生长与环境条件

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1、第七章第七章 生长生长与环境条件与环境条件第二节 生长的定义与测定方法第三节 环境条件对微生物生长的影响重点：重点：1、微生物生长的特点、微生物生长的特点2、微生物群体生长的测量、微生物群体生长的测量3、细菌群体的生长曲线及意义、细菌群体的生长曲线及意义4、环境因子对微生物生长的影响、环境因子对微生物生长的影响第一节 微生物的分离和纯培养&微生物的分离和纯培养微生物的分离和纯培养一一无菌技术无菌技术二二用固体培养基分离纯培养用固体培养基分离纯培养三三用液体培养基分离纯培养用液体培养基分离纯培养四四单细胞单细胞(单孢子单孢子)分离分离五五选择培养分离选择培养分离六六二元培养物二元培养物七七微生物

2、的保藏技术微生物的保藏技术|一、无菌技术一、无菌技术 在分离、转接及培养纯培养物在分离、转接及培养纯培养物时防止其被其他微生物污染的技时防止其被其他微生物污染的技术被称为术被称为无菌技术无菌技术(aseptic technique).它是保证微生物学研究正常它是保证微生物学研究正常进行的关键进行的关键。微生物培养的常用器具及其微生物培养的常用器具及其灭菌灭菌试管、玻璃烧瓶、平皿试管、玻璃烧瓶、平皿(culture dish，petri dish)灭菌灭菌，不含不含任何生物。任何生物。培养基培养基在器皿中灭菌，也可单在器皿中灭菌，也可单独灭菌后加入无菌的器具中。独灭菌后加入无菌的器具中。高压蒸汽

3、灭菌高压蒸汽灭菌高温干热灭菌高温干热灭菌防止防止杂菌污染杂菌污染棉花塞棉花塞，金金属、塑料及硅胶帽属、塑料及硅胶帽，空气通过，空气通过，微生物不能通过。微生物不能通过。平皿平皿是由正反两平面板互扣而是由正反两平面板互扣而成，这种器具是专为防止空气成，这种器具是专为防止空气中微生物的污染而设计的。中微生物的污染而设计的。接种操作技术接种操作技术用接种环或接种针用接种环或接种针分离分离微生物，微生物，或在无菌条件下把微生物由一或在无菌条件下把微生物由一个培养器皿个培养器皿转接转接到另一个培养到另一个培养容器进行培养。容器进行培养。微生物实验的所有操作均应在微生物实验的所有操作均应在无菌条件下进行无

4、菌条件下进行。二、用固体培养基分离纯培养二、用固体培养基分离纯培养菌落或菌苔菌落或菌苔大多数细菌、酵母菌，以及许大多数细菌、酵母菌，以及许多真菌和单细胞藻类能在固体多真菌和单细胞藻类能在固体培养基上形成培养基上形成孤立的菌落孤立的菌落，平板分离法利用平板分离法利用固体培养基让固体培养基让孤立的活微生物体生长、繁殖孤立的活微生物体生长、繁殖形成形成菌落菌落，形成便于移植的菌，形成便于移植的菌落，进而得到落，进而得到纯培养纯培养。什么是纯培养？什么是纯培养？p197所谓所谓平板，平板，即即培养平板培养平板(culture plate)的简称，的简称，它是它是指熔化的固体培养基倒入无指熔化的固体培养

5、基倒入无菌平皿，冷却凝固后，盛有菌平皿，冷却凝固后，盛有固体培养基的平皿。固体培养基的平皿。Koch建立的建立的平板分离微生平板分离微生物纯培养的技术物纯培养的技术简便易行，简便易行，100多年来一直是各种菌种多年来一直是各种菌种分离的最常用手段。分离的最常用手段。|稀释倒平板法稀释倒平板法(pour plate method)|涂布平板法涂布平板法(spread plate method)|平板划线分离法平板划线分离法(streak plate method)|稀释摇管法稀释摇管法(dilution shake culture method)稀释倒平板法稀释倒平板法取样取样-系列稀释系列稀释

