基因工程学习案

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1、专题 1 基因工程【复习要求】1说明基因操作的基本工具的来源及作用2举例说明基因工程的基本操作程序【预习成果展示】1.蛋耳质工程基因工禮 F-应用2.与DNA分子相关的酶DNA连接酶DNA來命X施R作用底物作用部位作用结果小组合作探究】一思考：怎样书写黏性末端？限制性内切酶I的识别序列和切点是一G/GATCC，限制性内切酶II的识别序列和切点是一（GATC 。在质粒上有酶I的一个切点，在目的基因的两侧各有1个酶II的切点，用上述两种酶分别切割质 粒和含有目的基因的 DNA。 请画出质粒被限制酶I切割后所形成的黏性末端。 请画出目的基因两侧被限制酶II切割后所形成的黏性末端。 在DNA连接酶的作

2、用下，上述两种限制酶切割后形成的黏性末端是否能连接起来，为什么?规律提升：限制酶切割后形成黏性末端的步骤： 根据序列完成 找到酶切位点 目的基因位于识别序列中间，限制酶切割会产生个切口，个黏性末端。二基因工程操作的基本程序 思考1.基因表达载体的构成（用图的形式表示各部分及位置关系）。2. 标记基因能作为检测基因工程成功的依据吗?应该怎样检测才能判定基因工程的成功与否?3外源基因之所以在受体细胞实现表达的原因.【当堂检测】1下列关于DNA连接酶作用的叙述正确的是A. 将单个核苷酸加到某DNA片段末端形成磷酸二酯键B将断开的两个DNA片段的骨架连接起来，重新形成磷酸二酯键C. 连接两条DNA链上

3、碱基之间的氢键D. 只能将双链DNA片段互补的黏性末端连接起来，而不能将双链DNA片段平末端连接2.由同一种限制酶切割成的黏性末端是（）ABCD3（06江苏）我国科学家运用基因工程技术，将苏云金芽孢杆菌的抗虫基因导入棉花细胞并成功表达， 培育出了抗虫棉。下列叙述不正确的是A基因非编码区对于抗虫基因在棉花细胞中的表达不可缺少B. 重组DNA分子中增加一个碱基对，不一定导致毒蛋白的毒性丧失C. 抗虫棉的抗虫基因可通过花粉传递至近缘作物，从而造成基因污染D. 转基因棉花是否具有抗虫特性是通过检测棉花对抗生素抗性来确定的4.（11海南）回答有关基因工程的问题：（1）构建基因工程表达载体时，用不同类型的

4、限制酶切割DNA后，可能产生粘性末端，也可能产生_末端。若要在限制酶切割目的基因和质粒后使其直接进行连接，则应选择能使二者产生 （相同，不同）粘性末端的限制酶。（2）利用大肠杆菌生产人胰岛素时，构建的表达载体含有人胰岛素基因及其启动子等，其中启动子的作用是。在用表达载体转化大肠杆菌时，常用处理大肠杆菌，以利于表达载体进入：为了检测胰岛素基因是否转录出了 mRNA,可用标记的胰岛素基因片段作探针与mRNA杂 交，该杂交技术称为。为了检测胰岛素基因转录的mRNA是否翻译成，常用抗原-抗体杂交技术。（3）如果要将某目的基因通过农杆菌转化法导入植物细胞，先要将目的基因插入农杆菌 Ti 质粒的_中，然后

5、用该农杆菌感染植物细胞，通过DNA重组将目的基因插入植物细胞的 上。【课后拓展】1. （07广东）现有一长度为1000碱基对（by）的DNA分子，用限制性核酸内切酶Eco R1酶切后得到的 DNA分子仍是1000 by，用Kpn1单独酶切得到400 by和600 by两种长度的DNA分子，用EcoRI、Kpnl 同时酶切后得到200 by和600 by两种长度的DNA分子。该DNA 分子的酶切图谱正确的是2. 基因工程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒，便于重组和筛选。已知限制酶 I 的识别序 列和切点是-GJGATCC-;,限制酶II的识别序列和切点是-JGATC-。根据图示判断下列操

6、作正确的 是：A. 目的基因和质粒均用限制酶I切割B. 目的基因和质粒均用限制酶II切割C. 质粒用限制酶I切割，目的基因用限制酶II切割D.质粒用限制酶II切割，目的基因用限制酶I切割OdAlk叩 TM HHSW 时:刼鬲！仙叭n解附翩 匚辭棚酣舸肅闰林3. （09 天津）为从根本上解决水稻中的高植酸问题，可将植酸酶基因导入水稻，培育低植酸转基因水稻品种。下图是获取植酸酶基因的流程。据图回答： 图中基因组文库（小于/等于/大于）cDNA文库。 B过程需要的酶是； A、C过程中（可以/不可以）使用同一种探针筛选含目的基因的菌株。 目的基因I和II除从构建的文库中分离外，还可以分别利用图中和为模板直接进行 PCR 扩增，该过程中所用酶的显著特点是。4（08 山东）为扩大可耕地面积，增加粮食产量，黄河三角洲等盐碱地的开发利用备受关注。我国科学家应用耐盐基因培育出了耐盐水稻新品系。（1）获得耐盐基因后，构建重组DNA分子所用的限制性 内切酶作用于图中的处，DNA连接酶作用于处。（填“a”或“b”）（2） 将重组 DNA 分子导入水稻受体细胞的常用方法有农杆菌转化法和法。（ 3）由导入目的基因的水稻细胞培养成植株需要利用 技术。该技术的核心是 和。（4）为了确定耐盐转基因水稻是否培育成功，既要用放射性同位素标记的作探针进行分子杂交检测，又要用方法从个体水平鉴定水稻植株的耐盐性。