医学微生物学螺旋体ppt课件

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1、第21章 螺旋体 (spirochete),一类细长、柔软、弯曲呈螺旋状、运动活泼的原核细胞型微生物 介于细菌与原虫之间，其基本特征同细菌,p198,名称 螺旋数 螺旋特点 举例,致病螺旋体的螺旋特点,密螺旋体 814 细密，规则； 两端尖直,疏螺旋体 310 不规则,苍白密螺旋体苍白亚种,钩端螺旋体 数十个 规则，更细密； 一端/两端呈钩状,问号状钩端螺旋体,回归热疏螺旋体 伯氏疏螺旋体,第一节 钩端螺旋体属 Leptospira,问号状钩端螺旋体(L.interrogans) 钩端螺旋体病 双曲钩端螺旋体(L.biflexa),螺旋体目钩端螺旋体科钩端螺旋体属,螺旋细密、规则，一端或两端呈

2、钩状，故名，简称钩体。运动活泼，常呈C、S或8字型 暗视野显微镜，形似细小珍珠排列的细链 G-，不易着染，Fontana镀银染色法棕褐色,1.形态与染色,生物学性状,螺旋体基本结构,外膜、内鞭毛、细胞壁、肽聚糖、细胞膜（内膜）、原生质柱体（细胞质、原始核质）,营养要求复杂，常用含10兔血清的柯索夫（Korthof）培养基 需氧或微需氧，适宜生长温度为2830，pH7.27.6， 生长缓慢（8h一代），12周后 液体培养基：半透明云雾状 固体培养基：透明，不规则的扁平菌落,2.培养特性,属特异性抗原:糖蛋白或脂蛋白 群特异性抗原:菌体内部，类脂多糖复合物 型特异性抗原:表面抗原，多糖蛋白复合物

3、应用显微镜凝集试验（microscopic agglutination test ，MAT）和凝集素吸收试验(agglutination absorption test， AAT)来分血清群和血清型。我国至少发现有问号状螺旋体参考株有19血清群75血清型,3.抗原与分类,4.抵抗力弱,不耐热，6010分钟即死亡 对常用消毒剂敏感 夏季在湿土或中性水中可存活数月 对青霉素敏感,致病性,致病物质-类似细菌内毒素与外毒素,内毒素样物质(ELS)：毒性低，引起发热， 炎症与组织坏死 黏附素： 溶血毒素：鞘磷脂酶C，引起红细胞破坏 胶原酶：,传播方式,鼠、猪（储存宿主）传染源,肾脏繁殖（隐性感染）,尿排

4、菌,污染水源、土壤,人的皮肤、黏膜、消化道、垂直接触而感染,所致疾病,钩端螺旋体病（钩体病）,人畜共患传染病,致病性 钩体穿透侵入皮肤粘膜，在局部繁殖后入血，引起钩体血症，产生致病物质，损伤全身毛细血管内皮细胞及肝、肾、肺心及中枢神经，引起钩端螺旋体病，出现休克、DIC、黄疸、出血、心肾功能不全、脑膜炎等。 临床上根据脏器损伤的不同可分为流感伤寒型、肺出血型、黄疸出血型、肾衰竭型等,临床特点 起病急，高热、乏力、全身酸痛、结膜充血、腓肠肌压痛、表浅淋巴结肿大；三大症状：发热、头痛、一身乏 三大体征：眼红、腿疼、淋巴大 免疫性 体液免疫为主，病后获得对同型钩体的持久免疫力。但抗体对肾脏中钩端螺旋

5、体吴无作用,微生物学检查法,1.病原体检测 标本: 发病一周内取血液; 第二周后取尿液; 有脑膜刺激者取脑脊液 直接镜检：暗视野或镀银染色 分离培养与鉴定:Korthof培养基培养，MAT和AAT 动物接种：幼龄豚鼠或金地鼠腹腔 分子生物学方法：PCR,2.血清学检测,病初和发病后23周各采血清一次 方法:显微镜凝集试验(MAT) 间接凝集试验,防治原则,非特异性预防： 防鼠、灭鼠，加强对带菌家畜的管理，保护水源 特异性预防： 接种多价钩端螺旋体死疫苗（包 含当地流行株） 治疗: 首选青霉素，注意赫氏反应。,第二节 密螺旋体属 (Treponema),苍白亚种：人类梅毒(syphilis) 地

