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1、第十九章平面色谱法第十九章平面色谱法在平面上进行分离的一种色谱方法在平面上进行分离的一种色谱方法。纸色谱法纸色谱法 薄层色谱法薄层色谱法第一节平面色谱法的分类和原理第一节平面色谱法的分类和原理1.1.分类分类薄层色谱法：薄层色谱法：吸附薄层色谱法吸附薄层色谱法分配薄层色谱法分配薄层色谱法纸色谱法纸色谱法薄层电泳法薄层电泳法定性参数定性参数l比移值比移值Rf=L/L0 （01）Rf=1（固定相不吸附组分）（固定相不吸附组分）Rf=0，在原点不动，在原点不动 一般：一般：0.20.8 0.30.5最佳最佳2.有关参数有关参数l相对比移值（相对比移值（Rr)Rr=Rf(i)/Rf(s)=L(i)/L
2、(s)Rr值可以大于值可以大于1，也可以小于，也可以小于1。重现性比重现性比Rf值好（有值好（有参考物质）参考物质）相平衡参数相平衡参数 分配系数分配系数K=Cs/Cm 容量因子容量因子 k=C sVs/CmVm K、k与与Rf值的关系：值的关系：fRLLtLtLuvR00/kR11fms/11VKVff1RRkkR11保留比K或或K大组分，比移值小大组分，比移值小第二节薄层色谱法（第二节薄层色谱法（TLC)1.1.操作过程操作过程 制板制板-活化活化-点样点样-展开展开-显色显色-定性定量定性定量 2.吸附薄层色谱法吸附薄层色谱法原理：固定相对组分有吸附作用原理：固定相对组分有吸附作用极性强
3、的组分极性强的组分K大，大，Rf值小；极性值小；极性弱的组分弱的组分吸附剂吸附剂硅胶硅胶（1）含硅醇基，呈弱酸性）含硅醇基，呈弱酸性（2）原理：硅醇基）原理：硅醇基(吸附中心吸附中心)与极性基团形与极性基团形成氢键成氢键（3）应用：分离酸性和中性物质）应用：分离酸性和中性物质（4）活度：含水量高，活性级高，活度低活度：含水量高，活性级高，活度低（5）活化：加热至）活化：加热至100左右，除去吸附水左右，除去吸附水提高活度提高活度（6）常用硅胶：）常用硅胶：硅胶硅胶H，不含黏合剂，不含黏合剂 硅胶硅胶G，含煅石膏，含煅石膏 硅胶硅胶GF254 含煅石膏和一种无机荧光剂，含煅石膏和一种无机荧光剂，
4、氧化铝氧化铝（1）活度也与含水量有关）活度也与含水量有关（2）有碱性、中性、酸性氧化铝）有碱性、中性、酸性氧化铝（3）同硅胶，分为）同硅胶，分为-级 活性高活性高-低低 吸附色谱展开剂吸附色谱展开剂(流动相流动相)极性强的溶剂洗脱能力强极性强的溶剂洗脱能力强常用溶剂的极性强弱顺序：常用溶剂的极性强弱顺序：水酸吡啶甲醇乙醇正丙醇水酸吡啶甲醇乙醇正丙醇丙酮乙酸乙酯乙醚氯仿二氯甲烷丙酮乙酸乙酯乙醚氯仿二氯甲烷甲苯苯三氯乙烷四氯化碳甲苯苯三氯乙烷四氯化碳环己烷环己烷石油醚石油醚 展开剂展开剂选择原则：选择原则：根据被分离物质的极性根据被分离物质的极性 极性物质极性物质活度低（活性级大）的吸附活度低（活
5、性级大）的吸附剂剂-极性展开剂极性展开剂 看教材图看教材图19-3混合溶剂作展开剂混合溶剂作展开剂先用单一溶剂展开，先用单一溶剂展开，若若R Rf f值太小，则加入一定量极性强的溶剂，值太小，则加入一定量极性强的溶剂，如乙醇、丙酮等，如乙醇、丙酮等，如果如果R Rf f值太大，则加入适量极性弱的溶剂值太大，则加入适量极性弱的溶剂(如如环己烷、石油醚等环己烷、石油醚等)，以降低极性。，以降低极性。可加入一定比例的酸或碱可加入一定比例的酸或碱,使斑点集中。使斑点集中。3.分配薄层色谱法分配薄层色谱法原理：多次分配的过程，分配系数原理：多次分配的过程，分配系数（溶解度）不等是实现分离前提（溶解度）不
6、等是实现分离前提分类：分类：正相色谱、反相色谱正相色谱、反相色谱 正相色谱正相色谱：水为固定相（硅胶载体），有机溶剂：水为固定相（硅胶载体），有机溶剂为流动相（硅胶含为流动相（硅胶含17%水时，为分配色谱）水时，为分配色谱）极性强的组分极性强的组分K大，大，Rf值小。值小。反相色谱反相色谱：烷基化学键合相为固定相，水有机：烷基化学键合相为固定相，水有机溶剂为流动相。极性强的组分溶剂为流动相。极性强的组分K小，小，Rf值大。值大。4.定性和定量分析定性和定量分析 定性分析定性分析 比较比较Rf值值 定量分析定量分析洗脱法洗脱法直接定量法直接定量法目视比较法目视比较法薄层扫描法薄层扫描法第三节纸色
7、谱法第三节纸色谱法一、分离原理一、分离原理 纸纤维为载体，吸着在上面水为固定相纸纤维为载体，吸着在上面水为固定相 属于正相分配色谱属于正相分配色谱 极性或亲水性强的组分，极性或亲水性强的组分，K K大，大，R Rf f值小，值小，反之反之。二、纸色谱法的实验条件二、纸色谱法的实验条件1.色谱纸的选择色谱纸的选择 对对Rf值相差很小的化合物，宜采用慢速滤纸值相差很小的化合物，宜采用慢速滤纸 对对Rf值相差较大的化合物，则可用快速滤纸值相差较大的化合物，则可用快速滤纸2.固定相固定相 水水或甲酰胺、二甲基甲酰胺、丙二醇或缓或甲酰胺、二甲基甲酰胺、丙二醇或缓冲溶液。（酸、碱）冲溶液。（酸、碱）3.3.展开剂的选择展开剂的选择增加展开剂中极性，增大增加展开剂中极性，增大Rf值；增加展开剂非极性，减小值；增加展开剂非极性，减小Rf值。值。常用的展开剂常用的展开剂水饱和的有机溶剂，如水水饱和的有机溶剂，如水饱和的正丁醇、正戊醇、酚等饱和的正丁醇、正戊醇、酚等4.操作步骤操作步骤 点样、展开、显色、定性定量分点样、展开、显色、定性定量分析析
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