培养细胞一代生存期

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1、培养细胞一代生存期培养细胞一代生存期培养细胞一代生存期 lag phase(12-24H)exponential phase(3-5D)plateau phase细胞生长过程中的重要现象接触抑制：接触抑制：由于细胞的相互接触而抑制细胞运动密度抑制：密度抑制：细胞因营养的枯竭和代谢物的影响而停止生长 实验室保存的部分细胞系实验室保存的部分细胞系HeLa (cervical cancer)HEK 293 (human embryonic kidney)CHO (Chinese hamster ovary)NIH 3T3 (mouse embryonic fibroblast)COS-7 (Afri

2、can Green Monkey Kidney Cells)(mouse dendritic cells)Tca8113 (human tongue squamous carcinoma cells)Cal-27 (human tongue squamous carcinoma cells)CCTCCCCTCC培养细胞的体外生长环境无污染环境基质气体环境和氢离子浓度液相环境温度渗透压 无污染环境：无污染环境：高压蒸汽消毒器电热干燥箱滤器超净工作台紫外灯 基质：基质：玻璃基质塑料饲养细胞，又称滋养细胞生物性基质处理培养表面金属 气体环境和氢离子浓度气体环境和氢离子浓度 ：5%二氧化碳 95%空气 pH为7.4 温度维持（）液相环境：液相环境：水：新鲜配置的三蒸水或去离子水平衡盐液：Hanks液、PBS、Earle液等天然培养基 合成培养基 无血清培养基 DMEMFBSPBS二、细胞培养的基本方法Fundamental methods of cell culture注意无菌操作(Sterile)对实验中可能用到的器具及培养用液进行严格消毒灭菌 培养室的消毒：培养室和超净台要用紫外灯和酒精严格消毒培养过程中要注意无菌操作ABA 超净工作台中的实验用品要摆放整齐B 实验前75%酒精喷洗双手无菌操作技术移液操作基本培养操作技术培养细胞的取材与分离 体外培养细胞的纯化 细胞的冻存与复苏