6、方亚种：地方性梅毒 极细亚种：雅司病,苍白密螺旋体 品他密螺旋体,品他病,分为致病与非致病两大类，对人致病的有：,梅毒螺旋体 （Treponema pallidum，TP),螺旋体细长，形似细密的弹簧，螺旋弯曲而规则，814个，两端尖直，运动活泼 G-，因其透明，不易着色，故又称苍白螺旋体 Fontana镀银染色法染成棕褐色,生物学性状 形态与染色,目前在人工培养基上尚不能培养。 接种兔睾丸或眼前房，兔睾丸活体，家兔上皮细胞培养，但生长缓慢，约30h分裂一次。 两种菌株：用作梅毒血清学的诊断抗原 Nichols株(Nichols strain): 有毒力， 在家兔睾丸或眼前房内接种可获得 Re

7、iter株(Reiter strain): 失去致病力， 转种于含有多种氨基酸的兔睾丸碎片，,培养特性,抵抗力极弱,对温度和干燥特别敏感 在血液中4C经3d死亡 对常用化学消毒剂亦敏感，1%2%石炭酸内数分钟就死亡 对青霉素、四环素、红霉素或砷剂均敏感,致病性,致病因素 目前尚不清楚，有较强的侵袭力：荚膜样物质，黏附因子，透明质酸酶 所致疾病梅毒 梅毒只感染人类 先天梅毒 母体胎盘胎儿 后天梅毒 95%是性接触传播，少数通过输血 等间接途径感染。,先天梅毒（胎传梅毒）,梅毒孕妇通过胎盘传给胎儿，引起胎儿的全身性感染，导致流产、早产或死胎 出生后为梅毒儿，呈现马鞍鼻、锯齿形牙、间质性角膜炎、先天

8、性耳聋等特殊体征,后天梅毒（获得性梅毒） 分三期,I期梅毒： 多见外生殖器，出现无痛性、 直径约1cm的硬性下疳， 含有大量梅毒螺旋体。 48周后，下疳自然愈合。 经23个月无症状潜伏期后 进入第 II 期,特点：传染性极强，破坏性小,II期梅毒,全身皮肤黏膜出现梅毒疹， 周身淋巴结肿大。梅毒疹、 淋巴结肿大内有大量梅毒 螺旋体。不经治疗一般在 13个月后症状自然消退 而痊愈，但常复发。经2 4年，又可被激活进入第期。,特点：感染性强，破坏性小。,期（晚期）梅毒,感染梅毒2年（亦可达 1015年）后，可侵犯 全身组织和器官， 出现慢性肉芽肿病变。 以心血管梅毒和神经 梅毒常见，出现梅毒瘤、 动

9、脉瘤、脊髓痨。,特点：感染性小，破坏性大,免疫性,属有菌免疫，传染性免疫； 细胞免疫为主，体液免疫为辅； 梅毒患者的血清中出现两种抗体： 1. 抗螺旋体抗体： 2. 心脂质抗体：又称反应素（reagin） 能与生物组织中的类脂抗原（如牛心肌）发生非特异性结合反应，可利用其进行血清学诊断。,微生物学检查法,1.标本 期梅毒-硬下疳渗出液 期梅毒-梅毒疹渗出液或局部淋巴结抽出液 血清 2.显微镜检查：暗视野、镀银染色、荧光染色 3.血清学诊断,非密螺旋体抗原试验：测非特异性抗体 用正常牛心肌的心脂质(抗原)检测患者血清中的反应素 方法: RPR试验（rapid plasma reagin,快速血浆

10、反应素） TRUST试验 (tolulized red unheated serum test甲苯胺红未加热血清学试验) VDRL试验（venereal disease research laboratory，性病研究实验室） 意义：适用于梅毒的初筛试验 注意排除假阳性：回归热、结核、红斑狼疮等,3.血清学诊断,密螺旋体抗原试验 Nichols株螺旋体（抗原）螺旋体特异抗体 优点：特异性强，可用作梅毒确诊试验 常用方法： 梅毒螺旋体明胶凝集试验（TPPA） 荧光密螺旋体抗体吸收试验（FTA-ABS）、 梅毒螺旋体血凝试验（TPHA）、 梅毒螺旋体微量血凝试验（MHA-TP） ELISA 免疫印

