《畜禽营养与饲料》实验指导书

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1、畜禽营养与饲料实验指导书广西梧州农业学校畜牧兽医专业教研组编2013年10月目录实验一 饲料水分的测定3实验二 饲料粗灰分的测定6实验三 饲料粗蛋白质的测定8实验四 饲料脂类测定12实验五 饲料粗纤维测定14实验六 饲料中无氮浸出物（NFE）计算差值计算17实验七 饲料中总磷量的测定20实验一 饲料水分的测定实验原理及意义按照概略养分分析程序，饲料中营养物质首先可以分成水分和干物质。测定饲料的水分含量，就可以计算出干物质量。饲料中的水分包括游离水和结合水，因此测定也可以分两步进行，先测定初水分（游离水），再测定吸附水（结合水），然后计算出饲料的总水分。测定饲料中水分，不仅间接获得了干物质含量；

2、同时也为其它营养成分的分析制备分析样品，使不同饲料中各种营养成分的相互比较有一致的基础；对饲料在贮存、加工、运输过程中防止某些营养成分的转化、变性、霉烂等，都有指导意义。实验材料1分析天平：感量0.0001g；2实验室用样品粉碎机或研钵；3分样筛：40目、60目； 4电热式恒温干燥箱（烘箱）：可控温度为105土2；5干燥器：用氯化钙或变色硅胶作干燥剂；6称样皿：玻璃或铝质，直径为40mm以上，高25mm以下；7坩埚钳和药匙。试样的选取与制备1选取1000g以上具有代表性的原始样本；2用四分法将原始样本缩至500g，风干后粉碎过40目筛，再用四分法缩至200g，装入密封容器，放阴凉干燥处保存；3

3、如试样是多汁的鲜样，或无法粉碎时，应预先干燥处理，称取200300g，在105土2烘箱中烘15min，立即降至65，烘干56h。取出后，在室内空气中冷却使水分含量达到当地一般水平，称重，即得风干试样,同时计算初水分含量。实验步骤一、水分的表示方法饲料水分含量有两种表示方法。一种是以包括全部水分在内的原样（鲜样）基础表示，即：水分（%）= 100 （3-1）式中，W为饲料重量（g）；W水为水分重量（g）另一种是以干物质为基础的，即：水分（%）= 100 （3-2）式中，W水为水分重量（g）；W干为饲料中干物质重量（g）。不仅水分，饲料中的其它各种成分的含量，也有上述两种表示方法。由于饲料在放置和

4、分析过程中，其水分因蒸发而减少，而干物质则不会因水分的变化而受影响，故各种成分的含量常以干物质为基础来表示。二、烘箱干燥法烘箱干燥法是AOAC的方法，将样品放在105土2烘箱中烘至恒重，所失重量即代表水分含量。这种方法有一定误差，因为在水分蒸发的同时，一些短链脂肪酸和有机酸等易挥发性物质有挥发损失。三、测定步骤1取洁净称样皿置于105土2烘箱中烘1h取出，在干燥器中冷却30min(冷却至室温)，称重(准确称至0.0002g)。2将称样皿再烘30min，同样冷却，称重，至两次重量之差小于0.0005g为恒重。3用已恒重的称样皿称取2份平行试样，每份25g(含水量0.1g以上，试样厚度为4mm以下

5、)。准确称至0.0002g。4将称样皿半开盖，在105土2烘箱中烘3h(以温度至105开始计时)后取出，盖好称样皿盖，在干燥器中冷却30min，称重。5再同样烘干1h，冷却，称重，至两次重量之差小于0.002g为止，以其中较小的值进行计算。测定吸附水后的试样，可保留作测粗脂肪和粗纤维之用。四、测定结果计算1、计算公式：水分（）=100 = 100 （3-3）式中：W1105土2烘干前试样及称样皿重量，g；W2105土2烘干后试样及称样皿重量，g；W0已恒重的称样皿重量，g）。2、重复性 每个试样，应取两个平行样进行测定，以其算术平均值为结果。两个平行样测定值相差不得超过0.2%，否则应重做。3

