低温对植物光合和根系活力的影响

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1、低温对小麦光合和根系活力的影响学院:农学院专业:2010 级 植物学姓名:张曦 二一、亠1 前言低温是限制粮食作物生产的主要胁迫因子之一,温度过低,不仅会影响 作物生长,而且会直接或者间接减少作物产量,对农业经济产生不利影响。 本文主要对小麦进行研究,研究了小麦在低温状态下光合色素的含量1、根 系总吸收面积和活跃吸收面积以及氯化三苯基氯化四氮唑(TTC )法则顶 根系活力。光合作用是植物获取能量和有机物的重要途径之一,而叶绿 素的含量对于光合作用至关重要,所以研究叶绿素在低温的含量变化也 是对研究小麦在逆境环境下的生长有重要意义。植物根系是活跃的吸收 器官和合成器官,根的生长情况和活力水平直接

2、影响地上部的生长和营 养状况及产量水平 4。研究根系吸收面积 3的大小也是研究小麦在逆境下 的生长的重要方法。 TTC 是标准氧化还原电位为 80mV 的氧化还原物质, 溶于水中称为无色溶液,但是还原后即生成红色而不溶于水的三苯基甲( TTF ) ,生成的 TTF 比较稳定,不会被空气的氧自动氧化,所以 TTC 的 还原量能表示脱氢酶活性,并作为根系活力的指标。测定在逆境小麦种 TTC 还原强度可以研究小麦根系在逆境下活力的变化,也对植物在逆境 下的生长研究有重要意义 5。2 材料与方法2.1 材料本实验所用的材料是两种小麦样品,一种是常温(10C )下的小麦幼苗 作为低温样品,另一种是在25

3、C温箱中24h培养的小麦幼苗作为正常样品, 两种样品都是由河南科技大学农学院所提供。2.2 光合色素的含量、根系吸收面积以及根系活力的测定2.2.1 光合色素的含量的测定叶绿素提取:称取剪碎的小麦样品0.2g,分别放入研钵中,研磨成浆, 再加入乙醇10ml。静置后过滤到25ml棕色容量瓶中(注意用少量乙醇冲洗 研钵、研棒及残渣数次,最后联通残渣一同倒入漏斗中)。测定:把叶绿体色素提取液倒入比色杯内。以 96%的乙醇作为空白,在 波长 665nm、649nm 和 470nm 下测定光密度。2.2.2 根系总吸收面积和活跃吸收面积的测定甲烯蓝溶液标准曲线的制作:取 7 个试管加入不同浓度的甲烯蓝溶

4、液, 测得其吸光度值,然后以甲烯蓝浓度为横坐标,以光密度为纵坐标绘制标准 曲线。根据实验结果测得的标准曲线为C=0.0061XA660。样品测定:取小麦根系用滤纸将水吸干再用排水法在量杯或者量筒中测 定其根系体积。把0.0002mol/L甲烯蓝溶液分别倒在三个编号的小烧杯里,每 杯中溶液量约10倍于跟的体积,准确记下每杯的溶液用量。然后取根系,每 杯中浸1.5min。从3个烧杯中各取1ml溶液加入试管,均稀释10倍,测得其 吸光度,查标准曲线,求出每杯浸入根系后溶液中剩下的甲烯蓝毫克数。2.2.3 根系活力的测定TTC标准曲线的制作:首先制作浓度不同的TTC溶液,然后以空白做对 照,在 485

5、nm 波长下测定其光密度,绘制标准曲线。实验得出标准曲线为:TTC还原量=417.15 X A485样品测定:称取小麦样根0.5g,放入小试管中,加入0.45TTC溶液和 磷酸缓冲液的等量混合液10ml,在37C下暗处保温1h。然后加入1mol/L 的硫酸2ml。再把跟取出磨碎,提出TTF。最后用乙酸乙酯定容至10ml, 用分光光度计在 485nm 下比色,记录光密度值。3 实验结果3.1 低温胁迫对小麦光和色素的影响实验记录结果如下表:665nm649nm470nm正常(平均值)1.0560.6521.197低温(平均值)1.3680.8491.36根据公式计算叶绿体色素含量:Ca=13.9

