微生物的实验室培养降解尿素和纤维素用

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1、专题专题 微生物专题微生物专题微生物微生物概念及概念及分类分类微生物微生物培养培养微生物微生物分离和分离和计数计数微生物微生物应用应用一、微生物概念及分类一、微生物概念及分类 1 1、概念：是指自然界中那些形态微小、概念：是指自然界中那些形态微小、结构简单，结构简单，通常通常要用光学显微镜或电子要用光学显微镜或电子显微镜才能看清楚的生物。显微镜才能看清楚的生物。第第1 1节节 微生物的实验培养微生物的实验培养生生物物分分类类动物界：动物界：植物界：植物界：真菌界：真菌界：原生生物：原生生物：原核生物：原核生物：病毒病毒大型真菌、霉菌大型真菌、霉菌酵母菌酵母菌细细菌、放菌、放线线菌、菌、支支原体

2、、原体、蓝蓝藻、藻、衣衣原体原体变形虫、草履虫变形虫、草履虫DNADNA型病毒、型病毒、RNARNA型病毒型病毒真核生物真核生物原核生物原核生物非细胞生物非细胞生物细胞细胞生物生物乳酸菌每小时产生乳酸能达到乳酸菌每小时产生乳酸能达到自身重量的成千上万倍；大肠杆菌每小时自身重量的成千上万倍；大肠杆菌每小时分解的糖是自身重量的两千倍，每分解的糖是自身重量的两千倍，每2020分分钟可分裂一次，如保持这一速度，则两天钟可分裂一次，如保持这一速度，则两天即可超过地球的重量。即可超过地球的重量。微生物的代谢为什么如此旺盛呢？微生物的代谢为什么如此旺盛呢？微生物表面积和体积的比很大，约是同等重量微生物表面积

3、和体积的比很大，约是同等重量成年人的成年人的3030万倍，使它们能迅速与外界环境进万倍，使它们能迅速与外界环境进行物质交换。行物质交换。二、微生物培养二、微生物培养：1 1）概念：）概念：按照微生物对营养物质的不同需按照微生物对营养物质的不同需要，要，配制出供其生长繁殖的配制出供其生长繁殖的营养基质营养基质。1 1、培养基：、培养基：2 2）营养成分：）营养成分：概念概念分类分类作用作用为微生物为微生物的生长和的生长和繁殖提供繁殖提供所需碳元所需碳元素的营养素的营养物质物质无机碳源：二氧化碳无机碳源：二氧化碳、碳酸氢钠；碳酸氢钠；有机碳源：葡萄糖有机碳源：葡萄糖、脂肪酸、石油等脂肪酸、石油等葡

4、萄糖是最主要的碳葡萄糖是最主要的碳源源合成微生物合成微生物的细胞物质的细胞物质和代谢产物，和代谢产物，有些碳源是有些碳源是异养微生物异养微生物主要能源主要能源碳源碳源：概念概念分类分类作用作用为微生物为微生物的生长和的生长和繁殖提供繁殖提供所需氮元所需氮元素的营养素的营养物质物质无机氮源：无机氮源：N2、NH3铵盐、硝酸盐；铵盐、硝酸盐；有机氮源：尿素、有机氮源：尿素、牛牛肉膏、蛋白胨等肉膏、蛋白胨等铵盐、硝酸盐是最主铵盐、硝酸盐是最主要的氮源。要的氮源。合成蛋白质、合成蛋白质、核酸和含氮核酸和含氮代谢产物代谢产物氮源：氮源：温度、温度、PHPH、渗透压、渗透压、O2O2及特殊营养及特殊营养物

5、质等。物质等。1 1、科学家们用脉胞霉（一种真菌）为材料，进、科学家们用脉胞霉（一种真菌）为材料，进行科学研究，用基本培养基来培养脉胞霉。行科学研究，用基本培养基来培养脉胞霉。基本培养基中所含的营养要素一般包括：基本培养基中所含的营养要素一般包括：_2 2、酵母菌可用于食品工业的废水处理，废水中、酵母菌可用于食品工业的废水处理，废水中的淀粉或废糖可与为酵母菌的生长提供的淀粉或废糖可与为酵母菌的生长提供_类营养物质。类营养物质。3 3、用乳酸菌制酸奶，加入的蔗糖是作为、用乳酸菌制酸奶，加入的蔗糖是作为_类营养物质加入到牛奶中的。类营养物质加入到牛奶中的。4 4、硝化细菌的碳源、氮源、能源依次为、

