丹参酒综述

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1、丹参酒的开发与研究丹参酒中有效成分的提取与检测指导老师：夏道宗 合作导师：蒋丽勤（浙江中医药大学药学院，杭州，浙江 310053）摘 要：随着中国逐渐步入老龄化社会，以治疗中老年人疾病为目的的保健品的开发越来 越多，对治疗心血管疾病疗效显著的丹参酒市场前景广阔。对丹参酒进行深层的研究与开发， 改善丹参酒的配方，优化丹参酒原料的提取方案，优选有效成分的提取与检测方案。以水煎 煮法提取原料；用HPLC法检测提取液中的丹参酮，以丹参酮的提取率为指标，优选最佳的 有效成分提取方案。关键词：丹参酒；丹参素；丹参酮；有效成分提取；有效成分检测Development and research of Salv

2、ia wineextraction and detection of active ingredients in Salvia wineDirector：Dan-Zong Xia Associate Director：Li-Qing Jiang(Medical College, Zhejiang Chinese Medical University, Hangzhou, China, 310053)Abstract: As China increasingly entered the aging society, development of health care products to t

3、reat diseases of the elderly more and more, Salvia wine treat the cardiovascular disease is efficacy significantly, and market prospect is broad. Conduct deeper research and development of Salvia wine, improve formulations of Salvia wine, optimize the Salvia wine raw materials extracted program, sel

4、ect the best extraction of active ingredients and detection solution. Use water decoction method extract raw materials; detected by HPLC extract of Tanshinone; as an index to extraction rate of Tanshinone choosing the best program to extract the active ingredients.Key Words： Salvia wine; Danshensu;

5、Tanshinone; extract the active ingredients; detection of active ingredients引言现阶段对于丹参酒的研究还是以丹参浸泡制作药酒为主，并没有具体的配 方，而且只有丹参一味中药。虽然也有丹参酒的中药方剂，但是口感并不好，不 能大范围推广。本文将确定一个新的丹参酒的配方,并优选提取液的有效成分提 取方案,然后进行有效成分检测。随着人口老龄化愈演愈烈，对防治冠心病等老 年性疾病的研究越来越重要，所以针对于老年人产品开发前景相当好。1 丹参酒的开发与研究1.1 丹参酒的配方确定1.1.1 丹参酒原料(1) 丹参是一种中药。性味苦，微

6、寒。归心、肝经。有祛瘀止痛，活血通 经，清心除烦之功效(2) 三七：甘微苦，温。功效：止血，散瘀，消肿，定痛。(3) 甘草：味甘平。主五脏六府寒热邪气，坚筋骨，长肌肉，倍力，金创， 解毒。(4) 玉竹：养阴，润燥，除烦，止渴。治热病阴伤，咳嗽烦渴，虚劳发热， 消谷易饥，小便频数。(5) 山楂：酸甘，微温。功效：消食积，散瘀血，驱绦虫:，消食健胃，行 气散瘀。1.1.2丹参酒配方丹参15g三七5g甘草3g山楂5g玉竹3g白酒250g1.2 丹参中丹参酮提取与检测1.2.1 丹参酮提取方案优化有关丹参中丹参酮提取方法通常有： 1超声波提取、加热回流提取和组织破 碎提取；2超临界 CO2 流体萃取。

7、检测方法通常有：高效液相色谱法；3超高效 液相色谱法；紫外法；薄层色谱法。选定方法：以丹参酮IIA和隐丹参酮为指标，用HPLC法分析测定，考察不同 提取方式、不同溶剂对丹参酮提取率的影响, 再进行正交试验，进一步优选提取 条件。1.2.2 仪器与试剂LC-10ATvp色谱泵，旋转蒸发仪,7725i型进样器和SPD-lOAvp紫外检测器， 恒温水浴锅， ANASTER 色谱工作站。试剂：丹参酮IIA和隐丹参酮对照品；双蒸去离子水；将丹参等中药材研磨 粉碎后备用；色谱纯甲醇。1.2.3 方法与结果（1）4对照品溶液制备：精密称定丹参酮II A和隐丹参酮对照品5mg，置 于10ml容量瓶中，用甲醇溶

8、解后，定容至刻度线，摇匀。精密量取该溶液lml, 稀释到10ml作为对照品，放置于冰箱内备用。（2）色谱条件：色谱柱Kromasil C18（150mm*4.6mm,5pm）,流动相：75%甲 醇溶液，流速：1mLmin-1,检测波长：270nm。在此条件下测得药材粉末以及丹 参酮IIA和隐丹参酮对照品的色谱图如图1-1。图 1-1图1-1中药材粉末色谱图（A）和丹参酮IIA和隐丹参酮对照品色谱图（B）1.隐丹参酮2.丹参酮IIA1.2.4 标准曲线绘制：分别配制不同浓度的对照品溶液，在上述条件下测定， 进样量为10pL。以丹参酮IIA和隐丹参酮进样量（X）对峰面积（Y）进行线性 拟合，丹参酮

