电泳技术在药物分析中的应用

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1、电泳技术在药物分析中的应用摘要:本文概括的讲述了电泳技术产生的历史及发展历程,简要介绍了几种常见的电泳 技术的原理,特点,及其在药物分析中的应用。其中重点讲述了毛细管电泳法在该领域的应 用,及其发展前景关键词:电泳技术 药物分析 毛细管电泳法电泳(electrophoresis, EP)是指带电颗粒在电场作用下,向着与其电性相反的电极移 动的现象,而电泳技术则是利用带电粒子在电场中移动速度不同而达到分离的技术。早在 1807年由俄国莫斯科大学的斐迪南弗雷德里克罗伊斯(Ferdi nand Frederic Reuss)发现 1937年诺贝尔奖获得者,瑞典化学家AmeTiselius教授利用电泳

2、现象发明了最早期的界面 电泳,用于蛋白质分离的研究,从而开创了电泳技术的新篇章。此后,各种电泳技术及仪器 相继问世,先进的电泳仪和电泳技术的不断发展,使它在生物化学实验技术中占重要地位,按 电泳的原理有三种形式的电泳分离系统:原则上按电泳的原理来分,即移动界面电泳(moving boundary electrophoresis)、区带电泳(zone electrophoresis)和稳态电泳(steady state electrophoresis)或称置换(排代)电泳(displacement electrophoresis).中国药典1990年第二部首次将电泳法作为法定的,通用的检测方法收

3、载入附录中,1995 年版,2000年版将电泳中的五中电泳技术(纸电泳法,醋酸纤维素薄膜电泳法,琼脂糖凝 胶电泳法,聚丙烯酰氨凝胶电泳法,SDS-聚丙烯酰氨凝胶电泳法)在附录中规定下来,并对 高效毛细管电泳法也做了详细的说明。现将以上电泳技术作简要说明:一,纸电泳法纸电泳的设备简单,应用广泛,是最早使用的一种电泳技术。最初用于蛋白质,后来也 用于氨基酸、核苷酸一些低分子物质,其优点在于或采用滤纸与色素结合的直接电泳图, 或剪下滤纸的任何部分来抽提其中的物质。在早期的生物化学研究中,曾发挥重要作用。 由于纸电泳时间长,分辨率较差,近年来逐渐为其他快速、简便、分辨率高的电泳技术 所代替。在1998

4、年生化药品第一分册中仅有三磷酸腺苷二钠,三磷酸腺苷二钠注射液 的含量的测定,及与胞磷胆碱钠有关的物质采用此方法,此外,在植物化学成份的分离 中也可以得到应用二,醋酸纤维素薄膜电泳法醋酸纤维薄膜电泳是与纸电泳法在同一时期发展起来的,因其操作简单、快速、廉价, 所以现在多用其来纸电泳法。它已经广泛用于血清蛋白,血红蛋白,球蛋白,脂蛋白,糖蛋 白,甲胎蛋白,类固醇激素及同工酶等的分离分析中,尽管它的分辨力比聚丙酰胺凝胶电泳 低,但它具有简单,快速,灵敏度高,应用面广等优点。在中国药典2000年二部中,记载 了其应用于人乙型肝炎免疫球蛋白,人狂犬病免疫球蛋白等蛋白质类的鉴别与测定三,琼脂糖凝胶电泳法琼

5、脂糖凝胶电泳是用琼脂或琼脂糖作支持介质的一种电泳方法。对于分子量较大的样 品,如大分子核酸、病毒等,一般可采用孔径较大的琼脂糖凝胶进行电泳分离。其分析原理 与其他支持物电泳最主要区别是:它兼有“分子筛”和“电泳”的双重作用。其可被应用于螺旋 藻多糖的鉴别,乳酸脱氢酶同工酶的测定,及血红蛋白的检测等项目四,聚丙烯酰氨凝胶电泳法及SDS-聚丙烯酰氨凝胶电泳法聚丙烯酰氨凝胶电泳法是20世纪60年代发展起来的一种电泳技术,主要用于分离蛋 白质和寡核苷酸。聚丙烯酰胺凝胶为网状结构,具有分子筛效应。它有两种形式:非变性聚 丙烯酰胺凝胶电泳(Native-PAGE)及SDS-聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE

6、);非变性聚丙 烯酰胺凝胶,在电泳的过程中,蛋白质能够保持完整状态,并依据蛋白质的分子量大小、蛋 白质的形状及其所附带的电荷量而逐渐呈梯度分开。而SDS-PAGE仅根据蛋白质亚基分子 量的不同就可以分开蛋白质。该方法应用广泛,可进行与胰岛素及中性胰岛素注射液有关的 蛋白质检查,血浆脂蛋白含量的测定,及胸腺肽的相对分子质量的测定等五,高效毛细管电泳法毛细管电泳(capillary electrophoresis,CE)又称高效毛细管电泳(high performanee capillary electrophoresis,HPCE),是一类以毛细管为分离通道、以高压直流电场为驱动力 的新型液相分

7、离技术。它的最大的优点之一是应用范围广,可以分离多种化合物。目前, CE分析技术被药物分析工作者在药品检验领域迅速推广应用。药物分析大致可以分为两部 分:一、原药的定量、原药中杂质的测定、药剂分析以及对它们稳定性的评价等以药品质量 管理为目的的测定方法。二、对进入人体内的药物或弋谢物的吸收、分布、代谢、排泄等体 内动态的研究,即临床药物分析。这两部分的测定一般需要分离和检测手段相结合。如今,电泳技术发展的越来越快,电泳技术的研究和应用,也给药物分析领域和药品检 验工作带来了生机与活力,无疑将对该专业起到了推动和发展的作用。尤其是高效毛细管电 泳法,在国际上,毛细管电泳技术与其他技术(如高效液相

8、色谱法,质谱法等)的联合应用 成为关注的重点,也是今后研究和发展的方向,其有望成为常用的有效分离分析的手段之一。参考文献:万泊珍 乳酸脱氢酶同工酶的琼脂糖凝胶电泳测定方法1984陶俊钰 电泳技术在药物分析中的应用2004廖 毛细管电泳技术及其在药物分析中的应用2014沈霞 电泳技术的现状和发展2004郑震寰,尹鸿萍,张芳 螺旋藻多糖的琼脂糖凝胶电泳鉴别2003 中华人民共和国药典编辑委员会 中华人民共和国药典(二部) 2000 中华人民共和国药典委员会 中华人民共和国卫生部药品标准(二部)生化 药品第一分册 1998百度百科电泳百度百科电泳技术百度百科毛细管电泳百度百科纸电泳法百度百科一琼脂糖凝胶电泳法百度百科一聚丙烯酰氨凝胶电泳法

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