离体家兔肠肌运动

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1、家兔离体肠肌活动的影响实验周瑶瑶(浙江中医药大学滨江学院 2009临床医学3 班,20092270126)【摘要】目的 研究0.01%乙酰胆碱(Ach)、0.01%肾上腺素(E)、1NHC1、INNaOH溶液 25C台氏液及缺氧等条件对家兔离体肠肌运动的影响。方法 制备家兔离体小肠平滑肌标本, 放置于灌流浴槽中,生物信号采集处理系统记录在不同因素作用下张力曲线。 结果 滴加 0.01%乙酰胆碱(Ach)、INNaOH溶液后,肠肌运动张力和频率都增大;滴加0.01%肾上腺 素(E)、1NHC1、肠肌运动张力和频率迅速降低;25C台氏液刺激离体肠肌时,肠肌运动张 力和频率先迅速下降后逐渐增大;停止

2、通氧后,肠肌运动张力和频率逐渐降低。结论 0.01% 乙酰胆碱(Ach)、1NNaOH溶液刺激能促进肠肌运动,0.01%肾上腺素(E)、1NHC1能抑 制肠肌运动,短时低温能使肠肌运动稍降后又加强直至正常,缺氧使肠肌运动减弱。 关键词:Hcl、NaoH、离体肠肌、乙酰胆碱、肾上腺素Rabbit intestinal muscle activity from the body of theimpact experimentZhou yao-yao(zhejiang university of traditional Chinese medicine binjiang college class

3、3, 2009clinical medicine 20092270126)Abstract : objective Research 0.01% acetylcholine (Ach), 0.01% epinephrine (E), 1NHCl, 1NNaOH solution C Taiwans fluid and 25 of rabbit oxygen from the body condition such as the influence of intestinal muscle movement. Methods Preparation vitro intestinal smooth

4、 muscle specimens rabbit, placed in the perfusion bath slot biological signal acquisition and processing system records in different factors under the role of tension curve. Results Drops of add 0.01% acetylcholine (Ach), 1NNaOH solution intestinal muscle movement, tension and frequency increases; D

5、rops of add adrenaline 0.01% (E), 1NHCl, intestinal muscle movement tension and frequency rapidly reduces; 25 C Taiwans fluid from the body when the stimulus, intestinal muscle tension and frequency of intestinal muscle movement first fell rapidly after gradually increases; Stop after the intestinal

6、 muscle movement, oxygen tension and frequency gradually reduced. Conclusion 0.01% acetylcholine (Ach), 1NNaOH solution stimulation can promote intestinal muscle movement, 0.01% epinephrine (E), 1NHCl can restrain bowel muscle movement, short-term low temperature can make after lower intestinal musc

7、le movement, and strengthen until normal oxygen made intestinal muscle motion decreases.Keywords Hydrochloric acid;Sodium hydroxide;Isolated small intestine; acetylcholine; adrenaline消化道平滑肌与骨骼肌、心肌一样具有肌肉组织共有的特性。但消化道平滑肌兴奋性较 低,收缩缓慢,富有伸展性,具有紧张性、自动节律性,对化学、温度和机械张力刺激较为 敏感。给予离体肠肌以接近在体情况的适宜环境,消化道平滑肌可保持良好的生理特

8、性。1 材料家兔,麦氏浴槽、超级恒温器、张力换能器、铁支架、电脑、木锤、止血钳、手术刀、20ml注射器、手术剪、持针器、手术圆针、缝线、烧杯、手术盘、搪瓷碗等。蒂罗德液(即台氏液:)0.8%NaCl、 0.02%KCl、 0.026%MgSO477H2O、 0.0065%NaH2PO4、 0.02%CaCl2、 0.1%NaHCO3、I /I0.1%葡萄糖溶液。1:10 000 肾上腺素、 1:10 000 乙酰胆碱、 1NHCl、 1NNaOH 溶液。2 方法2.1将台氏液快速充满空气小泡后,分成两份,一份置于25C恒温水浴中,使其温度保持在 25C;另一份放放入恒温水泵中的不锈钢槽内预热至

9、3738 C。按下图安装实验装置,并进行以下操作:恒温离体小 肠灌流装置内槽排 水阀门处槽为. 蒸谓水 小肠段 空气泡力微调器祎住气流量调节被加温的台氏液 被加温的口来水 被加温的蒸憎水张力换能器实验装置示意图 打开恒温水泵,加热台氏液。 打开空气泵,调试恒温离体小肠灌流装置内槽台氏液中的气流速度。 打开电脑,点击生物信号采集处理系统图标,显示生物信号采集处理系统窗口。选择 菜单“实验/常用生理学实验”, “离体小肠平滑肌运动”。并将张力换能器输出线连接到 已确定作为记录张力的通道。2.2 离体小肠段的制备 准备两个小手术盘,一个小手术盘用于清洗肠内容物,另一小手术盘盛预冷台氏液 倒入中,其液

