乳酸检测试剂盒

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1、乳酸检测试剂盒(乳酸脱氢酶微板法)简介:孚匕酸(Lactic acid , LD)又称2-羟基丙酸是一种化合物,是一种含有羟基的羧酸,分子 式是c3h6o3,参与生物化学很多反应过程。孚匕酸检测试剂盒俘L酸脱氢酶微板法)其检测原理是在NAD存在条件下,乳酸脱氢酶 (LDH)催化乳酸生成丙酮酸,同时生成NADH。在碱性条件下显色剂与丙酮酸生成复合物, 并使平衡偏向乳酸氧化为丙酮酸的方向驱动反应完成,生成的NADH与乳酸为等量摩尔。 通过分光光度比色法(酶标仪)测定340nm处吸光度,据此通过比色分析就可以计算出LD 水平。该试剂盒可用于检测细胞或组织的裂解液或匀浆液、血浆、血清等样品中内源性的

2、乳酸含量。该试剂盒仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。组成:_编号名称-TC0731110TStorage试剂(A):乳酸标准(20mmol/L)1ml-20C避光试剂(B):孚L酸标准稀释液1mlRT试剂(C):LD显色液C1: LD Assay buffer5ml4C避光C2: NAD2支-20C避光C3: LDH solution15-20C避光试剂(D): LD终止液30mlRT使用说明书1份操作步骤(仅供参考):1、准备样品: _x0001_ 血浆、血清、尿液及其他体液样品:血浆、血清按照常规方法制备后可以直接用于本试剂盒的测定,尿液通常也可以直接用于测定,-20弋冻存。 _

3、x0001_ 细胞或组织样品:取恰当细胞或组织裂解液,如果有必要需进行适当匀浆,低速离心取上清,-20弋冻存,用于LD的检测。 _x0001_ 高浓度样品:如果样品中含有较高浓度的LD,可以使用原有的裂解液或PBS等进行稀释,如鸡血清、血浆可稀释5 - 10倍后检测。2、酉己制标准品工作液:取乳酸标准(20mmol/L) 0.1ml溶解于0.3ml乳酸标准稀释液,使 浓度达到5mmol/L ,即为标准品工作液-乳酸标准(5mmol/L)。4弋避光保存2个月有 效。3、LD检测:按照下表设置空白孔、对照孔、标准孔、测定孔,溶液应按照顺序依次加入, 并注意避免产生气泡。如果样品中的LD含量过高,可

4、以减少样品用量或适当稀释后再 进行测定。样品的检测最好能设置平行孔。加入物空白孔对照孔标准孔测定孔蒸馏水/p l540待测样品(血清、血浆、体液等)/p l55乳酸标准(5mmol/L)/p l5LD显色液/p l404040混匀,37C水浴准确保温5min,立即加入终止液终止反应。LD终止液/p l2402402402404、用酶标仪检测,以蒸馏水调零,读取空白孔、对照孔、标准孔、测定孔的340nm吸光 度(即A空白、A对照、A标准、A测定),-般应数小时内检测完毕。计算结果:血清、血浆、尿液、脑脊液乳酸(mmol/L)二(A测定-A对照)/(A标准-A空白)x5 组织乳酸(mmol/g)二

5、(A测定-A对照)/(A标准-A空白)x5/待测样品蛋白浓度(g/L)健康成年人安静状态空腹静脉血0.6 - 2.2mmol/L健康成年人安静状态空腹动脉血0.3 - 1.47mmol/L健康成年人尿液乳酸排除量5.5 - 232mmol/d新生儿毛细血管血1.2 4.4mmol/L016儿童脑脊液1.1 2.8mmol/L注意事项:1、本法适用于自动分析仪,分别监测测定管和标准管的吸光度升高速率,计算乳酸的浓度。2、如果没有分光光度计,也可以使用酶标仪测定。3、抗凝剂用肝素钠-氟化钠较好。抗凝血样品置于冰浴中送检,尽快分离出血浆等。4、草酸抗凝剂对LDH有一定的抑制作用。5、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。有效期:6个月有效。

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