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1、11微生物实验课注意事项微生物实验课注意事项禁止禁止不穿白大衣进入实验室；禁止禁止在实验室内吃东西、吸烟；不得高声喧哗，随 处走动；用酒精灯点燃酒精灯；把实验室内任何物品带出室外；病原材料病原材料污染桌面、地板等或误吸入口，应立即报告教师进行处理；爱护实验仪器设备，损坏仪器要赔偿损坏仪器要赔偿；实验完毕，废弃物放入指定地点，桌面理清洁，洗手后方可离室。值日同学负责打扫实验值日同学负责打扫实验室室，并关好水电、门窗方可离开。22实验一 革兰染色法33细菌染色的方法细菌染色的方法单染法单染法:采用一种染料染色采用一种染料染色,只能观察细菌的形态和排列特征，不能观察细菌的染色特只能观察细菌的形态和排
2、列特征，不能观察细菌的染色特性和进行鉴别。性和进行鉴别。复染法（鉴别染色）复染法（鉴别染色）:采用两种或两种以上的不同染料进行先后染色，使采用两种或两种以上的不同染料进行先后染色，使不同种类不同种类的细的细菌、同种细菌的菌、同种细菌的不同结构不同结构，分别，分别染上不同染上不同的颜色，以便鉴别细菌。的颜色，以便鉴别细菌。44革兰染色法革兰染色法55革兰染色法的原理革兰染色法的原理66实验材料与方法实验材料与方法7788初染初染1min结晶紫结晶紫媒染媒染1min碘液碘液脱色脱色15-20s复染复染1min复红复红/苯酚苯酚95%乙醇乙醇G+G-革兰氏染色步骤与现象革兰氏染色步骤与现象注意：每一
3、步染色后水冲，甩干水每一步染色后水冲，甩干水99P3P31010酒精脱色。酒精脱色。过度，过度，过短，过短，。染色过程中勿使染色液稀释。染色过程中勿使染色液稀释。选用幼龄的细菌。选用幼龄的细菌。1111a.先用擦镜纸将油镜头上的油擦去。先用擦镜纸将油镜头上的油擦去。b.用擦镜纸沾少许二甲苯（用擦镜纸沾少许二甲苯（）将镜头擦将镜头擦2-3次。次。c.再用干净的擦镜纸将镜头擦再用干净的擦镜纸将镜头擦2-3次。次。1212金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌(10100)大肠杆菌大肠杆菌(10100)染色结果染色结果1313染色结果螺形菌Spiral bacterium1414革兰染色意义革兰染色意义鉴别细
4、菌鉴别细菌选择抗菌药物选择抗菌药物研究细菌的致病性研究细菌的致病性1515选择抗菌药物选择抗菌药物常见的革兰氏阳性菌：葡萄球菌属（主要是常见的革兰氏阳性菌：葡萄球菌属（主要是金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌等）、链、表皮葡萄球菌等）、链球菌属（球菌属（肺炎链球菌肺炎链球菌、草绿色链球菌、草绿色链球菌、肠球菌肠球菌等）、白喉杆菌、等）、白喉杆菌、炭疽杆菌炭疽杆菌、破伤风杆破伤风杆菌菌、蜡样芽孢杆菌等，其中，金黄色葡萄球菌、肠球菌等为临床重要等病原菌、蜡样芽孢杆菌等，其中，金黄色葡萄球菌、肠球菌等为临床重要等病原菌革兰氏阳性菌通常对革兰氏阳性菌通常对青霉素类、第一（或第二）代头孢菌素青霉
5、素类、第一（或第二）代头孢菌素等高度敏感等高度敏感，青霉素可为，青霉素可为化脓性细菌感染可首选药物化脓性细菌感染可首选药物。1616选择抗菌药物选择抗菌药物常见的革兰氏阴性菌：沙门氏菌属、志贺氏菌属（常见的革兰氏阴性菌：沙门氏菌属、志贺氏菌属（痢疾杆菌痢疾杆菌等）、嗜血杆菌属（杜等）、嗜血杆菌属（杜克雷嗜血杆菌、流感嗜血杆菌等）、克雷嗜血杆菌、流感嗜血杆菌等）、霍乱弧菌霍乱弧菌等。革兰氏阴性菌在院内感染中的细等。革兰氏阴性菌在院内感染中的细菌感染中占了大约菌感染中占了大约65%，且大多菌株容易对抗菌药物耐药，且大多菌株容易对抗菌药物耐药 革兰氏阴性菌对革兰氏阴性菌对第三代头孢、氨基糖苷类、抗假
6、单胞菌属的青霉素类、多粘菌素第三代头孢、氨基糖苷类、抗假单胞菌属的青霉素类、多粘菌素等等高度敏感，对头霉素类和第二代头孢菌素也较敏感。例如氟哌酸对革兰染色阴性杆高度敏感，对头霉素类和第二代头孢菌素也较敏感。例如氟哌酸对革兰染色阴性杆菌有效，如肠道病、腹泻为常用药菌有效，如肠道病、腹泻为常用药。1717研究细菌的致病性研究细菌的致病性革兰阳性菌可产生外毒素使人致病。革兰阳性菌可产生外毒素使人致病。革兰阴性菌主要以内毒素使人致病。（革兰阴性菌主要以内毒素使人致病。（LPS作为作为G-菌内毒素致病菌内毒素致病）1818实验步骤实验步骤观看鞭毛、荚膜、芽孢的示范片观看鞭毛、荚膜、芽孢的示范片绘图、写实
7、验报告绘图、写实验报告1919 芽胞芽胞(nuclear material ornucleoid)(nuclear material ornucleoid)枯草杆菌芽孢的观察枯草杆菌芽孢的观察芽孢：休眠体，不利环境下产生，耐受各种极端环境芽孢：休眠体，不利环境下产生，耐受各种极端环境。2020 荚膜（荚膜（capsule)荚膜：多糖，包裹在菌体外围，保护菌体荚膜：多糖，包裹在菌体外围，保护菌体2121细菌鞭毛的观察细菌鞭毛的观察鞭毛：运动，菌落形态。鞭毛：运动，菌落形态。2222本次实验课结束本次实验课结束请确保油镜头擦拭干净请确保油镜头擦拭干净交作业，值日同学留下交作业，值日同学留下下周实验课（细菌的人工培养）下周实验课（细菌的人工培养）再见！再见！
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