10、体量已淹过小肠段为准。 用持针器夹持手术圆针、穿线备用。 取家兔一只,将其倒提,用木锤猛击后脑勺,使之昏迷,迅速进行以下操作:将其仰卧位固定,用手术剪从剑突下沿腹白线向耻骨联合方向剪开皮肤约5cm长,打 开腹壁,暴露腹腔,顺着胃找到与胃相连的十二指肠,沿十二指肠向空肠的方向取出 小肠段约30cm,放入一小手术盘中,用注射器抽取预冷台氏液冲洗肠内容物,直至冲 洗干净为止。将干净的小肠段放入另一盛有预冷台氏液的小手术盘中,用手术刀刮去 肠管外的血管和系膜,将小肠段切割成小段,每小段肠约2cm长,并在小段肠的两端、 距断端约 1mm 处各穿约 30cm 长的线,注意在操作过程中,每 10 分钟换一次

11、预冷台 氏液。2.3 安装离体肠段,具体操作是: 取出固定架,将肠段的下端的线头尽量靠近固定架的小钩,并牢固地绑紧在小钩上, 将固定架放回内槽,小钩尽量靠近槽底,重新用张力微调器固定固定架,将空气泵重 新连接至固定架,并通过固定架将空气输入内槽的台氏液中。 将肠段的上端的线头与张力换能器的应变梁连接, 用张力微调器缓慢升降拉线,保持 线有一定紧张度,肠段、线应与地平面垂直,同时,肠段及上端的线头不得碰及槽壁 和固定架。 换液:打开灌流槽的内槽排水阀门,排去原来的台氏液,用注射器从恒温水泵的小烧 杯中抽取被加温的台氏液放入灌流槽的内槽中,其每次用量以淹过肠段的量为准。调节位于固定架尾部的空气流量

12、调节旋钮,使气泡即细小、均匀,又不影响肠段的运动。3 实验观察3.1记录一段小肠平滑肌收缩活动曲线,观察其收缩活动的特点。向台氏液中加入IN HC1盐 酸2 滴,观察小肠收缩活动的改变.反应稳定后冲洗2遍。3.2记录一段小肠平滑肌收缩活动曲线,向台氏液中加入INNaOH 2滴,观察小肠收缩活动 的改变.反应稳定后冲洗2遍。3.3肠活动恢复后,将原37C38C台氏液换成等量的25C台氏液,观察肠活动的改变,待 其活动改变明显时,冲洗1遍,再加入等量的37C38C的台氏液。3.4 肠活动恢复后,向台氏液中加入1:10 000肾上腺素2滴,观察小肠活动的改变, 待反应 稳定后冲洗2遍,再加入等量的3

13、7C38C的台氏液。3.5 肠活动恢复后,向台氏液中加入1:10 000乙酰胆碱2滴,观察小肠收缩活动的改变, 待 反应稳定后冲洗2遍。3.6. 待肠活动恢复后,停止空气泵的工作,观察肠活动的改变,待其收缩活动改变明显时反 应稳定后冲洗1遍,再加入等量的37 C38 C的台氏液,空气泵描记一段肠段收缩活 动恢复曲线后终止实验。4 结果4.1 加入 1NHCl 后,肠段张力曲线和频率先下降,后张力曲线增强,频率加快。4.2加入INNaOH后,肠段张力曲线迅速上升,频率加快。4.3在25C台氏液中,离体肠肌张力曲线和频率先迅速下降,后逐渐增大。 4.4加入0.01%乙酰胆碱后,离体肠肌张力曲线明显

14、上升,频率加快。 4.5加入0.01%肾上腺素后,离体肠肌张力曲线下降,频率减慢。 4.6缺氧状况下,张力曲线下降,频率减慢。5 讨论5.1加入Hcl后,细胞外H+升高,Ca2+通道活性受抑制,使得Ca2+内流减少;H+升 高能干扰肌肉的代谢和肌丝滑行的生化过程;盐酸具有促进小肠的分解和吸收的作用, 小肠内酸性环境有助于上段小肠的运动,有利于食物的消化和吸收。盐酸对十二指肠的自 发收缩活动有增强效应。(1)5.2加入1NNaOH后,氢氧化钠为碱性成分,是由胰腺小导管细胞所分泌,可起到中和胃 酸的作用,为小肠内多种消化酶提供适宜 pH 环境,有利于小肠各种消化酶发挥作用。 同时氢氧化钠对离体小肠