6、、如果按上述(三) 3步骤进行过预先干燥处理（指多汁的鲜样），则应按下式计算原来试样中所含水分总量：原样总水分（%）=初水分（%）+100%初水分（%）风干试样吸附水（%）说明： 某些含脂肪高的样品，烘干时间长反而增重，乃脂肪氧化所致，应以增重前那次称量为准。 含糖分高的易分解或易焦化试样，应使用减压干燥法测定水分。实习报告将实训结果记录下来,并写一份实训报告。实验二 饲料粗灰分的测定实验原理及意义粗灰分是饲料样品在高温炉中将所有有机物质全部氧化后剩余的残渣。主要为矿物质氧化物或盐类等无机物质，有时还含有少量泥沙。灰分分水溶性与水不溶性，酸溶性与酸不溶性。水溶性灰分大部分是钾、钠、钙、镁等氧化

7、物和可溶性盐，水不溶性灰分除泥沙外，还有铁、铝等的氧化物和碱土金属的碱式磷酸盐。测定粗灰分，可掌握饲料中的灰分总量，了解不同生长期、不同器官中灰分的变动情况；也可在此基础上测定灰分中组成元素的含量。此外，测定粗灰分对饲料品质鉴定也有参考意义，若含量过高，饲料中可能混入砂石、土等。仪器和设备1实验室用样品粉碎机或研钵。2分析筛：40目。3分析天平：感量0.0001。4高温电炉：电加热，有温度计且可控制炉温在55020。5坩埚：50ml，瓷质。6坩埚钳7干燥器：用氯化钙（干燥试剂）或变色硅胶为干燥剂。实验步骤1 坩埚恒重：将干净坩埚放入高温炉中，在55020下灼烧30min。取出，在空气中冷却约1

8、min，放入干燥器中冷却30min，称重。再重复灼烧，冷却、称重，直至两次质量之差小于0.0005为恒重。2称样品：在已知质量的坩埚中称取25试样（勿使样品高于坩埚深度的1/2，灰分质量应在0.05以上）。3炭化：将盛有样品坩埚放在电炉上，坩埚盖须留一小缝隙，小心炭化，在炭化过程中，应在低温状态加热灼烧直至无烟，然后升温灼烧至样品无炭粒（勿着明火）。4灰化及称恒重：将炭化至无烟坩埚用坩埚钳移入高温炉内，坩埚盖须留一小缝隙，在55020下灼烧3，待炉温降至200以下，取出，在空气中冷却约1min，放入干燥器中冷却30min，称重。再同样灼烧1，冷却、称重，直至两次质量之差小于0.001为恒重。测

9、定结果的计算1. 计算公式 试样中粗灰分含量（%）按下式计算：粗灰分（%） （3-28）式中：已恒重空坩埚的质量，；坩埚加试样的质量，；灰化后坩埚加灰分的质量，。2.允许差 每个试样应取两个平行样进行测定，以其算术平均值为结果。粗灰分含量在5以上时，允许相对偏差为1；粗灰分含量在5以下时，允许相对偏差为。注意事项1坩埚的准备：新坩埚编号，将带盖的坩埚洗净烘干后，用钢笔蘸5氯化铁墨水溶液（称0.5FeCl362溶于100l水中）编号，然后于高温炉中550灼烧30min即可。2试样开始炭化时，坩埚盖须留一小缝隙，便于气流流通；温度应逐渐上升，防止火力过大而使部分样品颗粒被逸出的气体带走。3为了避免

10、试样氧化不足，不应把试样压得过紧，应松松放在坩埚内。4灼烧温度不宜超过600，否则会引起磷、硫等盐的挥发。5灰化后样品应呈白灰色，但其颜色与试样中各元素含量有关，含铁高时为红棕色，含锰高为淡蓝色。如有明显黑色炭粒时，为炭化不完全，可在冷却后加几滴硝酸或过氧化氢，在电炉上烧干后再放入高温炉灼烧直至呈白灰色。实验三 饲料粗蛋白质的测定实验原理及意义动物从饲料中撮取蛋白质及其分解产物，以组成自身的蛋白质。因此，蛋白质含量是评价饲料营养价值的主要指标。各种蛋白质中都含有一定比例的氮。然而，各种饲料中除蛋白质含有氮素外，还有一些化合物，如核酸，生物碱，含氮碳水化合物，含氮类脂、卟啉、酰胺，色素以及硝态氮