6、硝化细菌的碳源、氮源、能源依次为_。碳源、氮源、水、无机盐碳源、氮源、水、无机盐碳源碳源碳源碳源CO2、NH3、NH3氧化释放的化学能氧化释放的化学能微生微生物所物所需的需的营养营养要素要素碳源碳源氮源氮源水水无机盐无机盐无机碳源：无机碳源：CO2等等自养型自养型有机碳源：有机碳源：葡萄糖等葡萄糖等异养型异养型N2：固氮菌（根瘤菌等）：固氮菌（根瘤菌等）NH3：硝化细菌：硝化细菌其他：铵盐、硝酸盐、尿素、其他：铵盐、硝酸盐、尿素、蛋白胨蛋白胨特殊营养物质（维生素、氨基酸和碱基等）、特殊营养物质（维生素、氨基酸和碱基等）、PHPH、温度、氧气等、温度、氧气等3）培养基的种类）培养基的种类物理性质

7、物理性质培养基特点培养基特点作作 用用固体培养基固体培养基半固体培养半固体培养基基液体培养基液体培养基加大量琼脂加大量琼脂 加少量琼脂加少量琼脂 不加琼脂不加琼脂 用于微生物的分用于微生物的分离和计数离和计数观察微生物的运观察微生物的运动和鉴定菌种动和鉴定菌种用于工业生产用于工业生产3）培养基的种）培养基的种类类化学成分化学成分培养基特点培养基特点作作 用用合成培合成培养养 基基天然培天然培养养 基基化学成分、化学成分、含量已知含量已知含有天然物质，含有天然物质，化学成分、含化学成分、含量未知量未知用于微生物的分用于微生物的分类和鉴定类和鉴定用于工业生产用于工业生产3）培养基的种类）培养基的种

8、类用用 途途培养基成培养基成分分原理原理作用作用实例实例选择选择培养培养基基鉴别鉴别培养培养基基基本培养基本培养基基+某种物某种物质质基本培养基本培养基基+指示指示剂或化学剂或化学物质物质抑制不需要；抑制不需要；促进需要微促进需要微生物生长生物生长发生特定颜发生特定颜色反应等，色反应等，证明微生物证明微生物的存在的存在分离分离菌种菌种鉴别鉴别菌种菌种青霉素选青霉素选择出霉菌择出霉菌和酵母菌和酵母菌伊红伊红-美蓝美蓝遇大肠杆菌遇大肠杆菌落呈深紫色落呈深紫色带金属光泽带金属光泽选择培养基选择培养基1 1）不加碳源的培养基）不加碳源的培养基 分离自养型微生物分离自养型微生物2 2）不加氮源的培养基）

9、不加氮源的培养基 分离固氮菌分离固氮菌3 3）加入青霉素的培养基）加入青霉素的培养基 分离酵母菌、霉菌等真菌分离酵母菌、霉菌等真菌4 4）加入高浓度食盐的培养基）加入高浓度食盐的培养基 分离金黄色葡萄球菌分离金黄色葡萄球菌练习：练习：（1010全国）全国）某细菌固体培养基的组某细菌固体培养基的组成成分是成成分是KHKH2 2POPO4 4、NaNa2 2HPOHPO4 4、MgSOMgSO4 4、葡萄糖、尿素、琼脂和蒸馏水，其中凝固葡萄糖、尿素、琼脂和蒸馏水，其中凝固剂是剂是，碳源是，碳源是，氮源是。已知只有能合成脲酶氮源是。已知只有能合成脲酶的细菌才能在该培养基上生长，故该培养的细菌才能在该