15、平滑肌收缩活动有抑制效应,推测这可能有利于食物在小肠内的 停留,以便于营养物质的吸收。(2)5.3 温度改变对平滑肌运动的影响很大,低温使平滑肌处于休眠状态,为可逆性变化。(3) 25C台氏液中的离体肠肌,低温影响了各种酶的活性,特别是有氧呼吸运动相关的 酶类, 使肠肌运动受到限制。由于降温本身对肠管是一种刺激,可短暂地加强代谢活动,肌张力 升高。 (8)5.4 乙酰胆碱是支配平滑肌、肠上皮细胞、一些肠道内分泌细胞和神经突触的主要兴奋 性递质。乙酰胆碱与肌膜上的M受体结合,电位敏感性Ca2+专用通道,此类通道对 乙酰胆碱敏感,小剂量乙酰胆碱即可引起开放。特异性受体活化Ca2+通道,此类通道 对

16、乙酰胆碱不敏感。两类通道的开放都得使肌浆中Ca2+增高,进而激活肌纤蛋白一肌凝 蛋白一ATP系统,是平滑肌收缩,肌张力增加。7)即,乙酰胆碱对十二指肠的影响由剂 量决定,低浓度或少剂量的乙酰胆碱刺激平滑肌上M受体引起基本电节律传布加强,肌 肉收缩频率和强度增强,小肠呈收缩状态(6);乙酰胆碱过量或浓度过高,反而会出现抑 制作用,收缩频率和振幅减少(4),这与大剂量Ach对神经节产生抑制作用有关。(5)5.5肾上腺素作用与a2受体,引起肠肌膜上特异性受体活化,K+外流增多,细胞膜发生超 极化,肠肌兴奋性降低,肌张力下降。同时,肾上腺素还作用于平滑肌上的0受体,引 起肠肌细胞膜中的cAMP合成增多

17、,激活肠肌膜及肌浆网上Ca2+泵活动,使肌浆中Ca2+ 浓度降低,即使肌张力下降。0受体激活后,还促使K+及Ca2+外流增加,加速膜的超 级化,促进了肠肌肌张力的减低。5.6 缺氧后肠肌有痒呼吸运动障碍,产能不足,从而抑制肠肌运动,其张力下降,振幅 减少,频率减慢。6结论0.01%乙酰胆碱(Ach)、NNaOH溶液刺激能促进肠肌运动,0.01%肾上腺素(E)、NHCl、 25C台氏液及缺氧等刺激因素能抑制肠肌运动。7参考文献7.1(1)、(2) 李金华,王国卿,邹容等。盐酸和氢氧化钠对豚鼠各段小肠平滑肌活动 的影响。Chin J Hemorh.2005 15 37.2 (3)、 (4)、 (8

18、)吕锦芳陈燕。不同处理因素对离体兔小肠平滑肌运动的影响。安徽 技术师范学院学报,2002,16(1):17 -227.3 (5)高占国,刘传绩.毒草碱样乙酞胆碱受体功能的分子基础。中国药理通报, 1997,13(4);29一2 2947.4 (6)竺心影.药理学【M】.第二版.北京:人民卫生出版社,1986,50 917. 5 ( 7 ) ElizabethA. H. Beckett,KazuhideHoriguchi,SeanM. Ward. Loss of entericmotor neurotransmission in the gastric fundus of SL/SL(d) mi

19、ce J, Journal of Physiology (2002),543.3.pp.871-887附图(各图说明)名称:日期:2011-04-24一因di零 S/MJ 关归 力O87流HZ联速 抵101直30导快0.5B8g B-J-: 0 g0.197g LLlg: 0.568g3.75g-8T无明显变化关归HZ联速30导快Og-1.87g-3.75g-降曲线增强频率加快段张肠曲线和频率先Cl丿IIIIIIIII张力I1111川|川|后IIIIIIIII川H名称:日期:2011-04-240.385g B4-: 0-037g0. 189g LlgLlg: 0.348gxJ 800Hz10. Os/div1.87g 直疣Hz联速30导快lO.Os/divZoom :0.293g导联关 快速归零名称:日期:0.568g 4-: -0.037g0. 193g LHa: 0.605g10. Os/divl.STg 直疣3.75g-关归Hz联速30导快

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