11、等，也含有氮素。因此，用测定总氮量计算出的“蛋白质”，实际上包括真蛋白和非蛋白氮物质，总称为粗蛋白质。蛋白质的测定方法分为直接法和间接法两类。直接法是利用蛋白质物理性质或化学性质，直接测定蛋白质含量的方法。常用的有紫外吸收光度法、折光法、双缩脲法、酚试剂法、染料结合法等，但其中有些方法不适合于混合饲料分析。间接法则是通过测定样品中的总氮量，进而推算出蛋白质含量的方法，即粗蛋白的测定方法。常用的有凯氏法，杜马斯法，奈氏比色法和次氯酸比色法等。凯式定氮法凯式定氮法是1833年由凯达尔（Kjedehl）首创，后经多人改进，迄今仍广泛应用于土壤、肥料、饲料和食品的分析中。此法具有较高的准确度和精确度，

12、美国分析化学家协会（AOAC）、国际谷物化学协会（ICC）等组织都将其确定为法定分析方法。（一）原理饲料中的有机物在浓硫酸作用下被消化，其中真蛋白质和氨化物中N转化为(NH4)2SO4中N，其它非氮物质则以CO2、H2O和SO2逸出： 2CH3CHNH2COOH+13H2SO4（NH4）2SO4+6CO2+12SO2十16H2O （3-14）消化液在浓碱的作用下进行蒸馏，放出的NH3用硼酸吸收：(NH4)SO4+2NaOH2NH3十+2H2O+Na2SO4 （3-15）4H3BO3+NH3NH4HB4O7+5H2O （3-16）然后以甲基红一溴甲酚绿作指示剂，用标准酸溶液滴定： NH4HB4O

13、7+HCI+5H2O NH4CI+4H3BO3 （3-17）根据酸标准溶液的浓度和消耗的体积，即可计算出氮的含量，乘以相应的蛋白质换算系数(一般用6.25)，即为粗蛋白质含量。仪器设备（1）实验室用样品粉碎机或研钵；（2）分样筛：40目；（3）分析天平：感量0.000lg；（4）消煮炉或电炉；（5）滴定管：酸式，25ml、10ml；（6）凯氏烧瓶：250或500ml；（7）凯氏蒸馏装置：常量直接蒸馏式、微量蒸馏式或半微量水蒸汽蒸馏式；（8）锥形瓶：150或250m1；（9）容量瓶：100ml；（10）通风橱。试剂（1）硫酸：化学纯；（2）硫酸铜：化学纯；（3）硫酸钾或硫酸钠：化学纯；（4）氢氧

14、化钠：分析纯，40g溶于100ml水配成40%水溶液(WV)；（5）硼酸：分析纯，2g溶于100ml水配成2%溶液(WV)；（6）混合指示剂：甲基红0.1乙醇溶液，溴甲酚绿0.5乙醇溶液，两溶液等体积混合，阴凉处保存期三个月以内；（7）0.05N盐酸标准溶液(邻苯二甲酸氢钾法标定)：4.2ml盐酸（GB 622，分析纯）用蒸馏水定容到1000ml；（8）蔗糖：分析纯；（9）硫酸氨：分析纯。实验步骤1试样的消煮 称取0.51g试样(含氮量580mg，准确至0.0002g)，于光洁纸上，卷成圆筒水平插入烧瓶中，无损失地倒入凯氏烧瓶底部，加入硫酸铜0.9g，无水硫酸钾(或硫酸钠)15g，与试样混合均