10、培养基上生长，故该培养基属于培养基。按照化学成分分基属于培养基。按照化学成分分类，该培养基属于培养基。从同化类，该培养基属于培养基。从同化作用类型上看，用该培养基培养的细菌属作用类型上看，用该培养基培养的细菌属于于。葡萄糖葡萄糖尿素尿素琼脂琼脂选择选择合成合成异养型异养型思考：思考：自然界中微生物是混杂的生活在自然界中微生物是混杂的生活在一起的，如何分离出某种微生物（如纯一起的，如何分离出某种微生物（如纯化大肠杆菌）？化大肠杆菌）？2 2、实验操作、实验操作大肠杆菌的纯化培养大肠杆菌的纯化培养 1）制备培养基：）制备培养基：计计算算称称量量溶溶化化调调PHPH值值灭灭菌菌倒倒平平板板无菌技术无

11、菌技术1、获取纯化培养物的关键是、获取纯化培养物的关键是防止外来杂菌防止外来杂菌 的入侵。的入侵。2、无菌措施：、无菌措施：1)1)对实验操作空间、操作者衣着和手进对实验操作空间、操作者衣着和手进行清洁和行清洁和消毒消毒；对将培养用的器皿、；对将培养用的器皿、接种工具和培养基进行接种工具和培养基进行灭菌灭菌2)2)实验操作时已灭菌材料等应避免与周实验操作时已灭菌材料等应避免与周围物品接触；实验操作应在酒精灯火围物品接触；实验操作应在酒精灯火焰附近进行；接种工具等应在酒精等焰附近进行；接种工具等应在酒精等火焰上灼烧后使用火焰上灼烧后使用1)1)概念：用概念：用温和的温和的物理方法和化学方法杀物理

12、方法和化学方法杀 死物体表面或内部死物体表面或内部一部分一部分对人体有对人体有害的微生物（不包括芽孢和孢子）害的微生物（不包括芽孢和孢子）消毒与灭菌消毒与灭菌消毒：消毒：2)2)常用消毒方法：常用消毒方法：煮沸消毒法煮沸消毒法:100:100煮沸煮沸5-6min5-6min；巴氏消毒法巴氏消毒法:70-75:70-75 下煮下煮30min30min或或 80 80 下煮下煮15min15min；化学药剂消毒法化学药剂消毒法:用用75%75%酒精等进行皮肤消酒精等进行皮肤消毒毒;氯气消毒水源；氯气消毒水源；紫外线消毒等紫外线消毒等灭菌灭菌1)1)概念：用概念：用强烈的强烈的物理方法和化学方法杀死

13、物理方法和化学方法杀死物体表面或内部物体表面或内部所有的所有的微生物（包微生物（包括芽孢和孢子）括芽孢和孢子）灼烧灭菌灼烧灭菌干热灭菌：干热灭菌：160-160-170 170 下加热下加热1-1-2h2h。高压蒸高压蒸汽汽灭菌：灭菌：100kPa100kPa、121 121 下维持下维持15-30min.15-30min.2)灭菌方法：灭菌方法：无菌技术无菌技术1 1、获得纯净培养物的关键是？、获得纯净培养物的关键是？防止外来杂菌的入侵防止外来杂菌的入侵2 2、消毒与灭菌的区别？、消毒与灭菌的区别？消毒是杀死部分对人体有害的微生物；灭菌消毒是杀死部分对人体有害的微生物；灭菌 是杀死所有微生物

14、。是杀死所有微生物。3 3、对培养基灭菌的方法是、对培养基灭菌的方法是_，对接种针灭菌的方法是对接种针灭菌的方法是_，对玻璃器，对玻璃器皿灭菌的方法是皿灭菌的方法是_，对实验操作者的手，对实验操作者的手用酒精用酒精_处理，实验操作结束需不需要处理，实验操作结束需不需要灭菌？灭菌？_高压蒸汽灭菌法高压蒸汽灭菌法灼烧灭菌灼烧灭菌干热灭菌干热灭菌消毒消毒需要需要 倒平板：倒平板：待培养基冷却到待培养基冷却到5050O OC C左右时倒平板。左右时倒平板。平板倒置原因：防止培养基冷却产生水滴滴落培平板倒置原因：防止培养基冷却产生水滴滴落培养基上，造成污染。养基上，造成污染。2 2、实验操作、实验操作大