6、-混菌混菌-培养培养-单菌落单菌落(可能是由一个细菌可能是由一个细菌细胞繁殖形成的细胞繁殖形成的)-挑取单菌挑取单菌落，或重复操作落，或重复操作-纯培养纯培养。涂布平板法涂布平板法 无菌平皿无菌平皿-无菌平板无菌平板-稀稀释样品悬液释样品悬液-涂涂布布-培养培养-单菌落单菌落|平板划线分离法平板划线分离法 待分离材料待分离材料-平行划线、平行划线、扇形划线或其他形式的连续扇形划线或其他形式的连续划线划线(微生物细胞数量将随微生物细胞数量将随着划线次数的增加而减少，着划线次数的增加而减少，并逐步分散开来并逐步分散开来)-培养培养-单菌落。单菌落。|稀释摇管法稀释摇管法 对氧气更为敏感的厌氧性微生

7、对氧气更为敏感的厌氧性微生物的分离则可采用物的分离则可采用稀释摇管培稀释摇管培养法养法进行。进行。将一系列盛无菌琼脂培养基的将一系列盛无菌琼脂培养基的试管加热使琼脂熔化后，冷却试管加热使琼脂熔化后，冷却并保持在并保持在50左右，用这些试左右，用这些试管进行梯度稀释待分离材料，管进行梯度稀释待分离材料，试管均匀，冷凝，倾注一层灭试管均匀，冷凝，倾注一层灭菌液体石蜡和固体石蜡的混合菌液体石蜡和固体石蜡的混合物，将培养基和空气隔开。物，将培养基和空气隔开。培培养后，菌落形成在琼脂柱的中养后，菌落形成在琼脂柱的中间，挑取和移植单菌落。间，挑取和移植单菌落。三、用液体培养基分离纯培养三、用液体培养基分离

8、纯培养 接种物接种物在液体培养基中依序稀释，在液体培养基中依序稀释，以达以达高度稀释高度稀释的效果，使一支的效果，使一支试管中分配不到一个微生物。如试管中分配不到一个微生物。如果稀释后的果稀释后的多数多数试管微生物试管微生物不生不生长长，则有，则有微生物生长的试管得到微生物生长的试管得到的培养物的培养物可能就是纯培养物。可能就是纯培养物。|四、单细胞四、单细胞(单孢子单孢子)分离分离 采取显微分离法从混杂群体中采取显微分离法从混杂群体中直接分离单个细胞或单个个体直接分离单个细胞或单个个体进行培养以获得纯培养，称为进行培养以获得纯培养，称为单细胞单细胞(单孢子单孢子)分离法分离法。难度难度用途用

9、途|五、选择培养分离五、选择培养分离z通过选择培养进行微生物纯培养通过选择培养进行微生物纯培养分离的技术称为分离的技术称为选择培养分离选择培养分离。z可利用选择培养基进行可利用选择培养基进行直接分离直接分离或或富集培养。富集培养。选择培养基？选择培养基？富集培养基？富集培养基？利用选择培养基进行直接分离利用选择培养基进行直接分离主要主要根据待分离微生物的特点选择不同根据待分离微生物的特点选择不同的培养条件的培养条件，得到纯培养物。，得到纯培养物。富集（选择）培养富集（选择）培养主要是指利用不主要是指利用不同微生物间生命活动特点的不同，同微生物间生命活动特点的不同，制定特定的环境条件，使仅制定特

10、定的环境条件，使仅适应于适应于该条件的微生物旺盛生长该条件的微生物旺盛生长，从而使，从而使其在群落中的数量大大增加，人们其在群落中的数量大大增加，人们能够更容易地从自然界中分离到所能够更容易地从自然界中分离到所需的特定微生物。需的特定微生物。富集（选择）条件富集（选择）条件 温度、温度、pH、紫、紫外线、高压、光照、氧气、营养外线、高压、光照、氧气、营养|六、二元培养物六、二元培养物 只有一种微生物的培养物称为只有一种微生物的培养物称为纯培养物纯培养物，含有二种以上微生，含有二种以上微生物的培养物称为物的培养物称为混合培养物混合培养物，而如果培养物中只含有二种微而如果培养物中只含有二种微生物，

