以3s3s为失控限，假失控的概为失控限，假失控的概率为率为0.3%0.3%。(2)(2)对待质控品应如对待病人标本一样同等对待，对待质控品应如对待病人标本一样同等对待，不能进行特殊处理，在每批病人标本测定的同时测不能进行特殊处理，在每批病人标本测定的同时测定质控品，将所得结果标在质控图上，质控品在控定质控品，将所得结果标在质控图上，质控品在控时，方能报告该批病人标本的测定结果，质控品失时，方能报告该批病人标本的测定结果，质控品失控时，说明测定过程存在问题

25、，不能报告病人标本控时，说明测定过程存在问题，不能报告病人标本结果，应解决存在的问题，并重新测定在控后方能结果，应解决存在的问题，并重新测定在控后方能报告；报告；（3 3）当使用一个以上浓度的质控品想在同一张）当使用一个以上浓度的质控品想在同一张质控图描点时，则质控图上均值和质控图描点时，则质控图上均值和s s可不标具体可不标具体数据，而仅以和数据，而仅以和s s表示；表示；（4 4）若以均值）若以均值2s2s为失控限，假失控的概率太为失控限，假失控的概率太高，通常不能接受；以均值高，通常不能接受；以均值3s3s为失控限，假为失控限，假失控的概率低，但误差检出能力不强。失控的概率低，但误差检出

26、能力不强。质控图的记录质控图的记录质控结果质控结果日期日期试剂试剂质控物批号和含量质控物批号和含量测定者姓名等。测定者姓名等。通常质控规则以符号通常质控规则以符号A AL L来表示，其中来表示，其中A A为质控测定中超出为质控测定中超出质量控制限的测定值的个数，质量控制限的测定值的个数，L L为控制限，通常用均值为控制限，通常用均值或均值或均值1 13SD3SD来表示。来表示。当质控测定值超出控制限当质控测定值超出控制限L L时，即该批测定判为失控。时，即该批测定判为失控。常用的常用的1 13S3S质控规则，其中质控规则，其中1 1为原式中的为原式中的A A，3s3s为原式中的为原式中的L L

27、，表示均值，表示均值3s3s，其确切的含义为：在质控测定值中，其确切的含义为：在质控测定值中，如果有一个测定值超出均值如果有一个测定值超出均值3s3s范围，即可将该批测定范围，即可将该批测定判为失控。判为失控。质控规则的表达方式质控规则的表达方式符符 号号 定定 义义1 12S2S 一个质控测定值超出一个质控测定值超出2s2s控制限。控制限。1 13S3S 一个质控测定值超出一个质控测定值超出3s3s控制限。控制限。2 22S2S 两个连续的质控测定值同时超出两个连续的质控测定值同时超出+2s+2s或或2s2s控制限。控制限。R R4S4S 同一批测定中，两个不同浓度质控物的测定值之间的同一批

28、测定中，两个不同浓度质控物的测定值之间的 差值超出差值超出4s4s控制限。控制限。4 41S1S 四个连续的质控测定值同时超出四个连续的质控测定值同时超出+1s+1s或或1s1s控制限。控制限。7 7T T 七个连续的质控测定值呈现一个向上或向下的趋势变七个连续的质控测定值呈现一个向上或向下的趋势变 化。化。1010X X 十个连续的质控测定值同时处于均值（十个连续的质控测定值同时处于均值（X X）的同一侧。）的同一侧。常用质控规则的符号及定义常用质控规则的符号及定义WestgardWestgard多规则质控方法即是将前述的多个质控规则同时多规则质控方法即是将前述的多个质控规则同时应用进行质控

29、判断的方法。应用进行质控判断的方法。最初常用的有六个质控规则，即最初常用的有六个质控规则，即1 12S2S、1 13S3S、2 22S2S、R R4S4S、4 41S1S和和1010X X，其中，其中1 12S2S规则作为告警规则。规则作为告警规则。1 13S3S和和R R4S4S规则反映的是随机误差。规则反映的是随机误差。2 22S2S、4 41S1S和和1010X X反映的是系反映的是系统误差，系统误差超出一定的程度，也可从统误差，系统误差超出一定的程度，也可从1 13S3S和和R R4S4S规则规则反映出来。反映出来。在在Levey-JenningsLevey-Jennings质控图方法

30、的基础上产生，质控图方法的基础上产生，具有具有Levey-Jennings Levey-Jennings 质控图方法的优点，可质控图方法的优点，可通过相似的质控图来进行分析。通过相似的质控图来进行分析。假失控和假告警概率低。假失控和假告警概率低。误差检出能力增强误差检出能力增强 。累积和累积和(CUSUM)(CUSUM)质控方法于质控方法于19771977年年由由WestgardWestgard等提出等提出,对系统误差有较对系统误差有较好的测出能力。好的测出能力。“即刻法即刻法”的实质是一种统计学方法的实质是一种统计学方法,即即GrubsGrubs异常值取舍法。异常值取舍法。只要有只要有3 3

31、个以上的数据即可决定是否有异个以上的数据即可决定是否有异常值的存在。常值的存在。已知的已知的弱阳性质控弱阳性质控:每次测定都应至少带一每次测定都应至少带一个已知的弱阳性对照，从而有助于判断临床个已知的弱阳性对照，从而有助于判断临床标本的检测结果是否有效。标本的检测结果是否有效。阴性质控阴性质控:必需必需 二、定性免疫检验质量控制二、定性免疫检验质量控制定量免疫检验方法通常需要使用全自动免疫分析定量免疫检验方法通常需要使用全自动免疫分析仪，由于其对测定结果要求有准确的量值，因此仪，由于其对测定结果要求有准确的量值，因此在测定时须用校准品对仪器进行校准在测定时须用校准品对仪器进行校准.室内质控则应

32、选择特定试剂盒或方法的测定范围室内质控则应选择特定试剂盒或方法的测定范围内的高、中和低三种浓度的质控品，以监测对不内的高、中和低三种浓度的质控品，以监测对不同浓度标本的测定变化。同浓度标本的测定变化。三、定量免疫检验质量控制三、定量免疫检验质量控制第五节第五节 免疫检验免疫检验室内质量控制的数据处理室内质量控制的数据处理IQCIQC仅覆盖上述各步中的测定分析步骤；仅覆盖上述各步中的测定分析步骤；积极参加各级权威机构的室间质评积极参加各级权威机构的室间质评IQCIQC可确保每次测定与确定的质量标准可确保每次测定与确定的质量标准一致。一致。EQA EQA的实施，将有力地促进临床免疫的实施，将有力地促进临床免疫检验的标准化。检验的标准化。免疫检验质量保证的意义免疫检验质量保证的意义谢谢！谢谢观看/欢迎下载BY FAITH I MEAN A VISION OF GOOD ONE CHERISHES AND THE ENTHUSIASM THAT PUSHES ONE TO SEEK ITS FULFILLMENT REGARDLESS OF OBSTACLES.BY FAITH I BY FAITH