第十九章补体参与的反应及补体测定ComplementMediated

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1、第十九章 补体参与的反应及补体测定Complement Mediated Reactions andAssays of Complement第 一部分目 的要求 和教学 内容一、目的要求掌握:免疫溶血试验及CH,。测定的原理及意义;熟悉:补体参与的反应试验类型、 补体依赖的细胞毒试验的原理、旁路途径溶血活性测定;了解:补体结合试验和免疫黏附 试验的原理、C4和B因子活性测定的原理。二、教学内容 1补体参与的反应:免疫溶血试验,补体结合试验,补体依赖的细胞毒试验,免疫 黏附试验。2补体的测定:补体活性的测定,补体含量的测定,补体测定的临床意义。第二 部分 测 试 题一、选择题(一)单项选择题(A

2、型题)1溶血素效价滴定判定的温度和时间是A. 37C、30minB. 4C、30minC. 37C、 15minD. 40C、 30minE. 56C、 30min2. 在补体连锁反应中最终形成的攻膜复合体是A. C5b6789B. C4b2a3bC. C4b2bD. C3bBbE. C3b4b3. 下列哪项试验没有补体参加A. CH试验B. CDC试验C. 溶血空斑试验D. ADCC试验E. Raji细胞试验4. 补体结合试验中所用补体是哪种动物血清A. 马血清B. 绵羊新鲜血清C. 豚鼠新鲜血清D. 大白鼠新鲜血清E. 山羊新鲜血清5下列哪项试验不能用于补体缺陷的过筛诊断A. CDC式验B

3、. CH50试验C. 血清C3含量测定D. 血清Cl含量测定E. C4溶血活性试验6. B因子溶血活性测定中,在缓冲液中加.),.EGTA是为了螯合反应体系中的A. Mg2+离子B. Ca2+离子C. zn2+离子D. Fe3+离子E. P3+离子7. 在单个补体成分溶血活性测定中,用氨水处理是为了去除哪个补体成分A. C1B. C2C. C4D. C5E. C38. 检测免疫小鼠脾细胞分泌到细胞外的抗SRBC抗体的试验是A. CH50试验B. CFTC. APH50测定D. B因子活性测定E. 溶血空斑试验9. 利用溶血反应作为指示系统,判断抗原抗体是否相对应的试验是A. CHs50试验B.

4、 CFT C. APH50测定D. B因子活性测定E. 抗补体试验10. 补体经典途径的最重要激活物是A. 特异性抗原B. 特异性抗体C. 抗原抗体复合物D细菌脂多糖E、酵母多糖11. 正常血清中,补体含量最低的是A. C1qB. C5aRC. C1rRD. DfE. C1INH12. 正常血清中,补体含量最高的是A. C1B. C2C. C3D. C4E. C513. 补体激活的经典途径的始动分子是A. C1sB. C1rC. C1qD. DfE. C5aR14. 补体激活的替代途径的始动分子是A. C1qB. C1rC. C1sD. C3bE. C3d15在CH50试验中,溶血程度与补体含

5、量的关系为A. 直线B. 抛物线C. 双曲线D. S形曲线E. 正态分布16.CH50试验是以什么作为终点指标A. 100%溶血B. 80%溶血C. 75%溶血D. 50%溶血E. 25%溶血17.SRBC悬液浓度一般为A. 12%B. 25%C. 56%D. 79%E. 10%18. 溶血素即A. SRBCB. 抗原C补体D. ICE. 抗SRBC抗体19. 经典途径激活血清补体作用最强的IgG是A. IgG1B. IgG2C. IgG3D. IgG4E. IgM20. 补体系统经典激活途径与旁路激活途径的汇合点是A. C5B. C4C. C3D. C2E. C121. C3a和C5a的生物

6、学作用有A. 杀菌作用B. 过敏毒素作用C. 中和病毒作用D. 调理作用E. 吞噬功能22. 能使补体而不使抗体灭活的温度和作用时间是A. 37C,1hB. 45C,30minC. 56C,30minD. 60U,30minE. 80C,30min23. C3b的抑制因子是A. I、H 因子B. H 因子, 过敏毒素灭活素C. 过敏毒素灭活素,S蛋白D. H因子,S蛋白E. I因子,过敏毒素灭活素24. 补体占总蛋白的含量为A. 25%B. 15%C. 10%D. 1%E. 0.5%25. C4的激活剂是A. C1qB. C1rC. C1sD. C1qrsE. C526. 识别抗原抗体复合物的