15、肠杆菌的纯化培养大肠杆菌的纯化培养 1）制备培养基：）制备培养基：计计算算称称量量溶溶化化调调PHPH值值灭灭菌菌倒倒平平板板原则：原则：目的明确、营养协调、目的明确、营养协调、PH值适宜值适宜2）纯化大肠杆菌：）纯化大肠杆菌：微生物接种方法微生物接种方法平板划线法平板划线法稀释涂布平板法稀释涂布平板法平板划线法平板划线法：通过接种环在琼脂通过接种环在琼脂固体固体培养基表面连续划线培养基表面连续划线的操作，的操作，将聚集的将聚集的菌种逐步稀释分散菌种逐步稀释分散到培养基的表面，在到培养基的表面，在数次划线后培养，可以数次划线后培养，可以分离到由一个细分离到由一个细胞胞繁殖而来的细胞群体，即得到

16、繁殖而来的细胞群体，即得到单一菌单一菌落落。平板划线法平板划线法稀释涂布平板法：稀释涂布平板法：将菌液进行将菌液进行一系列的一系列的梯度稀释梯度稀释，然后，然后将不同稀释梯度菌液将不同稀释梯度菌液分别涂布在固体培分别涂布在固体培养基养基的表面，进行培养。在的表面，进行培养。在稀释度足够稀释度足够高的菌液高的菌液里，聚集在一起的微生物将被里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞分散成单个细胞，进而，进而形成单个菌落形成单个菌落。系列稀释操作系列稀释操作123456(1)(1)将分别盛有将分别盛有9mL9mL水的试管灭菌并编号。水的试管灭菌并编号。(2)(2)用移液管吸取用移液管吸取1mL1mL培

17、养的菌液，注入第二支试管中，培养的菌液，注入第二支试管中，轻压橡皮头，吹吸三次使之充分混匀。轻压橡皮头，吹吸三次使之充分混匀。(3)(3)从从10101 1倍稀释的试管中吸取倍稀释的试管中吸取1mL1mL稀释液，注入第三支试稀释液，注入第三支试管中，重复步骤管中，重复步骤2 2，直至到第六支试管。，直至到第六支试管。10-110-410-510-6平板划线法平板划线法稀释涂布平板法稀释涂布平板法相同点：分散出相同点：分散出单细菌形成单菌落单细菌形成单菌落来分离菌种来分离菌种不同点：分别通过不同点：分别通过划线划线和和稀释稀释分散出单细菌，分散出单细菌，稀释稀释涂布平板法涂布平板法除分离菌种外除

18、分离菌种外还可以对微生物计数还可以对微生物计数三、微生物的分离和计数三、微生物的分离和计数思考：如何寻找和分离某种微生物？思考：如何寻找和分离某种微生物？当两个或多个细胞连着一起时，平板上观当两个或多个细胞连着一起时，平板上观察到的菌落只有一个。察到的菌落只有一个。（三）实例：（三）实例：从肥沃、湿润的土壤中取样。先铲去表层从肥沃、湿润的土壤中取样。先铲去表层土土3cm3cm左右，再取样，将样品装入事先准备好的左右，再取样，将样品装入事先准备好的信封中。信封中。取土样用的小铁铲和盛土样的的信封在使用取土样用的小铁铲和盛土样的的信封在使用前都要灭菌。前都要灭菌。制备以尿素为唯一氮源的制备以尿素为

19、唯一氮源的选择培养基选择培养基。纤维素分解菌的筛选（教材纤维素分解菌的筛选（教材P28P28）选择选择_的环境，采集土样制成样品。的环境，采集土样制成样品。将样品接种在以将样品接种在以_为唯一碳源的选择培为唯一碳源的选择培养基上培养，目的是增加纤维素分解菌的浓度。养基上培养，目的是增加纤维素分解菌的浓度。采用采用_法法,将样品接种到含将样品接种到含有有刚果红刚果红的固体的培养基上，挑选产生的固体的培养基上，挑选产生_的菌落来筛选纤维素分解菌。的菌落来筛选纤维素分解菌。纤维素丰富纤维素丰富纤维素纤维素稀释涂布平板稀释涂布平板透明圈透明圈2 2、分解纤维素微生物的分离：、分解纤维素微生物的分离：实

