YYH-环境工程微生物学第一章-病毒.pdf

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1、第一章 非细胞生物 -病毒 杨毅红内容提要 1.1 病毒概述 1.2 病毒的形态和结构 1.3 病毒的增殖 1.4 病毒的培养 1.5 病毒生命活动的影响因素 1.6 病毒的灭活方法与废水中病毒的去除1.1 病毒概述 什么是病毒? 一类由核酸 和蛋白质 等少 数几种成 份组 成的超显 微 “ 非细胞生物” 、 无细胞结构 、 专性寄生在活细 胞内的实体 ,在活细胞外 以无生命 的化 学大分子 状 态存在, 一旦进入宿 主细 胞又 具有 生命 特征 。病毒的特点 大小: 个体极小, 只能用电子显微镜观察; 结构与化学成分:无细胞结构,核酸和蛋白质; 遗传因子:只含一种核酸,DNA 或RNA; 代

2、谢特点:无产能酶系、无核酸和蛋白质合成酶 系,专性活细胞内寄生; 繁殖方式:核酸和蛋白质等成分的装配; 敏感性:对抗生素不敏感,对干扰素敏感。病毒的分类 1. 根据宿主划分 动物病毒 人类疾病的:流感、肝 炎、 腮腺 炎、 水痘 、SARS 等; 畜禽疾病的:口蹄疫、 狂犬 病、 禽流 感、 猪瘟 等。 植物病毒 烟草花叶病、小麦 黑穗 病、 水稻萎 缩 病等。 微生物病 毒 (噬菌体 、噬真菌体 、噬藻 体等) 大肠杆菌T 系噬 菌体 2. 按核酸类型划分 DNA 病毒 和RNA 病毒6 E.Johnson 洛杉矶湖人队 球星,1991年 被检查出为 HIV病毒阳性。7非细胞生物 (真)病毒

3、: 至 少含 核酸 和蛋 白质 二种 组分 亚病毒 类病毒:只含具侵染 性的RNA组分 拟病毒:只含有不具 侵染 性的RNA组分 朊病毒:只含蛋白质 亚病毒类病毒 至 今 所 知 的最小、 最简单的病毒 ; 仅含一种成分 RNA ; (病毒分子量为10 6 Da 类病毒分子量为10 5 Da ) 能 在 敏 感 细胞内自 我复制,不需 要辅助病毒 。发现的第一个类病毒是马铃薯纺 锤形块茎病类病毒(PSTV) ,拟病毒(卫星RNA ) 卫星RNA 是指一些必须依赖辅助病 毒进行复 制的 小 分 子单链RNA 片段,被包装在辅助病 毒 的 壳 体 中,本身 对辅助病毒的 复制不是必 须的。又称之为

4、 类 类病毒 ; 与 辅 助 病 毒的基因 组无明显同源 性。 被拟病毒” 寄生” 的真病毒 称为辅助病毒又称蛋白质侵染因子。 是一 类能 侵染 动物 并在 宿主 细胞内复制的 小 分子 无免 疫性 疏水 蛋白 质。 羊瘙 痒病 是羊 的一种 中 枢神 经系 统退 化性紊 乱 疾病 。 表现为毛 脱落 ,皮 肤瘙痒 ,失去 平衡 和后 肢麻痹 等症状 。 现在已经发现与朊病 毒有 关的 疾病 有羊 瘙痒 病 、 疯 牛病、人的库鲁病( 震颤 病) 和克- 雅 氏病( 早 老性 痴呆 病) 。 朊病毒(prion “普列昂”)1.2.1 病 毒 的 形态和大小 病毒的形态多样,依种类不同而不同

5、球状、卵圆形、砖 形、 ( 动物病毒) 杆状、丝状、 (植物病毒 ) 蝌蚪状、丝状、球 形、 ( 噬菌体) 测量的单位是纳米,多数病毒粒子的直径在 100nm左右。 1.2 病毒的形态和结构15 有代表性的若干病毒的直径或大小16 牛痘病毒 脊髓灰质炎病毒 腺病毒17 登革热病毒18 艾滋病病毒19 艾滋病毒 侵入辅助 性T细胞20 冠状病毒21 水生动物皮瘤中的虹色病毒22231.2.2 病 毒 的 化学组 成及结构 1 、 典 型病 毒粒子 的化 学成分 基本成分 核酸 : 核心(DNA 或RNA ) 蛋白质 : 衣壳( 由若干衣壳 粒构成) 核心 衣壳粒 核衣壳 ( 基 本结构) 刺突

6、囊膜 非基本成分:囊膜-类脂或脂 蛋白2 、 病 毒粒 子的对称构 型及其代表 螺旋对称型 二十面体对称型 复合对称型 螺旋对称 复合对称 二十面体对称呈“ 球 状” , 没有囊 膜 , 有刺突。 衣壳由252 个衣壳粒组成 , 腺病毒的 核心是由线状双链DNA 构 成的。 侵染呼吸道 、 眼结膜 和淋巴组织 , 是急性咽炎 、 流行性角膜结膜炎和病毒 性肺炎等的病原体 。 (2) 二十面体对 称型: 腺病毒 复合对称型: 大肠杆 菌4 噬菌体 头部 ( 核心是双链 D NA ) 颈部 尾鞘和尾管 尾丝 尾部1.3 病毒的增殖 1.3.1 病毒的增殖过程 吸 附 、 侵 入 和脱 壳、生物合