15、匀，再加浓硫酸25mI和2粒玻璃珠，在消煮炉上小火加热，待样品焦化，泡沫消失，再加强火力(360410)直至溶液澄清后，再继续加热至少30min.。2氮的蒸馏（1）常量直接蒸馏法（主要用于含氮量低的样本）：将(五).1中的试样消煮液冷却，加蒸馏水200ml，摇匀，冷却。沿瓶壁小心加入40%氢氧化钠溶液100ml，立即与蒸馏装置相连。蒸馏装置冷凝管口浸入50ml 2硼酸溶液内，加混合指示剂2滴轻摇凯氏烧瓶，使溶液混匀，加热蒸馏，直到馏出液体积约为150m1。移动三角瓶，使冷凝管口离开液面，再蒸馏1min.。用少许蒸馏水冲管口，移开三角瓶，即可滴定。（2）半微量蒸馏法：将试样的消煮液冷却，加蒸馏水

16、20ml，转入100ml容量瓶，冷却后用水稀释至刻度，摇匀，为试样分解液。取20ml 2硼酸溶液，加混合指示剂2滴，使半微量蒸馏装置的冷凝管末端浸入此溶液蒸馏装置的蒸气发生器的水中应加甲基红指示剂数滴，硫酸数滴，且保持此液为橙红色否则补加硫酸。准确移取试样分解液1020ml注入蒸馏装置的反应室中。用少量蒸馏水冲洗进样入口。塞好入口玻璃塞，再加10ml40%氢氧化钠溶液，小心提起玻璃塞使之流入反应室，将玻璃塞塞好。且在入口处加水封好，防止漏气，蒸馏4min.，使冷凝管末端离开吸收液面，再蒸馏1min.，用蒸馏水洗冷凝管末端，洗液均流入吸收液，准备滴定。（3）微量蒸馏法:微量蒸馏法的测定装置和方法

17、均与半微量法基本一致，只是所测样本量较少，消耗的试剂相应减少。3滴定 吸收氨后的吸收液立即用0.05N盐酸标准溶液滴定，溶液由蓝绿色变为灰红色为终点。4空白测定 称取蔗糖0.1g，代替试样，按上述步骤进行空白测定，消耗0.05N盐酸标准溶液的体积不得超过0.3ml。测定结果的计算1计算公式：粗蛋白质(%)= F 100 （ 3-18）式中：V2滴定试样时所需盐酸标准溶液体积（ml）；VI滴定空白时所需盐酸标准溶液体积（ml）；C盐酸标准溶液摩尔浓度（mol/l）；W试样重量（g）；V4试样分解液总体积（ml）；V3试样分解液蒸馏用体积（ml）；0.0140氮的毫摩尔质量；F 氮换算成蛋白质的系

18、数（平均值为6.25）。2重复性 每个试样取两平行样进行测定以其算术平均值为结果。当粗蛋白质含量在25以上时，允许相对偏差为1，当粗蛋白质含量在1025时，允许相对偏差为2，当粗蛋白质含量在10以下时，允许相对偏差为3。测定步骤的检验精确称取0.2g硫酸铵，代替试样，按(五)的各步骤操作，按(六)的公式计算(但不乘系数6.25)测得硫酸铵含氮量为21.19土0.2，否则应检查加碱，蒸馏和滴定各步骤是否正确。试样消煮时，加入硫酸铜0.2g，无水硫酸钠3g，与试样混合均匀，再加浓硫酸10m1，仍可使饲料试样分解完全，只是试样焦化再变为澄清所需时间略长些。实验四 饲料脂类测定实验原理及意义 脂类化合

19、物分子中常含有长碳链或其它非极性基团，即具有疏水性，难溶于水，而易溶于乙醚、石油醚、四氯化碳等非极性溶剂或甲醇、氯仿等弱极性溶剂。由于不同样品的脂类化合物中，碳链的长度和饱和程度以及脂的分子构型等存在某些差异，所以，用不同溶剂作提取剂时，其测定结果也有差异。在实际分析工作中可根据具体情况采用索氏提取方法。索氏提取原理索氏(Sohlet)法或乙醚萃取法的原理是根据饲料样本中的脂类可溶于有机溶剂如乙醚，通过乙醚反复抽提，使溶于乙醚中的脂肪随乙醚流注于盛醚瓶中，由于乙醚和脂肪的沸点不同，控制水浴温度，蒸发去乙醚，盛醚瓶所增加的重量即为该样本的脂肪量。由于游离脂肪酸、卵磷脂、蜡质、麦角固醇、胆固醇、脂