20、验操作实验操作土壤取样土壤取样梯度稀释梯度稀释将样品涂布到鉴别将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培纤维素分解菌的培养基上（含刚果红）养基上（含刚果红）挑选产生透挑选产生透明圈的菌落明圈的菌落选择培养选择培养(液体培养基液体培养基)筛选并增大菌种浓度筛选并增大菌种浓度稀释菌种稀释菌种（二）纯化大肠杆菌（二）纯化大肠杆菌1 1、将准备培养的菌种放到培养基中的过程叫做、将准备培养的菌种放到培养基中的过程叫做_。2 2、微生物接种的最常用方法是、微生物接种的最常用方法是_和和_3 3、能够获得单一菌落的接种方法有、能够获得单一菌落的接种方法有_和和_4 4、能够测定样品中活菌数的接种方法是、能够测定样品中

21、活菌数的接种方法是_平板划线法平板划线法稀释涂布平板法稀释涂布平板法接种接种平板划线法平板划线法稀释涂布平板法稀释涂布平板法稀释涂布平板法稀释涂布平板法生生物物细胞生物细胞生物动物动物 植物植物 真菌真菌 原生生物原生生物非细胞非细胞生物生物真核生物真核生物原核生物原核生物细菌细菌 放线菌放线菌支原体支原体衣原体衣原体蓝藻蓝藻病毒病毒微生微生物物酵母菌、酵母菌、霉霉 菌、蘑菇菌、蘑菇微生物的实验室培养微生物的实验室培养一、基础知识（一）培养基一、基础知识（一）培养基1、配制培养基的基本原则（确定培养基配配制培养基的基本原则（确定培养基配 方的依据）方的依据）_2 2、多数培养基都含有、多数培养

22、基都含有_等四类营养物质，少数微生物还需要加入特殊等四类营养物质，少数微生物还需要加入特殊的营养物质即的营养物质即_._.3 3、最常用的碳源是最常用的碳源是_；蛋白胨或牛；蛋白胨或牛肉膏可以为细菌提供肉膏可以为细菌提供_类营养物质类营养物质4 4、微生物的培养条件主要包括、微生物的培养条件主要包括 _根据微生物的营养需要配制根据微生物的营养需要配制水、无机盐、碳源、氮源水、无机盐、碳源、氮源生长因子生长因子葡萄糖葡萄糖氮源和碳源氮源和碳源温度、温度、PHPH、渗透压、渗透压、OO2 2等等笔记笔记 例题：下图为某同学根据杂交瘤技术的方法，设计的生产例题：下图为某同学根据杂交瘤技术的方法，设计

23、的生产破伤风杆菌的实验方案破伤风杆菌的实验方案B体外培养体外培养骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞杂交瘤细胞杂交瘤细胞足够数量的细胞足够数量的细胞群群注射到注射到小鼠腹腔小鼠腹腔AC 1 1、该实验方案的目的是、该实验方案的目的是 _2 2、A A是从小鼠的脾脏中取得是从小鼠的脾脏中取得 _,_,该细胞能够产生该细胞能够产生_3 3、取、取A A细胞前，必须给小鼠细胞前，必须给小鼠 _4 4、图中、图中B B为为_过程，常用过程，常用_作为诱导剂，作为诱导剂，制备单克隆抗体制备单克隆抗体B细胞细胞 抗体抗体注射抗原注射抗原 细胞融合细胞融合 灭活的病毒灭活的病毒 例题：下图为某同学根据杂交瘤技术的方法，设计