7、补体是A .C1sB. C1rC. C1qD. C2E. C1qrs27. 当抗体与相应的抗原结合后,在何种情况下方能激活补体A. CH1的补体结合点暴露B. CH2的补体结合点暴露C. CH3的补体结合点暴露D. 借助抗原作桥梁E. 直接同补体结合28.IgA、IgD 和IgE之所以不能与Clq结合,是因为A. 分子结构简单B. VH 无补体结合点C. Fab段结构与补体相差甚远D. Fc段无补体结合点E. VL无补体结合点29.常规的补体滴定法是以什么来定 “实用单位”A. 以发生全溶的补体最少用量B. 以发生全溶的补体最高稀释度C. 以发生全不溶的补体最高稀释度D. 以微不溶的补体最低用

8、量E. 以发生全溶的补体最低稀释度30补体滴定时,若1:60的0.12ml补体为1个“实用单位”,则0.2ml2个“实用单位”为A. l:60B. 1:50C. 1:40D. 1:30E. 1:2531. CFT前的抗原抗体方阵滴定的目的在于A. 选择抗原抗体最适比例B. 避免抗原抗体复合物太多C. 使抗原抗体复合物结合补体的量最多D. 使抗原抗体复合物形成最少E. 选择前带现象32. CFT检测系统中血清作56C30分钟处理,目的在于A. 破坏血清中的抗羊红细胞成分B. 增强血清中抗体同抗原结合的能力C. 破坏补体,去除一些非特异反应D. 提高血清中抗体的激活状态E. 增加补体活性33. 溶

9、血反应的检测试剂中加入少量的钙、镁离子的目的是A. 有助于补体的激活B. 维持合适的pHC. 抑制细菌的生长D. 抑制溶血反应E. 保持溶液的等渗压34. 在补体参与的溶血试验中,应使用A. 个单位的溶血素B. 二个单位的溶血素C. 三个单位的溶血素D. 四个单位的溶血素E. 五个单位的溶血素35. 在溶血素滴定时,(二)多项选择题(x型题)1补体参与的反应包括A. 免疫溶血试验B. 补体结合试验c.补体依赖的细胞毒试验D. 免疫黏附试验E. 白细胞趋化试验2补体含量的检测方法有A单向免疫扩散法B. 火箭免疫电泳C. 免疫比浊法D. 酶联免疫吸附试验E. 放射免疫分析法3. 检测补体经典激活途

10、径常用的指标有A. CH50试验B. C4活性测定C. APH50测定D. B因子活性测定E. 溶血空斑试验4. 检测补体旁路激活途径常用的指标有A. CH50试验B. CFTC. APH50 测定D. B因子活性测定E. 溶血空斑试验5. 通过补体受体进行的试验有A. 免疫黏附试验B. CH50试验C. ADCC一效应D. 凝集试验E. Raij细胞试验6. 下列哪些试验和补体系统无关A. 免疫黏附试验B. CH50试验c. ADCC效应D. 凝集试验E. CDC试验7. 参与免疫溶血试验的成分有A. 溶血素B. 绵羊红细胞C补体D.人红细胞E.抗人红细胞抗体(三).配伍题问题1一2A.Hf

11、B. CR2C. S蛋白D. IfE. CR5 1能使C5b7失去膜结合活性的是 2能结合液相反应物,清除IC的是二、填空题1补体参与的反应试验类型包括()、()、()和().2参与补体结合试验的试剂可分为()和()两个系统。3.III型变态反应疾病患者的血清中补体水平()。4补体的最佳保存温度是()。5. CH50试验中有()、()和()参与反应。三、名词解释1. 免疫溶血试验(immunohemolysis test) 。2. 补体结合试验(complement fixation test, CFT) ,3. 血清总补体溶血活性测定(complement hemolysis 50 %ass

12、ay, CHso assay, CHso试 验)4. 旁路途径溶血活性测定 (alternative pathwayhemolysis 50assay,APHsoassay APH50试验)5. 致敏红细胞(sensi tized red cell)四、简答题1 .免疫溶血试验的原理和用途。2. 补体结合试验的影响因素是什么,如何控制?3. 如何进行补体单个成分的测定?4. 补体结合试验和抗补体试验有何不同?5. 补体依赖细胞毒试验的原理。6. 免疫黏附试验的原理。7. 补体测定有何临床意义?五、论述题1. 试比较两种补体激活途径。2试述CFT的原理及结果解释。参考答案与题解一、选择题(一)单

