徒手切片的制作
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1、徒手切片的制作徒手切片的制作 w徒手切片法是指手拿刀片把植物新鲜材料切成薄片,所作的切片通常不经染色或经简单染色后,制成临时的水装片用于观察,亦可以通过脱水与染色制成永久制片。w优点:简单、方便;不需要复杂设备;不经化学药物处理,基本上保留了植物活体的状态。w用光学显微镜观察的样品必须是透明的薄片,因此待观察的植物材料只有被切成很薄的切片后,才能在显微镜下观察。显微镜的制片分永久制片和临时制片,永久制片的制作方法和步骤比较复杂,有兴趣者可查阅有关植物制片技术的书籍,在植物学实验教学过程中,指导教师已预先准备了所需用的永久制片。在教学过程中,要求同学做的主要是临时制片。w临时制片种类很多,包括涂
2、片、压片等等 w作徒手切片不需要复杂的设备,只需要一把锋利的剃刀或双面刀片就可以进行,方法简单,而且易于保持细胞的生活状态。徒手切片法所作的切片通常不经染色或经简易染色后,封藏于水中即可观察。用剃刀切片,材料不能太大,一般以表面不超过3-5mm为宜。切片最要紧的是平而薄,无需很完整,比如茎的横切面,无需切片整圆形,只需一角就够了。所有切片前的准备工作,如截取材料、削平切面,都应使用解剖刀或用过的刀片,不可用剃刀,以保持剃刀的锋利。操作过程w为了成功切片,应掌握正确的用刀方法。w一般用左手的大拇指、食指和中指3个手指拿住材料,使材料略突出在指尖之上,避免切片时割伤手指;用右手平稳地拿住刀片,把刀
3、口放在经解剖刀削平的材料平面中间,轻轻地压住它,以均匀的动作,从刀片刀口下方起,斜着向后拉切。切时用臂力而不是腕力,且不必太用力,否则就不易切薄。在切的过程中,决不能以刀片直接挤压材料,或以刀片来回拉割材料,并且要始终保持材料与刀片在水平状态,否则会由于切面偏斜而影响观察。w切下的切片应该薄而透明,形状则不要求非常完整,可以用刀不同的部位一次作几个切片,然后用蘸水的毛笔取下切片,置于盛水的培养皿中。w有些较柔嫩的器官,例如幼叶,难以直接拿住进行切片,因而需借助一些维持物,一般用胡萝卜根或土豆块茎作为维持物,把要切的材料夹于其中,进行切片,以利于把握操作。w将切下的薄片放在载玻片上时,要先在玻片中央加一滴水,把材料放到水滴中,然后用镊子夹住盖玻片,将盖片的一侧先接触到载玻片中央的水滴,然后用镊子顶住盖片的另一侧,慢慢放下,使盖玻片与载玻片之间充满水,如有气泡,要掀起盖片,重新放置。w徒手制作的切片可以直接在光镜下观察,也可以经过简易的组织化学染色,以使结构看得更清楚,同时可观察到细胞各部分的化学成分。w常用的染料有:0.1亚甲基蓝、0.51中性红或1番红水溶液等。w染色的方法是将切片放在载玻片上后,用吸水纸吸去多余的水分,滴上一滴染料,经过12min后,用水冲洗一下,盖上盖玻片,在显微镜下观察。
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