24、的生产例题：下图为某同学根据杂交瘤技术的方法，设计的生产破伤风杆菌的实验方案破伤风杆菌的实验方案B体外培养体外培养骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞杂交瘤细胞杂交瘤细胞足够数量的细胞足够数量的细胞群群注射到注射到小鼠腹腔小鼠腹腔AC 5 5、杂交瘤细胞继承、杂交瘤细胞继承_的的遗传特性，既能遗传特性，既能_,_,又能又能 _。6 6、C C过程指细胞培养，该过程包括过程指细胞培养，该过程包括_培养和培养和_培养两个阶段。培养两个阶段。7 7、单克隆抗体的特点是、单克隆抗体的特点是 _8 8、将单克隆抗体与抗癌药物相结合，、将单克隆抗体与抗癌药物相结合，制成制成_ 双亲细胞双亲细胞 无限增殖无限增殖 分泌特异

25、性抗体分泌特异性抗体原代原代 传代传代特异性强、灵敏度高，并可大量制备特异性强、灵敏度高，并可大量制备生物导弹生物导弹5 5、选择培养基（笔记）、选择培养基（笔记）选择培养基选择培养基筛选、分离的细胞筛选、分离的细胞加入青霉素加入青霉素酵母菌、霉菌酵母菌、霉菌等真菌等真菌加入高浓度食盐加入高浓度食盐金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌无氮培养基无氮培养基固氮菌固氮菌无碳培养基无碳培养基自养型自养型细菌细菌依标记基因，加入某种等抗依标记基因，加入某种等抗生素生素导入了导入了重组重组DNADNA的受体细的受体细胞胞加入次黄嘌呤、氨基嘌呤等加入次黄嘌呤、氨基嘌呤等杂交瘤细胞杂交瘤细胞培养基成分培养基成分含量

26、含量NH4ClNH4Cl4.6g4.6gK2HPO4K2HPO42.0g2.0gMgSO4MgSO41.6g1.6g琼脂琼脂15g15g蒸馏水蒸馏水1000ml1000ml乳糖乳糖5.0g培养基成分培养基成分含量含量K2HPO4K2HPO42.0g2.0gMgSO4MgSO41.6g1.6g琼脂琼脂15g15g蒸馏水蒸馏水1000ml1000ml乳糖乳糖5.0gNH4ClNH4Cl4.6g4.6g蛋白胨蛋白胨10.0g10.0g培养基成分培养基成分含量含量K2HPO4K2HPO42.0g2.0gMgSO4MgSO41.6g1.6g琼脂琼脂15g15g蒸馏水蒸馏水1000ml1000ml乳糖乳糖

27、5.0gNH4ClNH4Cl4.6g4.6g培养基成分培养基成分含量含量K2HPO4K2HPO42.0g2.0gMgSO4MgSO41.6g1.6g琼脂琼脂15g15g蒸馏水蒸馏水1000ml1000ml乳糖乳糖5.0gNH4ClNH4Cl4.6g4.6g蛋白胨蛋白胨10.0g10.0g培养基成分培养基成分含量含量K2HPO4K2HPO42.0g2.0gMgSO4MgSO41.6g1.6g琼脂琼脂15g15g蒸馏水蒸馏水1000ml1000ml乳糖乳糖5.0gNH4ClNH4Cl4.6g4.6g微生物的分离：科赫的平板划线法微生物的分离：科赫的平板划线法自然界中的微生物都是混杂生活在一起的，给

28、研究和自然界中的微生物都是混杂生活在一起的，给研究和应用带来了很大困难。应用带来了很大困难。1919世纪后期，德国细菌学家世纪后期，德国细菌学家科赫发明了科赫发明了固体培养基固体培养基，尤其是用琼脂做凝固剂的固，尤其是用琼脂做凝固剂的固体培养基，成功解决这一问题，科赫体培养基，成功解决这一问题，科赫将微生物样品稀将微生物样品稀释后，用针尖沾取少量稀释菌液在固体培养基上连续释后，用针尖沾取少量稀释菌液在固体培养基上连续划线划线，由于微生物在固体培养基上由于微生物在固体培养基上生长部位固定生长部位固定，不，不久就会在培养基表面长出久就会在培养基表面长出多种菌落多种菌落，科赫推断相同的，科赫推断相同