13、项选择题(A型题)1. A 2. A 3. D4. C 5. A 6. B 7. C 8. E 9. B 1 0. C 11.D 12.C 13.C 14.D 15.D16.D 17.B 18.E 19.C 20.C 21.B 22.C 23.A 24.C 25.C 26.E 27.B 28.D 29.A 30.B31.A 32.C 33.A 34.B35.A(二)多项选择题【X型题)1 . ABCD 2. ABCDE3. AB 4. CD 5. AE6. CD7. ABC(三).配伍题1.C 2.E二、填空题 1免疫溶血试验补体结合试验补体依赖的细胞毒试验免疫黏附试验 2指示系统反应系统3降

14、低4.一20C 以下5绵羊红细胞溶血素人血清三、名词解释1. 免疫溶血试验:补体能使已被抗体致敏了的红细胞发生溶血,实验时将三者混合, 置37 CC 30min,如条件适合溶血即可发生。2. 补体结合试验:抗原抗体复合物可结合补体,而游离的抗原或抗体则不能,以溶 血素和绵羊红细胞作为指示系统,指示补体是否被结合,从而可判断抗原抗体是否相对 应。它可用已知抗原检测未知抗体,也可用已知抗体检测未知抗原。3. 50补体溶血试验:用于血清总补体溶血活性测定,根据免疫溶血试验原理设计。 当红细胞与溶血素的量一定时,溶血程度与补体的量及活性正相关,因50溶血作为反 应终点比以1 oo%溶血作为终点更敏感,

15、故以50%溶血作为反应终点。4. 50%旁路途径补体溶血活性测定:正常情况下,涎酸可抑制B因子活性。家兔红 细胞所含涎酸量低于其他动物的红细胞,可以激活血清中的B因子,引起旁路途径活化, 导致兔红细胞溶解。在红细胞量一定时,溶血程度与血清中参与旁路活化的补体量及活性 呈正相关。5. 致敏红细胞:指与溶血素结合的绵羊红细胞。四、简答题1. 原理是补体能使已被抗体致敏了的红细胞发生溶血。免疫溶血试验所参与的成分 有补体,抗原(SRBC)及抗体(溶血素),这三种成分中如有两种是已知的就可测知第三个成分,稀释该成分可测定其效价或含量。如溶血素的滴定,溶血空斑试验,CH50试 验,补体结合试验,抗补体试

16、验等。2. 补体结合试验有五种成分参与,每一成分的变更均可影响结果。如某些游离的抗 原或抗体能结合补体具有抗补体能力,补体不能过多或过少,否则将影响溶血素和绵羊红 细胞的溶血,故补体结合试验的成分应加以滴定并设立多种对照。3. 补体单个成分可测其溶血活性或含量。测定溶血活性应先制备缺乏该补体单个成 分的“补体试剂。而后利用免疫溶血试验的原理,将致敏红细胞与“补体试剂”混合, 再加入待测血清,孵育后,溶血程度与待测血清中的该补体成分的溶血功能有关。测定含 量可用已知抗体以单向琼脂扩散等方法进行。五、论述题1.两种补体激活途径的比较 经典途径替代途径激活物抗原抗体(IgG1、2、3,IgM)复合物

17、脂多糖、酵母多糖等 参与成分 C1C9 C3、C5C9,B、D、P因子始动分子 C1q C3b所需离子 Ca2+、 Mg2+ Mg2+C3 转化酶 C4b2a C3bBbC5 转化酶 C4b2a3b C3b) nBb 或( C3b) nBbP2. 试述CFT的原理及结果解释。 补体能与任何抗原抗体复合物结合,不与单独的抗原或抗体结合,且补体与抗原抗体复合 物结合后不再游离。 补体结合试验参与成分共5种,分属3个系统。 若反应系统中抗原与抗体相对应,则发生结合,进一步结合补体;加入指示系统后不发生 溶血是为阳性,反之则发生溶血是为阴性。 补体结合试验在抗原、抗体的定性与定量检测以及抗原性差异分析中都有着广泛的用途。

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