免疫学技术ppt课件

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1、在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确 可对抗原或抗体进行定性、定量、定位的检测影响因素:电解质、温度酸碱度在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确免疫标记技术:是指用荧光素、放射性同位素、酶、发光剂或电子致密物质等作为示踪剂,标记抗体或抗原进行的抗原抗体反应 在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确特点:高度灵敏、特异、快速,定性、定量、定位分类:免疫酶技术、免疫荧光技术、放射 免疫技术、

2、免疫电镜技术、免疫胶 体金技术和发光免疫测定在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确.ELISA.免疫组化.荧光抗体标记.荧光原位杂交（FISH）.分光光度法在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确以酶标记抗体或抗原进行的抗体抗原反应.酶结合物具有双功能:高度特异的免疫反应、生物催化放大作用基本方法:间接法、双抗体夹心法、竞争法、生物素-亲和素系统在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确a.将

3、已知可溶性抗原吸附于载体b.温育后清洗c.加入可能含特异性抗体的待检液d.温育后清洗e.加入酶标记的二抗f.温育后清洗g.加入酶作用底物h.测定反应颜色深浅在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确a.将已知抗体吸附于载体上b.温育后清洗c.加入可能含特异性抗原的待检液d.温育后清洗e.加入酶标记特异性抗体f.温育后清洗g.加入酶作用底物h.测定颜色反应深浅在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确a、将已知抗体吸附于载体上b、温育后清洗c、加入可能含特异性抗原的

4、待检液和酶标记的已知抗原液d、温育后清洗e、加入酶作用底物f、测定颜色反应深浅在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确生物素-亲和素系统（biotin-avidin system）生物素:一种维生素H,经活化后可与抗体、抗原、酶以多 配一方式共价结合,且不影响它们的活性 亲和素:从卵蛋白中提取的一种碱性糖蛋白,可与 酶偶合,以一配多的方式对生物素有很强的亲和力 BAS用于检测的基本方法：BAB法或BRAB法/BA法/ABC法在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很

5、明确在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确 1.待检样品不应反复冻融 2.加样前充分混匀样品 3.洗板:保证洗涤次数,确保冲洗干净 4.加完终止液在要求时间内上机检测,反应温度最好在37 在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确1.血清或血浆2.尿液3.脑脊液、关节液等体液4.细胞培养上清等在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确耗材:移液器、吸头、酶标板、滤纸试剂:酶标抗体、抗体稀释液、封

6、闭液、底物 溶液、终止液仪器:酶标仪在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确1.根据标准品的含量及检测OD值结果,应用线性回归方程进行统计分析,可求得待测样品的定量值2.上机前将标准品的数量及含量按要求在酶标仪上进 行设置,机器自动计算打印出标准曲线及各待测样品的定量结果在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确免疫组化细胞阳性程度与抗原含量、分布密度、标

7、记方法有关.一般抗原含量越多、密度越高、标记方法越敏感,阳性显色则越强.淡黄色,弱阳性;黄色,阳 性;棕黑色,强阳性.结果判断中,后两者有意义,前者除标本处理和方法学因素外,与细胞轻度异常表达及某些细胞摄取了周围组织抗原有关 在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确免疫组化阳性细胞反映抗原在细胞中的定位和分布情况.阳性细胞以拟标记的细胞为前提,阳性表达必须在细胞特定的抗原部位,若不在抗原所在部位的阳性表达和非目标细胞即使

8、阳性也不应作为判断依据.根据抗原在细胞中分布和阳性颗粒沉淀部位可分5种类型：在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提

9、出的问题也很明确在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确 在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题

10、来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确.必须设染色对照 每批染色都要以特异性阳性对照和阴性对照为基础.没有阳性对照 就不能做出真正阴性结果的判断;没有阴性 对照,也就不能做出真正阳性结果的判断.没有对照的免疫组化结果是不可信的在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确假阴性结果的原因主要是

11、：（1）抗体已失活或浓度不当（2）组织自溶(抗原扩散)导致抗原消失,特别 长期固定标本,应多用新鲜标本（3）操作步骤不当,如反应时间不够或过久、洗脱不够或温度过高（4）组织或细胞中抗原的含量很低在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确操作注意问题：1.石蜡切片和冰冻切片均可,要注意防止脱片2.充分消除内源性过氧化酶和非特异性染色3.PBS洗涤要充分4.要设阴性和阳性对照5.显色注意底物要适量、时间要严格控制在整堂课的教学

12、中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确1.均匀的背景染色:酶-底物反应时间过长、孵育切片干燥、一抗或二抗稀释度不够、切片洗涤不充分、封闭用的正常血清不对2.部分区域背景着色:切片部分区域干燥、显色反应物在封片介质中可溶、造成弥散3.部分区域不着色:脱蜡不完全、切片部分区域干燥在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而

13、问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确6.内源性酶活性:H2O2-甲醇封闭不当7.脱片:切片无粘附试剂、切片不干净、组织 在贴片前已经充分固定8.核轮廓模糊:切片已干燥、苏木素染液欠佳9.非特异性染色:底物未过滤、抗体未离心10.阳性反应太弱:抗体或其它试剂活性下降、显色反应时间过短、抗体的稀释度或孵育 时间不够、加抗体时切片上缓冲液过多在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确11.切片镜下模糊或黑点沉着:脱水不彻底、进入二甲苯前加一步等量石碳酸/二甲苯 混合液、温箱干燥替代脱水过程在整堂课的教学中，刘教师总

14、是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确 免疫荧光实验的注意事项 1.反应过程一定要避光,操作过程尽量避光 2.操作过程结束,

15、尽快荧光显微镜下看结果 3.注意镜下结合荧光与非结合荧光的区别 4.每次实验应该提前激发荧光显微镜光源 5.使用荧光显微镜时间1-2h为宜在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确荧光原位杂交（Fluorescence in situ hybridization，FISH）是建立在核酸分子杂交和放射性原位杂交基础上的非放射性原位杂交技术，将标记的核酸探针与细胞或组织中的核酸进行杂交在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题

16、来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也

17、很明确在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确分光光度法常见用途：1.核酸的定量 是分光光度计使用频率最高的功能.可以定量溶于缓冲液的寡核苷酸,单链、双链DNA以及RNA.最高吸收峰的吸收波长260 nm2.蛋白质定量 在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的

18、问题也很明确在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确常用的波长范围为：(1)200400nm的紫外光区(2)400760nm的可见光区(3)2.525m的红外光区仪器：紫外分光光度计、可见光分光光度计、红外分光光度计或原子吸收分光光度计在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由

19、浅入深，所提出的问题也很明确在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确在整堂课的教学中，刘教师总是让学

20、生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确