9、IIA和隐丹参酮回归方程分别为：Y=451.8X-13.5 r=0.9990Y=310.1X-14.2 r=0.9989结果隐丹参酮和丹参酮IIA在23mg2.3憾范围内线性关系良好。1.2.5 提取溶剂选择精密称取药材细粉0.2g，分别加入一定体积的5种不同溶剂（甲醇、乙醇、 80%乙醇、70%乙醇、60%乙醇），超声提取30min。静置12h,过滤，定容至10ml， 离心后过滤,取滤液10憾进行上述检测，分析隐丹参酮和丹参酮IIA含量（表1）。 结果表明：80%乙醇溶液和甲醇溶液作溶剂提取率较高，考虑实际情况，选择80% 乙醇溶液作为提取溶剂。表1溶剂选择实验结果提取溶剂隐丹参酮含量/mg

10、 g-1丹参酮IIA含量/mg g-1乙醇1.461.30甲醇1.471.3560%乙醇1.401.2970%乙醇1.431.3380%乙醇1.511.351.2.6 提取方式选择精密称取药材细粉0.2g,用80%乙醇溶液作为溶剂，分别用4种提取方式提取，过滤，定容至10ml。离心过滤后，吸取滤液10 Ag进行上述检测，分析隐丹 参酮和丹参酮IIA含量（表2）。实验结果表明，回流提取1h和超声提取，提取 率较高。根据实际情况，还是选择回流提取lh表2提取方式选择实验结果提取方法隐丹参酮含量/mg g-1丹参酮IIA含量/mg g-1放置过夜1.201.00回流提取1h1.351.222h1.3

11、21.223h1.301.20索式提取1.351.30超声提取30min1.311.2960min1.401.2590min1.401.291.2.7 正交实验用80%乙醇回流进行实验，取药材细粉20g，采用正交实验法对回流时间， 回流次数，提取溶剂量进行研究（表 3。将提取液定容， 7用高效液相色谱法测隐丹参酮和丹参酮II A含量，计算提取率（表4）。表3因素水平表水平溶剂量回流次数回流时间/V g-1/n/h1510.5h2621h3731.5h表4正交实验表序号因素隐丹参酮含量丹参酮II A含量ABC/mg g-1/mg g-111110.8880.76821221.3901.33431

12、331.4001.44742120.9450.92052231.5811.50162311.4991.39273131.3691.30283211.4861.42593321.4641.3711.2.8 正交实验结果分析8隐丹参酮和丹参酮IIA提取率为指标，将表4进行方差分析，即用7倍量 80%乙醇回流2次，每次2h，提取效果最佳。2 讨论 通过实验，优化了丹参酒的配方,使其对心血管疾病的效果更显著。实验结 果表明,HPLC法测定丹参酒中丹参酮含量的灵敏度和准确度较高，操作简便。 用甲醇和乙醇作为提取溶剂丹参酮的提取率较高，根据实验室实际情况，选用 80%乙醇溶液作为提取溶剂。通过正交实验确定

13、了最佳回流时间，回流次数，提取溶剂量。结果表明， 10 当提取溶剂量超过 7 倍后，提取量无明显差异，综合考虑，选用 7 倍量进行提取。 而最佳回流时间为2h,回流次数为2次。参考文献1 毕跃峰，贾陆，张小娟，等.不同提取方法对丹参中丹参酮IIA和丹酚酸B含量测定 的影响J.药物分析杂志,2009 (7): 1209-1212.2 苏子仁，葛发欢.应用SFECO2提取丹参脂溶性有效成分工艺研究J.中成药，1998, 20(8): 1-2.3 闫豫君，杨广德.RPHPLC法同时测定丹参中丹参酮IIA和隐丹参酮的含量J.中 草药，2002, 33(4): 363-365.4 杨广德，张继业，张莉，

14、等.丹参中丹参酮IIA和隐丹参酮的提取方法研究J.药物分 析杂志， 2007， 26(12): 1807-1810.5 郭孝武， 沈志刚. 超声提取对丹参药材中脂溶性成分的影响 J. 陕西师范大学学报: 自 然科学版， 2007， 35(3): 48-51.6 胡广林，王小如，黎先春.回流提取过程中丹参酮的热降解行为研究J.天然产物研究 与开发， 2007， 19(1): 120-122.7 任志会， 苏会霞， 柏艳柳. 丹参脂溶性及水溶性成分集成提取工艺研究 JJ. 中国中医 药信息杂志， 2009， 16(3): 54-56.8 Pan X， Niu G， Liu H. Microwave

15、-assisted extraction of tanshinones from Salvia miltiorrhiza bunge with analysis by high-performance liquid chromatographyJ. Journal of Chromatography A， 2001， 922(1): 371-3759 储茂泉，刘国杰.中药提取过程的动力学J.药学学报,2002, 37(7): 559-562.10 Shi Z, He J, Yao T, et al. Simultaneous determination of cryptotanshinone,

16、 tanshinone I andtanshinone IIA in traditional Chinese medicinal preparations containingv i Radix salvia miltiorrhizav/i by HPLCJ. Journal of pharmaceutical and biomedical analysis, 2005, 37(3): 481-486.致谢在两个月多的修改下，终于完成了这篇论文，期间遇到了许许多多的问题与困难，都在 老师和同学的帮助下，顺利的解决了。也要感谢我的导师夏老师，耐心的帮助我解决论文 中的问题，不断的帮助我进行修改与改正。也要感谢我的同学，给我提供了很多帮助。由于我的学术水平有限，所写论文难免有不足之处，恳请各位老师和学友批评和指正。