ELISA试剂盒报价表

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1、ELISA试剂盒报价表子包项目名称型号规格数量类别单价（元）小计（元）1猪瘟病毒抗体检测试剂盒见下附件一1进口2猪伪狂犬gB抗体检测试剂盒见下附件二1进口3猪瘟病毒抗原检测试剂盒见下附件三2进口4猪蓝耳抗体检测试剂盒见下附件四1进口5猪伪狂犬gE抗体检测试剂盒见下附件五1进口合计附件一：猪瘟病毒抗体检测试剂盒技术参数（一）试剂数量用猪瘟病毒抗原包被的ELISA反应板5块。（二）操作步骤在使用时，所有的试剂盒组分都必须恢复到室温1825。使用前应将各组分放置于室温至少一小时。1.分别将50l样品稀释液加入每个检测孔和对照孔中。2.分别将50l的阳性对照和阴性对照加入相应的对照孔中，注意不同对照的

2、吸头要更换。3.分别将50l的被检样品加入剩下的检测孔中，注意不同检样的吸头要分开，以防污染。4.轻弹微量反应板或用振荡器振荡，将反应板中的溶液混匀。5.将微量反应板用封条封闭或于湿箱中（1825）孵育2小时，也可以将微量反应板用封条封闭或于湿箱中孵育过夜。6.吸出反应孔中的液体，并用稀释好的洗涤液洗涤3次，注意每次洗涤时都要将洗涤液加满反应孔，弃去反应孔中的洗涤液并拍干反应板。也可以用洗板机洗涤3次，每个反应孔应加300l左右的洗涤液。注意洗板时要小心，以免样本之间的交叉污染。7.分别将100l的抗-CSFV酶标二抗(即取即用)加入反应孔中，用封条封闭反应板并于室温下或湿箱中孵育30分钟。8

3、.洗板（见6）后，分别将100l的底物溶液加如反应孔中，并于黑暗的、室温条件下放置10分钟。加完第一孔后即可计时。9.在每个反应孔中加入100l的终止液终止反应。注意要按加酶标二抗的顺序加终止液。10.在450nm处测定样本以及对照的吸光度值，也可用双波长（450nm和620nm）测定样本以及对照的吸光度值。空气调零。11.计算样本和对照的平均吸光度值。（三）计算计算被检样本的平均值OD450（ODTEST）、阳性对照的平均值（ODPOS）、阴性对照的平均值（ODNEG）。根据以下公式计算被检样本和阳性对照的阻断率；（阳性对照阻断率的计算方法基本一致）ODNEGODTEST阻断率X 100OD

4、NEG（四）试验有效性阴性对照的平均OD450应大于0.50。阳性对照的阻断率应大于50。（五）结果判定如果被检样本的阻断率大于或等于40，该检样就可以被判为阳性（有CSFV抗体存在）。如果被检样本的阻断率小于或等于30，该检样就可以被判为阴性（无抗CSFV抗体存在）。如果被检样本的阻断率在3040之间，就应过些天再对该动物进行重测。附件二、猪伪狂犬gB抗体检测试剂盒技术参数（一）试剂数量PRV抗原包被的酶标板6块（二）操作步骤注意：所有试剂在使用前一律恢复至室温（2025）。试剂应该旋转或颠倒混匀。1.取出PRV抗原包被板，在记录纸（表）上记录样品位置。2.加100l 2倍稀释的阴性对照血清

5、至A1、B1孔。3.加100l 2倍稀释的阳性对照血清至C1、D1孔。4.加100l处理好样品至相应的孔。5.全部的单一血清样本和全部的混合血清样本的测试在室温（2025）孵育1小时或27过夜孵育（16-20小时）；其中从滤纸上得到的洗出液不必稀释，每孔100ul，要在27过夜孵育（16-20小时）。6.每孔用大约300l稀释好的洗液洗涤微孔35次。每次洗涤后，甩掉孔内的液体。在甩掉液体后，加入酶标抗体前，避免孔壁变干。在最后一次甩干后，在吸水材料上轻扣板，彻底去掉剩余的液体。7.每孔加入100l抗PRV gB酶标抗体。8.室温（2025）孵育20分钟。9.重复步骤6。10.每孔加100l T