11、迹法,防治原则,加强性卫生教育和严格社会管理 尚无疫苗预防 治疗用青霉素等药物，以血清中抗体转阴为治愈指标,第三节 疏螺旋体属（Borrelia）,伯氏疏螺旋体(B.burgdorferi),回归热疏螺旋体（B.recurrentis),对人致病的有：,伯氏疏螺旋体 (B.burgdorferi),莱姆病（Lyme）的病原体,（一）形态染色 螺旋稀疏两端稍尖，38个螺旋，运动活泼，运动活跃。Giemsa或Wright染色均佳,一、生物学性状,Wright染色,（二）培养特性 营养要求高微需氧，510CO2促进生长， 可用BSK培养基培养。 生长缓慢， 1218h繁殖一代。 培养23周，长出细小

12、而边缘整齐的小菌落。 （三）抗原： 外膜表面蛋白（outer surface protein，Osp），具有高度免疫原性，种特异性,所致疾病：莱姆病,自然疫源性传染病 储存宿主：野生和驯养的哺乳动物 传播媒介：硬蜱，我国北方林区主要是全沟硬蜱 叮咬部位可出现一个或数个慢性移行性红斑(ECM)，伴有乏力、头痛、发热、颈硬及关节炎等。晚期主要表现为慢性关节炎、慢性神经系统或皮肤异常,硬蜱,硬蜱,慢性移行性红斑(ECM),以血清学试验和分子生物学方法来检测 1）血清学试验：取血清，ELISA和IFA 2）分子生物学：取皮损、血液等，PCR,三、微生物学检查法,预防： 1）疫区人员加强个人防护，避免硬

13、蜱的叮咬。 2）灭活疫苗于1992年获准在美国家犬中使用。人用重组蛋白疫苗（OspA、OspC）正在临床试验中 治疗： 1）早期莱姆病可口服四环素、强力霉素、羟氨苄青霉素及红霉素等。 2）晚期莱姆病由于多种深部组织损害，故一般用青霉素联合头孢三嗪等静脉滴注。,四、防治原则,引起人类回归热的病原体。 根据回归热传播媒介不同，分为两类： 1）虱传回归热，或称流行性回归热，其病原体为回归热疏螺旋体； 2）蜱传回归热，又称地方性回归热，其病原体多至15种，如赫姆疏螺旋体。 我国流行的回归热主要是虱传型。,二、回归热疏螺旋体,致病性 致病过程： 经310天潜伏期，病人突发高热，持续3天退热；由于螺旋体外

14、膜蛋白易变异，约一周后有出现高热，如此反复发作310次左右。,微生物检查 1）取发热期外周血1滴，加盖玻片用暗视野显微镜观察，可见运动活泼螺旋体。 2）取发热期外周血1滴，直接涂片后进行Giemsa或Wright染色，光镜下见为红细胞直径的24倍，螺旋稀疏不规则，呈波状的螺旋体,Wright染色,致病螺旋体的分类,属和代表菌 引起人类疾病 传播方式或媒介,密螺旋体属（Treponema） 苍白密螺旋体苍白亚种 梅毒 性传播 苍白密螺旋体地方亚种 地方性梅毒 黏膜损伤 苍白密螺旋体极细亚种 雅司病 皮肤损伤 品他密螺旋体 品他病 皮肤损伤 疏螺旋体属（Borrelia） 伯氏疏螺旋体 莱姆病 硬

15、蜱 回归热疏螺旋体 流行性回归热 体虱 杜通疏螺旋体 地方性回归热 软蜱 奋森疏螺旋体 咽峡炎、牙龈炎 条件致病 钩端螺旋体属（Leptospira） 问号状钩端螺旋体 钩端螺旋体病 接触疫水,分3个科13个属,思考题,1.能引起人致病的螺旋体有哪些属及代表种？ 2.简述钩端螺旋体的生物学性状（形态染色、培养、抗原分类）及致病性。 3.简述梅毒螺旋体的致病性、免疫性及微生物检查法 。 4.名词解释：螺旋体（spirochete）,病例分析,男性患者，26岁，畏寒，发热，有明显头痛、肌肉痛。尤以腓肠肌压痛明显，肢体无力。结膜充血，浅表淋巴结肿大伴疼痛。有疫水接触史。 从以上情况分析，怀疑是何种病原体感染？ 实验室检查如何确诊？,病例分析,某患者有过不洁性交史，1个月后因外生殖器出现丘疹状硬结就诊，检查发现其硬结呈圆形，基底清晰，边缘隆起，质硬，有无痛性溃疡。 初步怀疑是什么感染？属于哪一期？ 做直接显微镜检查最适宜的标本是什么？ 属于梅毒确证试验的梅毒血清学方法有哪些？,