人类体细胞染色体组型分析
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1、人类体细胞染色体组型分析【实验目的】掌握人类体细胞染色体组型分析的方法。【实验原理】核型(karyotype)是指一个细胞内的整套染色体按照一定的顺序排列起来所构成的图像。通常是将显微摄影得到的染色体照片剪贴而成。正常细胞的核型能代表个体的核型。组型(idiogram)是以模式图的方式表示,它是通过对许多细胞染色体的测量取其平均值绘制而成的,是理想的,模式化的染色体组成。代表了一物种染色体组型的特征。核型的研究对人类医学遗传研究及临床应用,对探讨动植物起源、物种间亲缘关系,鉴定远缘杂种等方面都有重大意义。染色体的特征以有丝分裂中期最为显著,所以一般都分析中期分裂相。根据染色体着丝粒位置的不同,
2、可将染色体分为中部着丝粒染色体(m),亚中部着丝粒染色体(sm),亚端部着丝粒染色体(st),端部着丝粒染色体(t)。对任何一个染色体的基本形态学特征来说,重要的参数有三个:1. 相对长度(relativelength),指单个染色体长度与包括X(或Y)染色体在内的单倍染色体总长之比,以百分率表示。每个染色体的长度相对长度二每个染色体的长度/单倍染色体+X染色体总长度X100臂指数(amindex):指长臂同短臂的比率,即臂指数=长臂长度/短臂长度按Levan(1964)的划分标准:臂指数在1.01.7之间称中部着丝粒染色体(m);臂指数在1.73.0之间称亚中部着丝粒染色体(sm);臂指数在
3、3.07.0之间称亚端部着丝粒染色体(st);臂指数7.0者为端部着丝粒染色体(t)。3.着丝粒指数(centromereindex),指短臂占该染色体长度的比率,它决定着丝粒的相对位置。着丝粒指数二短臂长度/该染色体总长X100按Levan(1964)的标准划分:着丝粒指数在50.037.5之间称中部着丝粒染色体(m);指数在37.525.0之间称亚中部着丝粒染色体(sm);指数在25.012.5之间称亚端部着丝粒染色体(st);指数在12.50.0之间称端部着丝粒染色体(t)。人类体细胞的正常核型是含有46条染色体,相互构成23对。其中22对是男女所共有的常染色体,一对为男女所不同的性染色
4、体,男XY,女XX。根据丹佛(1960)、伦敦(1963)和芝加哥(1966)会议提出的标准,即按照染色体的长度依次减小和着丝粒位置以及其它特征,把人类体细胞染色体分为七个组群,各自特征简括于下表。表人类染色体组型群组号染色体号形态大小着丝粒位置随体次缢痕鉴别程度A1-3最大m无常见1号可鉴定B4-5次大sm无不易C6-12+X中等sm无常见9号难鉴定D13-15中等st有偶见13号难鉴定E16-18较小16m,17和18sm无常见16号可鉴定F19-20小m无不易G21-22+Y最小st有、Y无难鉴定【实验仪器、材料和试剂】(一)仪器、用具摄影显微镜、胶卷、冲印放大器材、剪刀、镊子、毫米尺、胶水(二)材料人类体细胞染色体标本【方法与步骤】1在显微镜下找出染色体分散良好、长度适中、姊妹染色单体清楚的中期分裂相进行显微拍摄。2将显微拍摄放大好的照片上的一个细胞的全部染色体,分别一条一条剪下。3根据染色体的长短和形态特征进行同源染色体的目测配对。4测量出每条染色体短臂和长臂长度,计算出各条染色体的相对长度、着丝粒指数、臂指数,并记录原始数据。5根据测量数据校正目测配对排列的结果,进行调整排列。6.把染色体按一定顺序一对一对地排列,排列时注意短臂向上,长臂向下,性染色体单独排列,最后把染色体贴成一完整的染色体组型图。7翻拍。
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