脱氢酶活性检测方法

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1、活性污泥脱氢酶活性的测定一实验目的了解活性污泥脱氢酶活性的测定原理及方法二实验原理活性污泥法对于有机物的降解，实质上是微生物经过一系列的酶的催化作用下的生物氧化还 原反应。参加生物氧化的重要酶为氧化酶和脱氢酶二大类，其中脱氢酶类尤为重要。其中脱 氢酶能使氧化有机物的氢原子活化并传递给特定的受氢体实现石油烃的氧化和转化。如果脱 氢酶活化的氢原子被人为受氢体接受，就可以通过直接测定人为受氢体浓度的变化间接测定 脱氢酶的活性，表征生物降解过程中微生物的活性。因此，脱氢酶的活性可以反应处理体系 内活性微生物量以及其对有机物的降解活性，以评价降解性能。脱氢酶活性测定方法有 MB.2H定性分析法和TTC比

2、色法，目前用得较多的为氯化三苯基四氮唑TTC）比色法。利 用TTC作为人为受氢体，其还原反应方程式如下：T匸NC 已 + 昭N-N-C,H5冲下齐厂+ HCIN=NCeH5N=NG.H.无色的TTC受氢后变成红色的TF（三苯基甲月替），根据红色的深浅，测出相应的光密度（OD 值）而计算的生成量出脱氢酶的活性三实验设备及药1紫外可见光分光光度计、分析天平、50mL棕色容量瓶、50mL三角瓶、比色 24mg/mL溶液取400m&iTC235i氯化三苯基唑析纯和2&葡萄糖 （01mo/L分析纯溶于少量蒸馏水中再稀释到20sL的容量瓶中贮存于棕色瓶中周 更换一次3. Tris-HCl缓冲液（pH=8.4）:称取6.037g Tris（三羟甲基氨基甲烷，分析纯）,再加入20ml lmol/1 的盐酸再容至40%硫化钠取10gNa2S析纯容到100mL的容量瓶中5无氧水36亚硫酸钠定容到i00ml量瓶中四实验步1 标准曲线的绘制