11、而且是有意识地保持二生物，而且是有意识地保持二者之间的特定关系的培养物称者之间的特定关系的培养物称为为二元培养物二元培养物。例如二元培养物是保存病毒的例如二元培养物是保存病毒的最有效途径。最有效途径。七、微生物的保藏技术七、微生物的保藏技术1.传代培养保藏传代培养保藏2.冷冻保藏冷冻保藏3.干燥保藏法干燥保藏法菌种保藏菌种保藏就是根据菌种特性及保就是根据菌种特性及保藏目的的不同，给微生物菌株以藏目的的不同，给微生物菌株以特定的条件，使其特定的条件，使其存活存活而得以延而得以延续。续。保藏技术的要求保藏技术的要求(不死亡不死亡，不，不污染，污染，不变异不变异)菌种或培养物保藏的菌种或培养物保藏的

12、重要性重要性菌种保藏机构：菌种保藏机构：中国微生物菌种中国微生物菌种保藏委员会保藏委员会(CCCCM)，中国典，中国典型培养物保藏中心型培养物保藏中心(CCTCC)，美，美国典型菌种保藏中心国典型菌种保藏中心(ATCC)，世界菌种保藏联合会世界菌种保藏联合会(WFGC)。|传代培养保藏传代培养保藏常用的有常用的有琼脂斜面琼脂斜面、半固体琼半固体琼脂柱脂柱及及液体培养液体培养等。等。选择使用选择使用适宜的培养基适宜的培养基，并在，并在规定的时间内进行移种规定的时间内进行移种。传代培养十分繁琐，容易传代培养十分繁琐，容易污染污染，特别是会由于菌株的特别是会由于菌株的自发突变自发突变而导致而导致菌种

13、衰退菌种衰退，使菌株的形使菌株的形态、生理特性、代谢物的产量态、生理特性、代谢物的产量等发生变化等发生变化。|冷冻保藏冷冻保藏使微生物处于冷冻状态，使微生物处于冷冻状态，代谢代谢作用停止作用停止以达到保藏的目的。以达到保藏的目的。微生物细胞对微生物细胞对低温敏感低温敏感，可用，可用速冻、快速升温和添加各种保速冻、快速升温和添加各种保护剂等手段。护剂等手段。液氮保藏或液氮保藏或-70低温保藏。低温保藏。用用普通冰箱普通冰箱冷冻保存菌种的效冷冻保存菌种的效果往往远低于低温冰箱，应注果往往远低于低温冰箱，应注意意经常检查保藏物的存活情况，经常检查保藏物的存活情况，随时转种随时转种。|干燥保藏法干燥保

14、藏法水分对各种生化反应和一切水分对各种生化反应和一切生命活动至关重要，因此，生命活动至关重要，因此，干燥，尤其是深度干燥是微干燥，尤其是深度干燥是微生物保藏技术中另一项经常生物保藏技术中另一项经常采用的手段。采用的手段。沙土管保存和冷冻真空干燥沙土管保存和冷冻真空干燥保藏是最常用的二项微生物保藏是最常用的二项微生物干燥保藏技术。干燥保藏技术。u沙土管保存沙土管保存主要适用于产孢子的微生物主要适用于产孢子的微生物，如，如芽孢杆菌、放线菌等。芽孢杆菌、放线菌等。将菌种接种培养，长出大量的孢将菌种接种培养，长出大量的孢子，洗下孢子制备孢子悬液，加子，洗下孢子制备孢子悬液，加入无菌的沙土试管中，减压干

15、燥，入无菌的沙土试管中，减压干燥，抽干水分，最后用石蜡、胶塞等抽干水分，最后用石蜡、胶塞等封闭管口，置冰箱保存。封闭管口，置冰箱保存。|冷冻真空干燥保藏冷冻真空干燥保藏是将加有保护剂的细胞样品预是将加有保护剂的细胞样品预先冷冻，经真空冰的升华作用先冷冻，经真空冰的升华作用除去水分。达到干燥的样品可除去水分。达到干燥的样品可在真空或惰性气体的密闭环境在真空或惰性气体的密闭环境中置低温保存，从而中置低温保存，从而使微生物使微生物处于干燥、缺氧及低温的状态，处于干燥、缺氧及低温的状态，生命活动处于休眠，生命活动处于休眠，可以达到可以达到长期保藏的目的。长期保藏的目的。细胞生长到一定阶段，开始细胞分裂