6、5D -6.88D665 649Cb=24.96D -7.32D649 665Cx c=( 1000D-2.05Ca-114.8Cb)/245470叶绿体色素含量=样品薛重(或干重)X1ml/1000ml/L由上述公式可以计算出叶绿体色素含量如下表:1. 8001. 6001. 4001. 2001. 0000. 8000. 6000. 4000. 2000. 000正常(平均值低温(平均值叶绿体a.叶绿体b胡萝卜素叶绿体a叶绿体b胡萝卜素正常(平均值)1.2811.0680.100低温(平均值)1.6551.3970.025由实验结果和图表可知,本实验所用的小麦样品在相对低温下色素含量略 升

7、高,只有胡萝卜素降低3.2 低温胁迫对小麦根系吸收面积的影响编号光密度正常10.53920.73030.887冷冻10.42720.61830.757根据公式计算:总吸收面积(m2 ) =(C- C,)XVJ+ (C2- C2,)XV2X.l 活跃吸收面积(m2) =(C3- C3 )XV3X1.1活跃吸收面积()=活跃吸收面积/总吸收面积X100比表面=跟的总吸收面积/根的体积由上述公式可得出以下结果,如下表:总吸收面和(m2)活跃吸收面和(m2)正常低温60. 00%0. 00%50. 00%口活紙吸收面积()10. 00%斗 40. 00%R 30. 00%20. 00%种类数值正常总吸

8、收面积(m2)0.08696活跃吸收面积(m2)0.01526活跃吸收面积()17.55%比表面(m2/ml)0.43480低温总吸收面积(m2)0.02997活跃吸收面积(m2)0.01544活跃吸收面积()51.38%比表面(m2/ml)0.14985比表面(m2/ml)正常低温口比表面由图可知:本实验所用的小麦样品在相对低温下总吸收面积是降低 了,但是活跃吸收面积变化不大。所以导致低温生长的小麦活跃吸收面 积百分比大。而低温生长的小麦比表面值有所降低。根据公式计算:3.3 TTC法则定根系活力正常低温还原强度吸光值正常0.458低温1.052四氮唑还原强度壬还原强度正常382.109低温

9、846.815四氮呼还原强度对比由图可知:本实验所用的小麦样品在相对低温下四氮唑还原强度升高 了。4 讨论本实验通过研究小麦在低温状态下光合色素的含量、根系总吸收面积和 活跃吸收面积以及氯化三苯基氯化四氮唑(TTC )法则顶根系活力来研究 小麦在低温状态下的各种状态指标。结果显示,低温状态下生长的小麦 的叶绿素含量普遍升高(胡萝卜素无变化) 2;总吸收面积是降低了,但 是活跃吸收面积变化不大,所以导致低温生长的小麦活跃吸收面积百分比 大。而低温生长的小麦比表面值有所降低。最后低温的小麦四氮唑还原强 度升高了。这种普遍升高的现象有可能是因为实验所取的低温样本是10C 室温下培养的,在这种温度下,

10、小麦的各项指标升高也许和小麦的抗逆性 有关,自己调节各项指标,使体内各项指标维持在一个动态平衡。也有可 能是在10C正好是样品的最适生长温度,所以比温箱25C培养的小麦样本 各项指标要高。通过研究低温对小麦光合和根系活力的影响,也是为研究小麦生长机 理,低温胁迫环境下的生理变化以及小麦的高质高产研究打下了基础。只有 先把小麦的各项生理指标研究透彻,才能更进一步研究小麦在低温下的生长 所需的条件6,提供小麦在低温下生长的最适环境,小麦就会高质高产,也 就可以带来经济效益。5 参考文献1卢从明,张其德,匡廷云.The effects of cold weather stress on photosystemII in wheatJ.植物学报,1994,36(2):93-98.卢从明,张其德.水分胁迫对小麦叶绿体激发能分配和光系统II原初光 能转换效率的影响J.生物物理学报.赵旭;不同基因型冬小麦对Na+、K+的吸收与累积规律及其耐盐性研究 D;西北农林科技大学;2006年4 郑丽锦,张学英,葛会波,张洁,李青云;果树盐胁迫生理生化特性的研究 进展J;河北农业大学学报;2003年S1期5 曹卫星;国外小麦生长模拟研究的进展J;南京农业大学学报;1995年 01 期刘玲,杨双春,张洪林;Hg(2+)胁迫下玉米生理生态变化的研究J;生态 环境;2004年02期

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