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1、核酶的发现与基本内容什么是核酶核酶(ribozyme)是具有催化功能的RNA分子，是生物催化剂，可降解特异的mRNA 序列。核酶又称核酸类酶、酶RNA、核酶类酶RNA。与蛋白质酶相比，核酶的催 化效率较低，是一种较为原始的催化酶。核酶的发现1981年，Thomas Cech和他的同事在研究四膜虫的26S rRNA前体加工去除基因 内含子时获得一个惊奇的发现：内含子的切除反应发生在仅含有核苷酸和纯化 的26S rRNA前体而不含有任何蛋白质催化剂的溶液中，可能的解释只能是:内含 子切除是由26S rRNA前体自身催化的，而不是蛋白质。为了证明这一发现，他们将编码26S rRNA前体DNA克隆到细
2、菌中并且在无细胞 系统中转录成26S rRNA前体分子。结果发现这种人工制备的26S rRNA前体分子 在没有任何蛋白质催化剂存在的情况下，切除了前体分子中的内含子。这种现象 称为自我剪接(self-splicing),这是人类第一次发现RNA具有催化化学反应的活性， 具有这种催化活性的RNA称为核酶。这一发现之后不久，在酵母和真菌的线粒体mRNA和tRNA前体加工、叶绿体的 tRNA和rRNA前体加工、某些细菌病毒的mRNA前体加工中都发现了自我剪接 现象。Thomas Cech和S.Altman因发现了核酶而获得1989年诺贝尔化学奖。(内含子：断裂基因的非编码区，可被转录，但在mRNA加
3、工过程中被剪切掉。 前体：修饰加工前，刚刚转录出来的 RNA)核酶的特点核酶的功能很多，有的能够切割RNA，有的能够切割DNA，有的还具有RNA连 接酶、磷酸酶等活性。与蛋白质酶相比，核酶的催化效率较低，是一种较为原始 的催化酶。大多数核酶通过催化转磷酸酯和磷酸二酯键水解反应参与 RNA 自身剪切、加工 过程。与一般的反义RNA相比,核酶具有较稳定的空间结构，不易受到RNA酶的攻击。 更重要的是，核酶在切断mRNA后，又可从杂交链上解脱下来，重新结合和切割 其他的mRNA分子。（反义RNA:与mRNA互补的RNA分子。由于核糖体不能翻 译双链的RNA，所以反义RNA与mRNA特异性的互补结合，
4、抑制了该mRNA的 翻译。）核酶的作用水解作用，即磷酸二酯酶作用 磷酸转移作用，类似磷酸转移酶作用（催化磷酸基团由供体转移到接纳体）。 脱磷酸作用，即酸性磷酸酶作用（在酸性条件下催化磷酸单酯水解生成无机磷酸）RNA 内切反应，即 RNA 限制性内切酶作用。核酸内切酶可以催化水解多核苷酸 内部的磷酸二酯键。有些核酸内切酶仅水解5磷酸二酯键，把磷酸基团留在3Z 位置上，称为5 -内切酶;而有些仅水解3 -磷酸二酯键，把磷酸基团留在5 位置上，称为 3 -内切酶。能专一性地识别并水解双链 DNA 上的特异核苷酸顺 序，称为限制性核酸内切酶（restriction endonuclease，简称限制酶）。当外源DNA 侵入细菌后，限制性内切酶可将其水解切成片段，从而限制了外源 DNA 在细菌 细胞内的表达，而细菌本身的 DNA 由于在该特异核苷酸顺序处被甲基化酶修。 饰，不被水解，从而得到保护。限制性核酸内切酶可被分成三种类型。I型和III 型限制酶水解DNA需要消耗ATP，全酶中的部分亚基有通过在特殊碱基上补加甲 基基团对DNA进行化学修饰的活性。II型限制酶水解DNA不需要ATP也不以甲 基化或其它方式修饰DNA，能在所识别的特殊核苷酸顺序内或附近切割DNA。 因此，被广泛用于DNA分子克隆和序列测定
核酶的发现与基本内容