16、产细胞生长到一定阶段，开始细胞分裂产生子代细胞，从而促使个体数目增加，生子代细胞，从而促使个体数目增加，这就是这就是繁殖。繁殖。在适宜的环境中，微生物按自己的代谢在适宜的环境中，微生物按自己的代谢方式，进行同化作用和异化作用，如果方式，进行同化作用和异化作用，如果同化作用大于异化作用，则细胞中新合同化作用大于异化作用，则细胞中新合成的物质就会增加，细胞的体积逐渐增成的物质就会增加，细胞的体积逐渐增大，这就是大，这就是生长生长。第二节第二节 生长的定义与测定方法生长的定义与测定方法微生物生长与繁殖的定义微生物生长与繁殖的定义 微生物的生长实质上包含了微生物群体中个体数量和质量的增长 “微生物生长

17、生长繁殖微生物生长生长繁殖”细菌细胞的生长和繁殖是不易分开细菌细胞的生长和繁殖是不易分开的。它包括细胞长大，细胞壁增生，的。它包括细胞长大，细胞壁增生，DNA复制，横隔壁的形成，子细胞的复制，横隔壁的形成，子细胞的产生。产生。一、细菌生长的定义和测定方法一、细菌生长的定义和测定方法(一一)细菌生长、繁殖细菌生长、繁殖纯培养纯培养(二二)细菌生长的测定方法细菌生长的测定方法1.细胞数量的测定细胞数量的测定(1)总细胞计数法总细胞计数法血球计数板血球计数板涂片计数法：涂片计数法：0.01ml样品样品血球计数板血球计数板1mm大大方方格格中中小小大方格：大方格：高高0.1mm一个大方格中的总菌数一个

18、大方格中的总菌数(即即0.1mm3中的中的总菌数总菌数)为为(A/5)25B，因因1ml=1cm3=1000mm31ml菌液中的总菌数菌液中的总菌数=A525101 000B=50 000AB(个个)A：五个中方格中总菌数；：五个中方格中总菌数；B：菌液稀释倍数。：菌液稀释倍数。选用选用450-650nm波段波段光密度值控制在光密度值控制在0.1-0.65之间，有较高的精确度之间，有较高的精确度透光度透光度光密度光密度(2)比浊法比浊法与血球板计数法与血球板计数法及平板活菌计数及平板活菌计数法相结合法相结合(2)比浊法比浊法与血球板计数法与血球板计数法及平板活菌计数及平板活菌计数法相结合法相结

19、合(3)活菌计数法活菌计数法涂布平板法涂布平板法混合倒平板法混合倒平板法细胞干重法细胞干重法含氮量测定法含氮量测定法 细菌的含氮量为干重的细菌的含氮量为干重的12.5%2.细胞生物量的测定细胞生物量的测定DNA含量测定法含量测定法二、细菌的群体生长曲线二、细菌的群体生长曲线当把少量纯种单细胞微生物接种于恒当把少量纯种单细胞微生物接种于恒容积的液体培养基后，在适当的温度、通容积的液体培养基后，在适当的温度、通气等条件下，该群体就会由小到大，发生气等条件下，该群体就会由小到大，发生有规律的增长。如果以时间为横坐标，以有规律的增长。如果以时间为横坐标，以细胞数目的对数为纵坐标，就可画出由细胞数目的对

20、数为纵坐标，就可画出由延延迟期、对数期、稳定期和衰老期迟期、对数期、稳定期和衰老期4 4个阶段组个阶段组成的类似成的类似S S型的曲线，这种曲线称为型的曲线，这种曲线称为微生物微生物的典型的典型生长曲线生长曲线。56789延迟期延迟期对数期对数期衰老期衰老期稳定期稳定期时间时间活菌数目的对数活菌数目的对数mL(一一)延迟期延迟期细胞不分裂，但细胞变大；细胞不分裂，但细胞变大；细胞内细胞内RNA含量增高而使原生质呈碱性；含量增高而使原生质呈碱性；合成代谢活跃，易合成新的诱导酶；合成代谢活跃，易合成新的诱导酶；对外界环境变化敏感。对外界环境变化敏感。延迟期的长短与菌种本身、菌龄、接种量及培延迟期的