20、溶性维生素、叶绿素等物质，亦溶于乙醚，故此法所测得脂肪不纯，统称为粗脂肪。仪器设备（1）实验室用植物样品粉碎机或研钵；（2）分样筛：40目；（3）分析天平：感量0.0001g；（4）电热恒温水浴锅：室温100；（5）恒温烘箱；（6）索氏脂肪提取器（见图36）：100ml或150m1；（7）滤纸或滤纸简：中速脱脂;（8）脱脂棉线；（9）干燥器：用氯化钙(干燥级)或变色硅胶为干燥剂。试剂乙醚：化学纯实验步骤 1将已洗净的盛醚瓶置于1052的烘箱中烘干30min，而后取出于干燥器内冷却30min，称重。再烘干30min，同样冷却、称重，两次重量之差小于0.001g为恒重。2洗净并装置好脂肪提取器(干

21、燥无水)，检查装置是否严密。3称取试样15g，准确至0.0002g于滤纸筒中，或用滤纸包好，用脱脂棉线扎成一定大小的脂肪包(其高度不超过浸提管高度的23，宽度以能放入即可)。用铅笔作上编号，置于1052烘箱内烘干2h(或称测水分后的干试样，折算成风干样重)取出待用。4用镊子将滤纸筒或脂肪包放入浸提管内，加少许乙醚，盛醚瓶中加乙醚60l00ml。在6075水浴锅（用蒸馏水）上加热，使乙醚回流，回流速度每h 46次，约经816h，样品中的脂肪即全部提出，或控制乙醚回流次数为每h约10次，共回流约50次（含油高的试样约70次）或检查抽提管流出的乙醚挥发后不留下油迹为抽提终点。5浸提完毕取出脂肪包，然

22、后让乙醚再回流一次，再开始回收乙醚，直至盛醚瓶中乙醚几乎全部收完。最后取下盛醚瓶，在水浴上蒸去残余乙醚。用酒精棉擦净瓶外壁。6将盛醚瓶置于105土2烘箱内烘干1h，取出后于干燥器中冷却20min.，称重。再烘干30min同样冷却称重，至两次重量之差小于0001g为恒重。(六)结果计算1计算 粗脂肪()= (3-20)式中：W风干试样质量(g)。 W1已恒重的盛醚瓶质量(g)。 W2已恒重的浸提后盛醚瓶质量(g)。2重复性 每个试样取两个平行样进行测定，以其算术平均值为结果。 粗脂肪含量在10%以上(含10%)，允许相对偏差为3； 粗脂肪含量在10以下，允许相对偏差为5。实习报告将实训结果记录下

23、来,并写一份实训报告。实验五 饲料粗纤维测定实验原理粗纤维的常规测定法是在公认的强制规定条件下测定。将试样用一定容量和一定浓度的预热硫酸和氢氧化钠溶液煮沸消化一定时间，再用乙醇和乙醚除去醚溶物，经高温灼烧扣除矿物质的剩余物为粗纤维。当用稀酸处理时，淀粉、果胶和部分半纤维素被溶解；当用稀碱处理时，又可除去蛋白质和部分半纤维素、木质素、脂肪；用乙醇和乙醚处理时，可除去单宁、色素、脂肪、蜡质以及部分蛋白质和戊糖。用这种方法测得的“粗纤维”实际上是以纤维素为主，还有少量半纤维素和木质素的混合物。仪器设备（1）实验室用样品粉碎机或研钵（2）分样筛：40目；（3）分析天平：感量0.0001g；（4）消煮器