6、MB底物溶液。11.室温（2025）孵育15分钟。12.每孔加入50l终止液终止反应。13.以空气作为空白对照对酶标仪进行空白设定。14.在650nm，A（650）测量和记录样品和所有对照的吸光值。15.计算结果。（三）试验有效性要使试验有效，必须满足以下条件：阴性对照平均值减去阳性对照平均值，其差必须大于等于0.30；如测定结果无效，首先应怀疑是操作技术，并在仔细阅读产品说明后重新检测。针对抗原成分的抗体的存在与否，通过计算每个样品的S/N值来决定。（四）结果判定对于血清和全血样本：A快速模式：（1小时孵育/室温：2025）1.若S/N比值小于或等于0.60，样品为PRV抗体阳性。2.若S/

7、N比值小于或等于0.70但大于0.60，该样品必须被重测。如果结果相同，则过一段时间后重新从动物取样进行检测。3.若S/N比值大于0.70，样品则为PRV抗体阴性。B过夜模式：（16-20小时/27）1.S/N比值小于或等于0.50，样品为PRV抗体阳性。2.若S/N比值小于或等于0.60但大于0.50，该样品必须被重测。如果结果相同，则过一段时间后重新从动物取样进行检测。3.若S/N比值大于0.60，样品则为PRV抗体阴性。备注：通过重复确认所有阳性样品。滤纸片测试：A过夜模式：（16-20小时/27）1.若S/N比值小于或等于0.70，样品为PRV抗体阳性。2.若S/N比值大于0.70，样

8、品则为PRV抗体阴性。注意：推荐对所有的阳性样本做进一步双份确认。（五）计算方法1.阴性对照平均值的计算（NC）NC=A1A(650)+B1A(650)/22阳性对照平均值的计算（PC）PC=C1A(650)+D1A(650)/23.样品/阴性对照比率的计算（S/N）S/N=样本A(650)/NC附件三、猪瘟病毒抗原检测试剂盒技术参数（一）试剂数量Ems单克隆抗体包被的微量反应板2块。（二）操作步骤在使用之前，所有的试剂盒组分都必须恢复到室温（1825）。1.取出用抗体包被的微量反应板，并在纪录表上标记好每个样本的位置。2.在每个反应孔中加入50l的检测抗体。3.在阴性对照的双孔中各加50l阴

9、性对照。4.在阳性对照的双孔中各加50l阳性对照。5.在剩下的反应孔中分别加入50l被检样品。对于不同的被检样品要更换吸头。6.轻弹微量反应板或用振荡器振荡，将反应板中的溶液混匀。7.在37的条件下孵育2小时，也可在28的条件下孵育过夜（12-18小时于冰箱中）。在孵育过程中应将微量反应板封闭或在湿盒内孵育，以防反应孔中的液体蒸发。8.吸出反应孔中的液体物质并弃入废液缸中。9.每个反应孔加入约300l的洗涤液进行洗涤，洗涤五次。每次洗涤后吸出所有孔中的液体。在洗涤时以及在加辣根过氧化物酶标记物之前要防止反应板出现干燥现象。在最后一次洗涤完后，将反应板在吸水性强的物质上拍干。10.在每个反应孔中

10、加入100l辣根过氧化物酶标记物。11.在室温下（1825）孵育30分钟。12.重复步骤8和9。13.在每个反应孔中加入100lTMB底物。14.在室温（1825）条件下于黑暗处孵育10分钟。在加完第一个孔后开始计时。15.在每个反应孔中加入100l的终止液终止反应。在加终止液时要按第13步的顺序进行滴加。16.将酶标仪在空气中调零。17.于450nm单波长或450nm和650nm双波测定样本以及对照的吸光值。18.计算结果。（三）结果阳性对照OD的平均值（PCx）与阴性对照OD的平均值（NCx）之差（P-N）必须大于或等于0.150OD，另外阴性对照OD的平均值（NCx）必须小于或等于0.2