29、的菌落来自同一个种，于是挑选某一种菌落的微生物，菌落来自同一个种，于是挑选某一种菌落的微生物，经过几次相同的培养过程后，就得到了纯种。应用固经过几次相同的培养过程后，就得到了纯种。应用固体培养基，科赫分离出了炭疽芽孢杆菌、霍乱弧菌、体培养基，科赫分离出了炭疽芽孢杆菌、霍乱弧菌、结核杆菌等。结核杆菌等。19051905年科赫因结核杆菌的研究成果而年科赫因结核杆菌的研究成果而获诺贝尔生理学奖。获诺贝尔生理学奖。单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖时，就单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖时，就会形成一个肉眼可见、具有一定形态结构子细胞会形成一个肉眼可见、具有一定形态结构子细胞群体，叫做群体，叫做菌

30、落菌落。菌落是鉴定菌种的重要依据。菌落是鉴定菌种的重要依据。摸底考试复习安排摸底考试复习安排 阅读笔记阅读笔记 复习学案（重点是自己复习学案（重点是自己不会的、做错的不会的、做错的习题）习题）作业作业2011高考总复习高考总复习-学生用书学生用书-生物生物P151161 要求：填写基础知识、例题、考点训练要求：填写基础知识、例题、考点训练2011高考总复习高考总复习-学生卷学生卷-生物生物P107112；P114116（去掉（去掉12、13、19、23、25、30）1）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基制备牛肉膏蛋白胨固体培养基物质物质牛肉膏牛肉膏蛋白胨蛋白胨NaClNaCl琼脂琼脂水水重量重量5g5

31、g10g10g5g5g20g20g定溶至定溶至100mL100mL 称量称量 按比例称取各种物质，注意事项：牛肉膏要按比例称取各种物质，注意事项：牛肉膏要放在称量纸上称量，牛肉膏、蛋白胨都易吸潮，放在称量纸上称量，牛肉膏、蛋白胨都易吸潮，称取时动作要迅速，称后及时盖上瓶盖称取时动作要迅速，称后及时盖上瓶盖。计算计算溶化：溶化：先将牛肉膏连同称量纸一起放入烧杯，加少量先将牛肉膏连同称量纸一起放入烧杯，加少量水，加热至牛肉膏溶化并与称量纸分离后，用玻璃棒取水，加热至牛肉膏溶化并与称量纸分离后，用玻璃棒取出称量纸。加入蛋白胨和氯化钠，用玻璃棒搅拌使之溶出称量纸。加入蛋白胨和氯化钠，用玻璃棒搅拌使之溶

32、解，再加入琼脂，搅拌，待溶解后，加自来水定溶至解，再加入琼脂，搅拌，待溶解后，加自来水定溶至100mL100mL。灭菌：灭菌：将配制好的培养基放到锥形瓶中（瓶口加棉塞，将配制好的培养基放到锥形瓶中（瓶口加棉塞，包上牛皮纸），连同培养皿（包上牛皮纸），连同培养皿（3 35 5套，用几层报纸包好）套，用几层报纸包好）一起放到高压锅内灭菌。一起放到高压锅内灭菌。2 2、制备培养基的操作排序、制备培养基的操作排序 溶化（使各种原料、琼脂等加热溶化）溶化（使各种原料、琼脂等加热溶化）灭菌灭菌 调调PHPH值值 计算（各成分用量）计算（各成分用量）称量称量 倒平板倒平板(培养基冷却至培养基冷却至50,50

33、,倒入培养皿倒入培养皿)正确的操作顺序：正确的操作顺序：_ 为什么分离不同的微生物要采用不同的稀释度？为什么分离不同的微生物要采用不同的稀释度？测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量，选用的稀释范围相同吗？的细菌的数量，选用的稀释范围相同吗？接种环接种环接种针接种针基因工程基因工程基本工具基本工具操作步骤操作步骤基本原理基本原理细胞细胞工程工程植物细胞工程植物细胞工程动物细胞工程动物细胞工程植物组织培养植物组织培养植物体细胞杂交植物体细胞杂交动物细胞培养动物细胞培养动物细胞融合动物细胞融合单克隆抗体单克隆抗体核移植核移植原理、过程、原理