24、：有冷凝球的500ml烧杯，或有冷凝管的锥形瓶；（5）布氏漏斗：直径6cm；（6）抽滤瓶：5001000ml；（7）滤布：100支纱的麻绸或200目的尼龙网布；（8）真空抽气机(真空泵)；（9）电热式恒温箱(烘箱)；（10）干燥器：用氯化钙或变色硅胶作干燥剂；（11）高温炉(茂福炉)：电加热，有高温计且可控制炉温在550600；（12）古氏坩埚：30ml，预先加入30ml酸洗石棉悬浮液，再抽干，以石棉厚度均匀，不透光为宜；（13）电炉或电热板。试剂（1）硫酸 分析纯，0.255土0.005N，每100ml含硫酸1.25g，应用氢氧化钠标准溶液标定；（2）氢氧化钠 分析纯，0.313土0.005

25、N，每100ml含氢氧化钠1.25g应用磷苯二甲酸氢钾法标定；（3） 石棉 市售或自制中等长度酸洗石棉置于蒸发皿中，在600灼烧16h，用1.25%硫酸溶液浸泡并煮沸30min，过滤并用水洗至中性。同样用1.25%氢氧化钠溶液煮沸30min.，过滤并用少量1.25%硫酸溶液洗一次，再用水洗净，烘干后于600灼烧2h，其空白试验结果为每克石棉含粗纤维值小于Img；（4）95%乙醇：化学纯；（5）乙醚；化学纯；（6）正辛醇：分析纯，防泡剂。测定步骤1称取12g试样，准确称至0.0002g，用乙醚脱脂(试样含脂肪量低于1%时可不脱脂也可用测定脂肪后的试样残渣)放入消煮器。2加入煮沸的0.255N硫酸

26、溶液200ml和1滴正辛醇(防泡剂)立即加热，使其在1min内沸腾并连续微沸30min注意保持硫酸浓度不变(可补加沸蒸馏水)，并避免试样粘贴在液面以上的杯壁。3微沸30min后立即停止加热，用铺有滤布的布氏漏斗过滤，将200ml滤液在10min内全部滤净再用沸蒸馏水反复冲洗残渣，直至滤液不使蓝色石蕊试纸变红为止。4取下不溶物，放入原容器中，加入煮沸的0.313N氢氧化钠溶液，立即加热，使其在1min内沸腾，同样准确微沸30min。5立即在铺有石棉的古氏坩埚上抽滤先用25ml硫酸溶液冲洗。再用沸蒸馏水反复冲洗残渣，直至滤液不使红色石蕊试纸变蓝为止。6用洗瓶将滤布上的残留物洗入100ml烧杯中，再

27、倒入铺好石棉的古氏坩埚中。用15ml乙醇冲洗残渣，滤净后再用15ml乙醚洗涤（脱脂样品可不用乙醚洗涤）将古氏坩埚及残渣放人130土2烘箱中烘干2h，在干燥器中冷却30min，直称至恒重(两次称重之差小于0.001g)再将古氏坩埚置于电炉上炭化，然后移入550土25的高温炉中灼烧30min，于干燥器中冷却30min,准确称重，直至恒重。测定结果计算1计算公式：粗纤维= （3-27）式中：W1105土2烘干后坩埚及试样残渣重(g)； W2550土25灼烧后坩埚及试样灰分重(g)； W样品(未脱脂时)重量(g)。2重复性每个试样应取两平行样进行测定，以其算术平均值为结果。粗纤维含量在10%以下，允许

28、相差(绝对值)为0.4%粗纤维含量在10以上，允许相对偏差为4%。说明：酸和碱处理时应注意准确微沸30min。在冲洗过程中应避免残渣的损失。 实习报告将实训结果记录下来,并写一份实训报告。 实验六 饲料中无氮浸出物（NFE）计算差值计算实验原理饲料中无氮浸出物（NFE）主要由易被动物利用的淀粉、菊糖、双糖、单糖等可溶性碳水化合物组成。常规饲料分析不能直接分析饲料中无氮浸出物的含量，仅根据饲料中其他养分的分析结果，按下式间接计算求得：无氮浸出物(%)100%水分(%)+灰分(%)+粗蛋白质(%)+粗脂肪(%)+粗纤维(%) （3-39）或无氮浸出物(%)干物质(%)灰分(%)+粗蛋白质(%)+粗