21、长短与菌种本身、菌龄、接种量及培养基有关。养基有关。缩短延迟期方法缩短延迟期方法细菌数目以几何级数增加，细菌数目以几何级数增加，酶系活跃，代谢旺盛，大小酶系活跃，代谢旺盛，大小均匀。在生长曲线上，表现均匀。在生长曲线上，表现为一条上升的直线。为一条上升的直线。(二二)对数期对数期t1t0N0NtNt=N02nn=(lgNt-lgN0)/lg2G=(t1-t0)/n影响代时的因素影响代时的因素1.1.菌种菌种2.2.营养成分营养成分(营养物种类以及浓度营养物种类以及浓度)3.3.培养温度培养温度一些微生物的代时细菌种类细菌种类培养基培养基 培养温度培养温度 代时代时 ()()（分）（分）E.co

22、liE.coli肉汤肉汤37371717E.coliE.coli牛奶牛奶373712.512.5产气肠杆菌产气肠杆菌肉汤肉汤,牛奶牛奶373716161818产气肠杆菌产气肠杆菌合成培养基合成培养基373729294444嗜热芽孢杆菌嗜热芽孢杆菌肉汤肉汤555518.318.3B.subtilisB.subtilis肉汤肉汤252526263232嗜酸乳杆菌嗜酸乳杆菌牛奶牛奶373766668787乳酸链球菌乳酸链球菌牛奶牛奶37372626乳酸链球菌乳酸链球菌乳糖肉汤乳糖肉汤37374848新繁殖的细胞与死亡细胞数目几乎相新繁殖的细胞与死亡细胞数目几乎相 等，处于动态平衡。等，处于动态平衡。

23、菌体产量达到最高，细胞开始储藏糖菌体产量达到最高，细胞开始储藏糖 原、脂肪等储藏物。原、脂肪等储藏物。产芽孢。产芽孢。开始合成次生代谢产物。开始合成次生代谢产物。(三三)稳定期稳定期延长方法延长方法：补料、调节：补料、调节pH、温度或、温度或 通气量通气量活菌数目急剧下降；活菌数目急剧下降；出现了出现了“负生长负生长”；细胞形态多样，有时产生畸形；细胞形态多样，有时产生畸形；细胞开始自溶，释放次生代谢产物。细胞开始自溶，释放次生代谢产物。(四四)衰亡期衰亡期二次生长、同步生长、连续培养二次生长、同步生长、连续培养真菌生长真菌生长第三节第三节 环境条件对微生物生长的影响环境条件对微生物生长的影响

24、一、温度一、温度二、水和渗透压二、水和渗透压三、酸碱度三、酸碱度四、氧和氧化还四、氧和氧化还 原电位原电位五、辐射五、辐射六、化学杀菌剂六、化学杀菌剂 和抑菌剂和抑菌剂温度温度生长速率生长速率最低最低最适最适最高最高一、温度一、温度一、温度一、温度(一一)微生物生长的温度类型微生物生长的温度类型嗜冷微生物嗜冷微生物(最适最适20，最低，最低40)(二二)低温对微生物的影响低温对微生物的影响(三三)高温对微生物的影响高温对微生物的影响灭菌灭菌1.干热灭菌干热灭菌2.湿热灭菌湿热灭菌常压法常压法煮沸煮沸100 15间歇灭菌间歇灭菌:290，25巴氏消毒巴氏消毒加压法加压法常规加压灭菌法常规加压灭菌

25、法:121,30连续加压灭菌法连续加压灭菌法:140,1562.8 3071.7 15”二、水和渗透压二、水和渗透压(一一)水活度水活度(w)是一种反映环境中是一种反映环境中水水对微生物生长对微生物生长可给可给性性高低的指标。是指在相同温度下，溶液或高低的指标。是指在相同温度下，溶液或物质表面空气的蒸汽压与纯水的蒸汽压之比。物质表面空气的蒸汽压与纯水的蒸汽压之比。w=Ps/Pw二、水和渗透压二、水和渗透压(一一)水活度水活度(w)0.60.98及课本表及课本表7-3二、水和渗透压二、水和渗透压(一一)水活度水活度(w)二、水和渗透压二、水和渗透压(二二)渗透压渗透压 当两种不同浓度的溶液间被当