34、、过程、条件及应用条件及应用同化作用与异化作用同化作用与异化作用新陈代新陈代谢谢同化同化作用作用异化异化作用作用概念：概念：摄取转变摄取转变自身物质，自身物质，储存能量储存能量外界环的外界环的营养物质营养物质概念：概念：部分自部分自身物质身物质分解分解终产物，终产物，释放能量释放能量排出排出体体外外类型：类型：自养型：自养型：异养型：异养型：无机无机物物有机有机物物光合作用光合作用 化能合成作用化能合成作用利用利用现成现成的的有机物有机物维持生命维持生命类型类型需氧型：需氧型：厌氧型：厌氧型：需要需要氧气氧气来分解体有机物来分解体有机物必须生活在必须生活在无氧无氧的环境中的环境中新陈代新类型：

35、自养需氧型新陈代新类型：自养需氧型（如：蓝藻、硝化细菌）；（如：蓝藻、硝化细菌）；异养异养需氧型需氧型（如：人）（如：人）；自养厌氧型；异养厌氧型；自养厌氧型；异养厌氧型（乳酸菌）（乳酸菌）（碳）（碳）专题专题5 5 微生物专题微生物专题微生物微生物概念及概念及种类种类微生物微生物培养培养微生物微生物分离和分离和计数计数微生物微生物应用应用增殖方式：二分裂增殖方式：二分裂增殖方式：复制式增殖增殖方式：复制式增殖增殖方式：出芽生殖增殖方式：出芽生殖思考：思考：1 1、所有的培养基都必须含碳源、氮源、水、所有的培养基都必须含碳源、氮源、水、无机盐吗？无机盐吗？2 2、培养基中的营养要素，除了水以外

36、的无机、培养基中的营养要素，除了水以外的无机 物只能是无机盐？物只能是无机盐？3 3、COCO2 2既自养型生物的碳源也是能源物质？既自养型生物的碳源也是能源物质？4 4、利用动物细胞培养液培养病毒，行吗？、利用动物细胞培养液培养病毒，行吗？否；可以无碳源，也可无氮源否；可以无碳源，也可无氮源否；碳源和氮源也可能是无机物否；碳源和氮源也可能是无机物否；光能或化学能否；光能或化学能病毒无细胞结构，只能寄生在活细胞中生存。病毒无细胞结构，只能寄生在活细胞中生存。所以，要利用所以，要利用活细胞活细胞培养病毒。培养病毒。一、微生物概念及种类一、微生物概念及种类 1 1、概念：是指自然界中那些形态微小、

37、概念：是指自然界中那些形态微小、结构简单，结构简单，通常通常要用光学显微镜或电要用光学显微镜或电子显微镜才能看清楚的生物。子显微镜才能看清楚的生物。2 2、种类：无细胞结构、种类：无细胞结构病毒病毒、原核生原核生物界物界（细线支蓝衣）（细线支蓝衣）、真菌界真菌界（酵母（酵母菌、霉菌、蘑菇等）菌、霉菌、蘑菇等）、原生生物界原生生物界（草履虫、变形虫等）草履虫、变形虫等）3 3、代谢特点：异常旺盛、代谢特点：异常旺盛微生微生物所物所需的需的营养营养要素要素碳源碳源氮源氮源水水无机盐无机盐无机碳源：无机碳源：CO2等等自养型自养型有机碳源：有机碳源：葡萄糖等葡萄糖等异养型异养型N2：固氮菌（根瘤菌等）：固氮菌（根瘤菌等）NH3：硝化细菌：硝化细菌其他：铵盐、硝酸盐、尿素、其他：铵盐、硝酸盐、尿素、蛋白胨蛋白胨特殊营养物质（维生素、氨基酸和碱基等）、特殊营养物质（维生素、氨基酸和碱基等）、PHPH、温度、氧气等、温度、氧气等