高效液相色谱仪操作规程

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1、高效液相色谱仪操作规程1 溶剂输送泵操作1.1 安装后的准备1.1.1在烧杯中装入大约100mL异丙醇,在烧杯中放入个吸滤器,将一段 SUS 管的一端连接在泵出口,而另一端放入烧杯中。1.1.2 将排液管的一端连接到排液管接口上,另一端放入废液瓶中。1.1.3 打开电源 ON ,显示初始屏幕。1.1.4 逆时针方向转动排液阀 180 度,打开排液阀。按 purge 键,泵开始运行, 指示灯亮。1.1.5冲洗完毕后,按一次func键,进入流速设定状态,并且设定流速为1mL/min。1.1.6 将排液阀旋钮顺时针方向旋转到底,关闭排液阀。1.1.7 按 pump 键,泵启动,指示灯亮。大约3-5

2、分钟后,再按 pump 键,泵停止运行,指示灯灭,完成操作准备。1.2 运行的检查1.2.1 开始运行前务必确保: 储液瓶中装有流动相, 并且吸滤器已经放入储液瓶中。 排液管的另一端已经放入废液瓶中。1.2.2 将排液阀旋钮逆时 针方向旋转 180 度,打开排液阀。1.2.3 按 CE 键返回到初始屏幕。按 pump 键,泵大约以 1ml/min 的流速运行(指 示灯亮)。1.2.4 观察流动相流出排液管大约 10 秒钟。在此期间,流动相应连续流出并且无 气泡出现。1.2.5 再按 pump 或 purge 键,泵停止运行,指示灯灭。1.3 上面两步完成后仪器进入工作状态。2 紫外 可见检测器

3、操作2.1 按下电源开关,打开仪器,将发生如下情况。2.1.1 显示板上所用光点及指示灯亮。 自动检查内存, 瞬间显示控制程序的版本号。2.1.2预热大约2Osec,仪器的单色器找到其初始位置(大约 1分钟)。2.1.3 (使用氘灯的亮线(656nm )自检波长的准确性(大约 10 sec )。2.1.4 如果没有检查出错误,显示正确信息,几秒钟后,由初始屏幕代替原信息2.1.5如果自检没有错误,屏幕显示正确,此时可以进行操作。这为初始状态,将显示初始屏幕。2.2 设定测定波长2.2.1按CE键。显示初始屏幕,按一下 func键,屏幕显示(设定测量波长)* 波长,参数输入区闪烁,提示使用者输入

4、波长值。2.2.2 输入 2,3,0 并且按 Enter 键。完成设定。2.3 设定测量量程2.3.1 按 CE 键返回到初始屏幕。2.3.2 按两次 func 键,屏幕显示 RANGE (AUFS ) (设定测量量程) 。2.3.3输入0,.,0,1并且按Enter键*按CE键返回到初始屏幕。2.4 上面准备进行完毕后,仪器即进入正常工作状态,进行测量。3 实验操作3.1 先 打开输 液泵,待其稳 定后,打 开放空阀,将 气泡排出 ,仪器稳定工 作后, 打开 紫外 可见检测器开关,停止一段时间,仪器稳定用甲醇流动相冲洗半小时 左右,即可开始实验样品测量。3.2 先将对照品注入高液液相, 待其

5、检测完毕后, 将样品按同 样的方法注入高效液 相,如此复进行 24 次即可。3.3 测量完毕后,再用甲醇流动相冲洗仪器大约 1 小时,如果检测样品流动相中 有盐类则先用含有大量水的甲醇进行冲洗, 再用 纯甲醇冲洗, 冲洗完毕后先关检 测器再关输液泵。4 注意事项4.1 如果排液阀旋转大于 180 度,空气将进入排液管, 最终导致空气进入流动相。4.2 通常情况下,按 pump 或 purge 键,泵以其设定的流速运行。但是,在下列 情况下泵首先以低流速运行(几秒钟), 以检测 泵原始位置, 然后再以 设定的流 速运行。4.2.1 打开电源后,第一次按 pump 或 purge 键。4.2.2 达到 2.2MPa 或更高的上限后,第一次按 pump 或 purge 键。4. 3 如果流动相在流动过程中,随泵的噪声同步重复停止和启动。可能泵头有气 泡,按 purge 键,排除气泡。4.4 如果注射器的针头接到排液管的末端,向外拉注射器的活塞排出流动相。4.5 不使用排液阀时,请关闭。如果保持长期打开状态,由于大气压力会使流动 相从排液阀出口处流出。

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