26、两种不同浓度的溶液间被一个半透性薄膜隔开时，稀溶液一个半透性薄膜隔开时，稀溶液中的水分子会因水势的推动而透中的水分子会因水势的推动而透过隔膜流向浓溶液，直至浓溶液过隔膜流向浓溶液，直至浓溶液所产生的机械压力足以使两边水所产生的机械压力足以使两边水分子的进出达到平衡为止，这时分子的进出达到平衡为止，这时由浓溶液中的溶质所产生的机械由浓溶液中的溶质所产生的机械压力，即为它的渗透压值。压力，即为它的渗透压值。细胞膜是一个具有特殊结构和功能的半透性膜。细胞膜是一个具有特殊结构和功能的半透性膜。二、水和渗透压二、水和渗透压(二二)渗透压渗透压微生物细胞微生物细胞渗透压渗透压环境渗透压环境渗透压水水微生物

27、细胞微生物细胞渗透压渗透压环境渗透压环境渗透压水水质壁分离质壁分离应用，例外应用，例外10-15%盐，盐，50-70%蔗糖蔗糖原生质球破裂原生质球破裂三、酸碱度三、酸碱度大多数细菌：大多数细菌：pH6.57.5放线菌：微碱性放线菌：微碱性真菌：偏酸真菌：偏酸微生物最适微生物最适pH:三、酸碱度三、酸碱度t三、酸碱度三、酸碱度四、氧和氧化还原电位四、氧和氧化还原电位(一一)氧与微生物的生长氧与微生物的生长大多数细菌、大多数细菌、几乎所有放线几乎所有放线菌、蓝细菌、菌、蓝细菌、丝状真菌等丝状真菌等许多数细菌、许多数细菌、酵母菌、病原酵母菌、病原微生物微生物一些乳酸菌一些乳酸菌(如如嗜盐片球菌嗜盐片

28、球菌)梭状芽孢杆菌梭状芽孢杆菌双歧杆菌属的某双歧杆菌属的某些种些种(一一)氧与微生物的生长氧与微生物的生长四、氧和氧化还原电位四、氧和氧化还原电位专性厌氧微生物不能清除氧的代谢产物专性厌氧微生物不能清除氧的代谢产物-超氧阴离子及过氧超氧阴离子及过氧化氢，受它们的毒害而死亡。化氢，受它们的毒害而死亡。大宝大宝SOD蜜，内含丰富的蜜，内含丰富的SOD活性物质，并加入人活性物质，并加入人参、黄芪等天然植物的有效成人它极易被皮肤吸收，参、黄芪等天然植物的有效成人它极易被皮肤吸收，并在皮肤表面形成一层保护膜，有效地防止角质水并在皮肤表面形成一层保护膜，有效地防止角质水份的散失。经常使用大宝份的散失。经常

29、使用大宝SOD蜜，能祛除色素、黑蜜，能祛除色素、黑斑、消除皱纹、延缓衰老。全家适用，四季皆宜。斑、消除皱纹、延缓衰老。全家适用，四季皆宜。SOD（超氧化物歧化酶）（超氧化物歧化酶）是一种源于生命体的活性是一种源于生命体的活性物质，能消除生物体在新物质，能消除生物体在新陈代谢过程中产生的有害陈代谢过程中产生的有害物质。对人体不断地补充物质。对人体不断地补充SOD，具有抗衰老的特殊，具有抗衰老的特殊效果。效果。“要想皮肤好，早晚用大宝要想皮肤好，早晚用大宝”四、氧和氧化还原电位四、氧和氧化还原电位(Eh)(二二)氧化还原电位氧化还原电位(Eh)与微生物的生长与微生物的生长Eh值与值与“O2含量含量

