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1、中性粒细胞碱性磷酸酶染色液（NAP）预期用途：供骨髓细胞图片及血液细胞图片染色检查检验原理：本染色方法为偶氮偶联法，在PH9.2-9.8的碱性环境下，细胞中的碱性磷酸酶能 将底物磷酸萘酚AS-BI水解，生成a萘酚，再以稳定的重氮盐与萘酚偶联生成不溶性有色偶 氮染料沉淀，定位于细胞浆中主要组成成分：组成主要成分1八固定剂（A液）甲醛2、偶氮溶液（B液）FBB盐3、亚硝酸钠溶液（C液）亚硝酸钠4、磷酸萘酚AS-BI溶液（D液）磷酸萘酚AS-BI5、核固红溶液（E液）核固红储存条件及有效期：有效期：一年储存条件：本试剂盒应储存于2C-8C低温环境。样本要求：新鲜骨髓细胞涂片及血液细胞涂片（切勿使用抗
2、凝血） 检验方法：一、工作液配制（一）、浸染工作液配制（一份浸染工作量是43ml,至少可同时放置8-10张涂片）1、重氮盐溶液的准备：B液1ml与C液1ml彻底混匀，静置2分钟；2、染缸（自备染液缸）内加入蒸馏水40ml；3、将重氮盐溶液倒入染缸内，混匀4、再加D液1ml入染缸内，轻轻混匀（二）滴染工作液配制（一份滴染工作液是2.15ml）使用器材：一次性塑料试管、微量移液器，一次性吸嘴，滴管。操作：取B液50p l,C液50p L混匀，静置2分钟，再加蒸馏水2ml，D液50p l,混匀，二、染色步骤1、干燥涂片，滴加A液固定剂（用前恢复室温，并充分摇匀）固定约30-60秒，蒸馏水冲洗，甩干；
3、2、滴加或浸入工作液15分钟，蒸馏水冲洗2-3分钟，甩干3、E液（使用前务必摇匀！）复染1-2分钟，蒸馏水冲洗，干后镜检4、计算积分：反应结果以积分值报告，油镜下计数100 个中性杆状核、分叶核粒细胞，分别记录其分级情况，所有阳性细胞积分相加即为积分。如：分级中性粒细胞数量积分（-）0 分120（+）1 分1818(+) 2分4080(+ + +)3 分2266(+ + + +)4 分832总和100个中性粒细胞196参考范围：阳性反应主要见于成熟中性粒细胞（杆状及分叶核粒细胞）中，健康成人一般的中性粒细胞碱性磷酸酶积分值为13-130，但各个实验室条件各异，实验室应有自己的参考值。检验结果的
4、解释NAP 阳性颗粒为蓝色（-）0 分细胞浆中无阳性染色颗粒（+）1 分细胞浆中含少量颗粒或呈弥 漫蓝色（+） 2分细胞浆中含中等量颗粒或呈 弥漫蓝色(+ + +)3 分细胞浆中含较多颗粒或呈弥 漫较深蓝色(+ + + +)4 分细胞浆中充满粗大颗粒或呈 弥漫深蓝色检验方法的局限性 仅限于形态学染色观察使用 注意事项1、5Tests只限滴染使用2、使用前应恢复室温，用前请摇匀试剂；B,C液请充分混匀，所用容器必须洁净，工作液颜色为金黄色3、应采用新鲜涂片作NAP染色，放置过久则酶的活性会降低；使用抗凝血涂片染色阳性结果不稳定4、工作液配制以后应在十分钟以内使用 5、需用感染发热病人或正常人外周血涂片作为阳性对照6、每次试剂使用后，请迅速盖好密封保存，以免挥发及影响效果7、本品应由专业人士使用及进行结果的判读7、使用前应详细阅读使用说明书及产品包装标识，在有效期内使用，并做好个人卫生防护8、生产批号、效期见外包装9、用后应按医院或环保部门要求处置废弃物
中性粒细胞碱性磷酸酶染色液