11、50 OD。（四）计算被检样品的计算公式：S-N=样品A450-NCx A450（五）结果判定1.被检样品的S-N值等于或小于0.100的，判为阴性。2.被检样品的S-N值大于0.100，小于或等于0.300，判为可疑。3.被检样品的S-N值大于0.300的，判为阳性，需采用更加特异的猪瘟检测方法确认。附件四、猪蓝耳病抗体检测试剂盒技术参数（一）包装规格：5板/盒。（二）操作步骤所有试剂均应在室温下回温平衡30分钟。孵育的时间和说明书所要求的不能相差10%。建议使用一次性的容器进行样品处理（样品稀释液、酶标记二抗、底物溶解液、终止液等）。1.样品和对照血清的排布揭去反应板上的粘贴膜，添加50u

12、l的对照血清：2.添加阳性对照50ul（Vial N5）到A1、B13.添加阴性对照50ul（Vial N6）到C1、D14.血清样品用样品稀释液（Vial N1）进行200倍稀释。-添加5ul的已稀释20倍的样品于待检样品孔内。-添加45ul样品稀释液于待稀释的孔内。5.轻轻震荡均匀后贴上新的封板膜置于372孵育1小时。6.洗板去膜，用配制好的洗液每孔约300ul洗3遍，甩掉液体后在吸水纸上用力拍干，以去除孔内的残留液体，或者用自动洗板机以每孔300ul洗3遍。7.添加酶标二抗在每个孔中添加50ul酶标二抗（Vial N2）。震荡均匀后用新的封板膜封板，在372孵育1小时。8.重复步骤69显

13、色每孔添加底物溶解液50ul（Vial N3），轻摇板2秒。将平板放在黑暗条件下在214 作用10分钟。不用盖封板膜。每孔添加50ul （Vial N6）终止液，添加终止液的顺序应与添加其他样品的顺序一致，轻敲平板2秒以混匀。10读数用软布将板底部的灰尘等杂物擦拭干净后进行读数。用450nm波长或双重450-620nm波长的滤光片进行读数。30分钟内读数均有效。（三）计算计算平均阴性值，平均阳性值，计算样品的IRPC值。（四）实验的有效性阳性对照的平均值OD450 0.6，而且阳性对照平均值/阴性对照平均值 4.0。如果实验不成立，仔细查看说明书后再重复实验。（五）结果判定：IRPC小于或者等

14、于 20.0为阴性，IRPC大于 20.0为阳性。附件五、猪伪狂犬gE抗体检测试剂盒(一)包装规格：5板/盒（二）检测步骤1.试剂的准备：所有的试剂在使用前，必须回温到室温。阳性对照、阴性对照、酶标二抗、样品稀释液、底物和终止液可直接使用。2样本的准备阳性对照，阴性对照分别做2孔。-分别在A1和B1孔内加入50ul阴性对照-分别在C1和D1孔内加入50ul阳性对照。-在剩余孔内加入50ul样品-然后再所加对照和样品孔内均加入50ul样品稀释液盖上膜，在37作用60分钟。3.洗板过程去膜，用300ul（1 X ）的洗液洗4遍，并在吸水纸上将平板弄干，最后一次将板孔内液体尽量拍干。4.加入酶标二抗

15、在每个孔中加入100ul 酶标抗体，盖上膜在37 反应30分钟。5洗板过程去膜，用300ul（1 X ）的洗液洗4遍，并在吸水纸上将平板弄干，最后一次将板孔内液体尽量拍干。6加入底物在每个孔中加入100ul的底物。将包被板放在黑暗中在18-25 作用15分钟。7.加入终止液8.加入100ul的终止液，轻敲包被板混匀。（加入的顺序同加入底物的顺序）读取数据9在450nm下读数并记录结果。（三）结果的计算可行的结果的条件：阴性对照值阳性对照值0.6，阳性对照阻断值60%用INH%来说明检测的结果，以下是它的计算方式 INH%= （阴性对照平均值样品的OD值）/（阴性对照平均值）X100结果说明：样品INH%阴性45备注：1、以上设备报价必须含税、运输、安装等费用； 2、以上设备招标人按子包进行独立定标。单位名称：联系人：联系电话：日期：文档可自由编辑打印