30、及及是否存在氧化还原物质是否存在氧化还原物质有关有关”通常环境中的通常环境中的Eh值在值在+800mV与与-450mV之间。之间。在培养基中加入还原剂来降低在培养基中加入还原剂来降低Eh值，满足厌值，满足厌氧微生物的生长。氧微生物的生长。如何培养厌氧菌呢？如何培养厌氧菌呢？需需特殊的培养装置特殊的培养装置以保持厌氧环境，及以保持厌氧环境，及还还原性的培养基原性的培养基(1)高层琼脂柱高层琼脂柱(2)厌氧培养皿厌氧培养皿(3)亨盖特滚管技术亨盖特滚管技术(4)厌氧罐厌氧罐(5)厌氧手套箱厌氧手套箱高层琼脂柱高层琼脂柱NaOH溶液溶液焦性没食子酸焦性没食子酸亨盖特滚管技术亨盖特滚管技术含还原剂含还

31、原剂试管口和试管试管口和试管腔体积很小腔体积很小将产气袋剪去一角并注入将产气袋剪去一角并注入适量水后投放入厌氧罐，适量水后投放入厌氧罐，反应后形成反应后形成CO2和和H2钯催化钯催化H2与与O2反应形成水反应形成水美蓝从有氧时的蓝色变成无氧时的无色美蓝从有氧时的蓝色变成无氧时的无色N2:CO2:H2=85:5:10(V/V)五、辐射五、辐射(一一)紫外线：紫外线：100nm400nm,260nm杀菌最好，用杀菌最好，用于对物体表面或室内空气灭菌。于对物体表面或室内空气灭菌。(二二)电离辐射电离辐射:X-和和-射线射线逐出分子中的电子和质子，形成有毒的自由逐出分子中的电子和质子，形成有毒的自由基

32、。基。(三三)强可见光：强可见光：400700nm氧化细胞内的光敏感分子。氧化细胞内的光敏感分子。指引起细胞破坏或病毒失活的电磁辐射：指引起细胞破坏或病毒失活的电磁辐射：六、化学杀菌剂和抑菌剂六、化学杀菌剂和抑菌剂(一一)消毒剂和防腐剂消毒剂和防腐剂(二二)化学治疗剂化学治疗剂1.生长因子类似物生长因子类似物2.抗生素抗生素3.微生物的抗药性微生物的抗药性(1)缺乏某类药物作用的结构缺乏某类药物作用的结构(2)药物不能透过膜药物不能透过膜(3)产生使药物失活的酶产生使药物失活的酶(4)药物作用部位被修饰改变药物作用部位被修饰改变(5)形成形成“救护途径救护途径”(6)将药物泵出胞外将药物泵出胞

33、外重点：重点：1、微生物生长的特点、微生物生长的特点2、微生物群体生长的测量、微生物群体生长的测量(数量和生数量和生物量的测量物量的测量)3、细菌群体的生长曲线及意义、细菌群体的生长曲线及意义4、环境因子对微生物生长的影响、环境因子对微生物生长的影响本章小结：本章小结：思考题：思考题：测定细菌数量及生物量的方法有哪测定细菌数量及生物量的方法有哪些？原理是什么？使用范围及优缺些？原理是什么？使用范围及优缺点是什么？点是什么？什么是细菌群体的典型生长曲线？什么是细菌群体的典型生长曲线？分为哪几个期？各个期的特点是什分为哪几个期？各个期的特点是什么？认识这四个期有何实践意义？么？认识这四个期有何实践意义？3、干热灭菌和湿热灭菌主要用于哪些物、干热灭菌和湿热灭菌主要用于哪些物品的灭菌？湿热灭菌又分为哪几种方式？品的灭菌？湿热灭菌又分为哪几种方式？4、什么是水活度？水活度对微生物生长、什么是水活度？水活度对微生物生长有何影响？有何影响？5、为什么厌氧微生物遇氧不能生活？、为什么厌氧微生物遇氧不能生活？6、紫外线的杀菌机理是什么？磺胺类、紫外线的杀菌机理是什么？磺胺类药物抑制细菌生长的机理是什么？药物抑制细菌生长的机理是什么？7、什么是抗生素？作用机制主要有哪、什么是抗生素？作用机制主要有哪些？些？8、微生物的耐药性机制有哪些？、微生物的耐药性机制有哪些？