7、成、装配与释 放等 核 酸 复制 + 蛋白质 合成 病 毒 粒子 装配吸附 刺突和基板固着 尾鞘收缩 尾管穿入 DNA注入 ( 1 ) 吸附 ( 2 ) 侵入( 3 ) 生物 合成 噬菌体利用宿主的生物合 成机 构和 场所 ,使 其自 身核 酸表达和复制,产生 大量 的子 代噬 菌体 蛋白 质和 核酸 。 包 括 噬 菌体核酸的 复制和蛋白质 的合成( 4 ) 成熟 (装配) T4噬菌体的装配是一 个极 为复 杂 的自我装配的过程( 5 ) 裂解 (释放) 病毒入侵艾 滋 病 毒 侵 染1.3.2 病毒的溶原性 温和噬菌体:侵入宿 主细 胞后 ,其 核酸 附着 并整 合在 宿主染 色体上,和其

8、一起同 步复 制, 宿主 细胞 不裂 解而 继续 生长。 这一现象称做 溶原 性 (lysogeny ) 毒性噬菌体:侵入宿 主细 胞后 立即 引起 宿主 细胞 破裂 。附 着 或 融 合在溶源 性细菌染色体 上的 温 和噬 菌体的核酸 称 为原噬菌 体或前噬菌体 。 前噬菌体 含有温和噬菌体DNA 的 宿 主细菌叫 溶原性细菌 。 溶原性细菌可稳定遗传 溶原性细菌的特点 : 可自发裂解 可诱导裂解 具有“ 免 疫性” 可复愈 溶源转变1.4 病毒的培养 1)病毒的培养特征 在细菌培养液中,细 菌被 噬菌 体感 染, 细胞 裂解 ,浑 浊的 菌悬液变成为透明的 裂解 溶液 。 在固体培养基上-

9、噬 菌斑 2)病毒的培养基 病毒是专性寄生在活的 敏感 宿主 细胞 内才 能生 长繁 殖的 微生物。因此病毒的 培养 基要 求苛 刻, 专一 性强 。 动物病毒:动物接种 、鸡 胚接 种和 组织 培养 技术 噬菌体:双层琼脂法 培养 3)病毒的培养1.5 病毒生命活动的影响因素 1.5.1 物 理 因素 对病毒的影 响 1)温度 耐冷而不耐热 高温对病毒具有灭活 功能 (60 ,30min ) 原因:高温破坏病毒的 蛋白 质和 核酸 ,其 中蛋 白质的 灭 活速度快。蛋白质变 性后 影响 对宿 主的 吸附 能力 ,消 弱了 病毒的感染力。 低温不会灭活病毒, 通常 在- 75 保 存病 毒。2

10、) 光 及其他辐 射 紫外辐射 紫外线可杀死病毒。 原因:破坏病毒的核 酸, 使核 酸的 嘧啶 受到 影响 ,形 成胸 腺嘧啶二聚体。 可见光 在氧气和染料条件下 ,肠 病毒 对可 见光 敏感 而被 杀死 ,称 为“光灭活作用”。 原因:染料附着核酸 上, 催化 光的 氧化 过程 ,引 起病 毒死 亡。 离子辐射:X 、3)湿度 湿 度 是 控 制病毒的 重要条件。 相对湿度(RH)越 低, 病毒 的存 活时 间越 短。 当土壤的水分低于10 时, 病毒 会迅 速灭 活。1.5.2 化学因素对病毒的影响 PH :59 时病毒稳定,超过11病毒受到较大损伤,石灰 氧化剂:高锰酸钾、过氧化氢、二氧

11、化氯、碘化物、臭氧 等 其他:甲醛、苯酚1.5.2 生物因素对病毒的影响 少数细菌如枯杆菌、绿脓杆菌等能够灭活病毒 原因: 这些细菌具有能够分解病毒蛋白外壳的酶的作用 部分藻类产生的代谢产物也可使病毒失活1.6 病毒的灭活方法与废水中病 毒的 去除 病毒的灭活方法 物理 加温和光照可以破坏水中的病毒(其中加温处理效果好) 沉淀、絮凝、吸附、过滤只能去除,不能破坏杀死病毒 化学 高PH 、化学消毒剂及染料可以破坏和灭活病毒废水中病毒的去除 一级处理过程: 效果较差30% 二级处理过程 去除率较高,可达到60%-90% 。病毒转移至污泥,灭活率 三级深度处理 加氯、臭氧思考题 破坏病毒的物理因素有哪 些?它 们是如 何破坏 病 毒的? 作业一 病毒在水体、土壤和空气 中的存 活时间 主要受 哪 些因素影响?

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