热力灭菌时最可靠而普遍应用的灭菌法
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1、热力灭菌时最可靠而普遍应用的灭菌法,包括湿热灭菌和干热灭菌法。1. 湿热灭菌法在同样的温度下,温热的杀菌效果比干热好,其原因有:蛋白质凝固所需的温度与其含水 量有关,含水量愈大,发生凝固所需的温度愈低。湿热灭菌的菌体蛋白质吸收水分,因较大 同一温度的干热空气中易于凝固。温热灭菌过程中蒸气放出大量潜热,加速提高湿度。因 而湿热灭菌比干热所要温度低,如在同一温度下,则湿热灭菌所需时间比干热短。湿热的 穿透力比干热大,使深部也能达到灭菌温度,故湿热比干热收效好。湿热灭菌法包括有:(1) 煮沸法:煮沸100C, 5分钟,能杀死一般细菌的繁殖体。许多芽胞需经煮潮56小 时才死亡。水中加入2%碳酸钠,可提
2、高其沸点达105C。既可促进芽胞的杀灭,又能防止金 属器皿生锈。煮沸法可用于饮水和一般器械(刀剪、注射器等)的消毒。(2) 流通蒸汽灭菌法:利用100C左右的水蒸汽进行消毒,一般采用流通蒸汽灭菌器(其 原理相当于我国的蒸笼),加热15到39分钟,可杀死细菌繁殖体。消毒物品的包装不宜过 大、过紧以利于蒸汽穿透。(3) 间歇灭菌法:利用反复多次的流通蒸汽,以达到灭菌的目的。一般用流通蒸汽灭菌器, 100C加热1530分钟,可杀死其中的繁殖体;但芽胞尚有残存。取出后放37C孵箱过夜, 使芽胞发育成繁殖体,次日再蒸一次,如此连续三次以上。本法适用于不耐高温的营养物(如 血清培养基)的灭菌。(4) 巴氏
3、消毒法(Pasteurization):利用热力杀死液体中的病原菌或一般的杂菌,同时 不致严重损害其质量的消耗方法。由巴斯德创用以消毒酒精类,故名。加温61.162.8C 半小时,或71.7C1530秒钟。常用于消毒牛奶和酒类等。(5) 高压蒸汽灭菌法:压力蒸汽灭菌是在专门的压力蒸汽灭菌器中进行的,是热力灭菌中 使用最普遍、效果最可靠的一种方法。其优点是穿透力强,灭菌效果可靠,能杀灭所有微生 物。目前使用的压力灭菌器可分为两类:下排气式压力灭菌器和预真空压力灭菌器。适用于耐高温、耐水物品的灭菌。2. 干热灭菌法干热灭菌比湿热灭菌需要更高的温度与较长的时间。(1) 干烤:利用干烤箱,加热1601
4、80C2小时,可杀死一切微生物,包括芽胞菌。主要 用于玻璃器皿、瓷器等的灭菌。(2) 烧灼和焚烧:烧灼是直接用火焰杀死微生物,适用于微生物实验室的接种针等不怕热 的金属器材的灭菌。焚烧是彻底的消毒方法,但只限于处理废弃的污染物品,如无用的衣物、 纸张、垃圾等。焚烧应在专用的焚烧炉内进行。(3) 红外线:红外线辐射是一种0.771000微米波长的电磁波,有较好的热效应,尤以1 10微米波长的热效应最强。亦被认为一种干热灭菌。红外线由红外线灯泡产生不需要经空 气传导,所以加热速度快,但热效应只能在照射到的表面产生,因此不能使一个物体的前后 左右均匀加热。红外线的杀菌作用与干热相似,利用红外线烤箱灭
5、菌的所需温度和时间亦同 于干烤。多用于医疗器械的灭菌。人受红外线照射较长会感觉眼睛疲劳及头疼;长期照射会造成眼内损伤。因此,工作人至少 应戴能防红外线伤害的防护镜。(4) 微波:微波是一种波长为1毫米到1米左右的电磁波,频率较高,可穿透玻璃、塑料 薄膜与陶瓷等物质,但不能穿透金属表面。微波能使介质内杂乱无章的极性分子在微波场的 作用下,按波的频率往返运动,互相冲撞和磨擦而产生热,介质的温度可随之升高,因而在 较低的温度下能起到消毒作用。一般认为其杀菌机理除热效应以外,还有电磁共振效应,场 致力效应等的作用。消毒中常用的微波有2450MHZ与915MHZ两种。微波照射多用于食品加 工。在医院中可用于检验室用品、非金属器械、无菌病室的食品食具、药杯及其它用品的消 毒。微波长期照射可引起眼睛的晶状混浊、睾丸损伤和神经功能紊乱等全身性反应,因此必须关 好门后才开始操作。
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