29、脂肪(%)+粗纤维(%) （3-40）饲料样品具有风干、绝干及原样等不同基础表示分析结果，因此在计算无氮浸出物，各养分的质量分数应换算在同一基础上。此外，动物性饲料如鱼粉、血粉、羽毛粉等可不计算此项。饲料养分的表示基础与换算1饲料养分的表示基础（1）原样基础 有时称为鲜样基础，是指未经处理的按采集时的原来状态所测定的养分质量分数。以这种基础表示各种饲料的养分质量分数，因干物质含量不同，变异很大，不易比较。（2）风干基础 空气中自然存放基础或“假定干物质基础”，一般干物质含量为88%左右。这种基础有助于比较不同水分含量的饲料，常规饲料分析绝大多数是在风干状态下进行分析的，大多数饲料以风干状态饲喂

30、，所以风干基础比较实用。（3）绝干基础 无水状态或100%的干物质状态。用于比较不同水分含量的饲料。绝干基础排除了因水分变化带来的差异。2不同基础表示的饲料养分换算 可通过下面两种方法进行换算：（1） 应用下列比率关系，可将饲料成分的一种基础表示数值，换算为另一种基础表示的数值。 （3-41）例如：一种饲料含粗蛋白质4.0%，含水75%，计算以风干基础（干物质88%）表示的粗蛋白质含量。则 4:（100-75）X:88 X14.08换算为绝干基础时的粗蛋白质含量则为： 4:（100-75）X:100 X16.00如果样本是新鲜饲料，首先计算总水分，得出新鲜样本的干物质含量，再将测得风干样本中各

31、种养分含量的结果换算成新鲜饲料中各种养分含量。新鲜饲料中总水分含量按下式计算：新鲜饲料中总水分（%）A%+ （3-42）式中：A为测得的初水分含量，%；B为测得的吸水分含量，%。（2）由风干基础的结果换算成以原样为基础的某种养分含量（）公式： （3-43）式中：为以原样基础表示的某种养分质量分数，%；为以风干基础表示的某种养分质量分数，%；A为测得的初水分质量分数，%。由风干基础的结果换算成以绝干为基础的某种养分含量（）公式： （3-44）式中：为以绝干基础表示的某种养分质量分数，%；为以风干基础表示的某种养分质量分数，%；B为测得的吸附水质量分数，%。3.如果以含水量相同为基础进行比较折算的

32、方法例如：麸皮和聚合草其原样的各种养分含量（%）见表3-2表3-2 饲料原样中概略养分含量水分粗蛋白质粗脂肪粗纤维粗灰分无氮浸出物麸 皮11.112.63.211.75.256.2聚合草87.62.90.61.82.24.9为使麸皮和聚合草在水分含量相同的基础上比较两者的的各种养分含量，以麸皮为比较标准（基准饲料）计算出聚合草在与麸皮含水量（11.1%）相同条件下的养分换算系数。即养分换算系数7.17用7.17分别乘以聚合草在含水量87.6%（即干物质含量为12.4%）情况下的各种养分含量，就得出聚合草和麸皮含水分量相同（11.%）时的各种养分含量。计算结果如表3-3：表3-3 饲料风干物质中

33、养分含量比较（%）水分粗蛋白质粗脂肪粗纤维粗灰分无氮浸出物麸 皮11.112.63.211.75.256.2聚合草11.120.84.312.915.835.1实习报告将实训结果记录下来,并写一份实训报告。实验七 饲料中总磷量的测定测定原理将试样中有机物破坏，使磷游离出来，在酸性溶液中，用钒钼酸铵处理，生成黄色的（NH4）3PO4NH4VO316MoO3络合物，在波长400nm下进行比色测定。此法测得结果为总磷量，其中包括动物难以吸收利用的植酸磷。仪器和设备1实验室用样品粉碎机或研钵。2分析筛：40目。3分析天平：感量0.0001。4高温炉：可控制温度在55020。5坩埚：50ml，瓷质。6容

34、量瓶：50，100，1000ml。7刻度移液管：1.0，2.0，3.0，5.0，10.0ml。8凯氏烧瓶：250或500ml。9可调温电炉：1000。10分光光度计，有10mm比色皿，可在400nm下测定吸光度。试剂及配制1盐酸溶液。11水溶液（VV）。2硝酸。3. 高氯酸4钒钼酸铵显色试剂：称取偏钒酸铵1.25，加水200ml加热溶解，冷却后再加入250ml硝酸；另称取钼酸铵25，加水400ml加热溶解，在冷却条件下将此溶液倒入上溶液，且用水定容至1000ml，避光保存。如生成沉淀则不能继续使用。5磷标准溶液：将磷酸二氢钾在105干燥1，在干燥器中冷却后称0.2195，溶解于水中，定量转入1

35、000ml容量瓶中，加硝酸3ml，用蒸馏水稀释到刻度，摇匀，即成50-1的磷标准溶液。测定步骤1试样的分解（1） 干法不适用于含磷酸氢钙Ca(H2PO4)2的饲料：称取试样25（精确至0.0002）于坩埚中，在电炉上低温炭化至无烟为止，再将其放入高温炉于(55020)下灼烧3（或测灰分后继续进行），取出冷却，在坩埚中加入11盐酸溶液10ml和浓硝酸数滴，小心煮沸约10min。将此溶液转入100ml容量瓶中，并用热蒸馏水洗涤坩埚及漏斗中滤纸，冷却至室温后，定容，摇匀，为试样分解液。（2）湿法：称取试样0.55（精确至0.0002）于凯氏烧瓶中，加入硝酸30ml，小心煮沸，至二氧化氮黄烟逸尽，冷却

36、后加入7072高氯酸10ml，继续加热煮沸至溶液无色，不得蒸干（危险！）。冷却后加蒸馏水50ml，并煮沸驱逐二氧化氮，冷却后转入100ml容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度，摇匀，为试样分解液。（3）盐酸溶解法（适用于微量元素预混料）：称取试样0.21（精确至0.0002）于100ml烧杯中，缓缓加入盐酸溶液10ml，使其全部溶解,冷却后转入100ml容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度，摇匀，为试样分解液。2标准曲线的绘制 准确移取磷标准溶液（50ml-1）0，1.0，2.0，5.0，10.0，15.0ml于50ml容量瓶中，各加入钒钼酸铵显色试剂10ml，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀，常温下放置10min以

37、上。以0ml溶液为参比，用10mm比色皿，在400nm波长下，用分光光度计测定各溶液的吸光度。以磷含量为横坐标，吸光度为纵坐标绘制标准曲线。3试样的测定 准确移取试样分解液110ml（含磷量50750）于50ml容量瓶中，加入钒钼酸铵显色试剂10ml，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀，常温下放置10min以上。以空白为参比，用10mm比色皿，在400nm波长下，用分光光度计测定试样分解液的吸光度。在标准曲线上查得试样分解液的含磷量。结果计算及表述1结果计算 测定结果按下式计算：（%）100 （3-37）式中：为以质量分数表示的磷含量，%；为试样的质量，g；为由标准曲线查得试样分解液磷含量，； 为试样分解液的总体积，ml；为试样测定时所移取试样分解液的体积，ml。2结果表示 每个试样称取两个平行样进行测定，以其算术平均值为结果，所得到的结果应表示至小数点后两位。3允许差 含磷量在0.5以上（含0.5），允许相对偏差3；含磷量在0.5以下，允许相对偏差10。注意事项1比色时，待测液磷含量不宜过浓，最好控制在1ml含磷0.5mg以下；2显色时温度不能低于15，否则显色缓慢；待测液在加入试液后应静置10min，再进行比色，但不能静置过久。