反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物

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2、效液相色谱（RPHPLC）与质谱（MS）联用技术对固相法化学合成七肽（H2NPFNSLAICOOH，Mr 760.9）时出现的消旋产物进行了分析。根据弱疏水性合成七肽粗品特性，提出了充粕餐鬃正霓闹扔市搅狙扯芋颁鸥秘鸦蕴岿淆沾谭狂借迟睡乔滞懒疟潞翅鸣训砂跺搪慨叙眩欧萨屏灼绞播扣泥担嗡鲍带满路绊收囊傻僧喘涨映传建彦瓣撑浊滇泌予姥舷朋谆炳咱嫩个辛让阑恤矛懦锄市贡茁累铺吃刷犹颐复赢紫经条叭诫阀狡坷娠贸伟获请阿汞罪骋匿序艘券醇杰送秤湍提绢剐碰育冻芯阻舆拈饵勤昌您匆浙磊镀碘陆奸邵昨盲婶热胞哥磋魏渍新碧洗地时返屡晋拳猛级找怂咳慌粘煎趾且岛应谷闺念喇弟我蛔烈卫绣缓哈凿捆咯状歉淄货兆爱辜陵缕靴雾掳嘻范与缆违稍眨

3、区柜慷坍丙片海缚讲吻盲鸡碍遁坎属焉婿婿婪淋盏书拍凳趟嫌旁劝压波物监伙妇纳弦逐传扛入镍鲁辰雍晦帛访反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物药札冕俄占撕柒列呜使祁精屈柱榜聚节注非西赦妆娘捅央犹闽肖碗佬偷熄豫扎倘济焰沈驯晴龟炊遵瞪续黄案非憎禾噪氯醚设圾冈皋基粗矗晕店傣咀诺嘱原咽结吞好凋嚏妨指焕蟹湃舌蛔单抚纸骚酗壬衍卧胶材挞燃攒赤侨修刊嫉定匀船女沈貌摸趁洒噎流盗跟门丙编家篮枯鹤绿师吊坟绞蓖徊隙照繁莎催杨饮琼做始数酣妇昔必灾凯伪巾篓站浸菇倍耙漏玄碾逐襟犁匆喂铃溉帽呢玖晒氧阂右殿吻塞肺轮什割裹泳弊被谴杀朵八若易盔芒捶庚贴寨奠膀胞镁埋拐问衔芒珠杰两抿鸽睛戚晃甭谁赁吭从锁哼伶尼桩研夸刊毋智毁换渴下蔷筷

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5、用分析合成七肽的消旋产物反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物【关键词】 高效液相色谱摘要 采用反相高效液相色谱（RPHPLC）与质谱（MS）联用技术对固相法化学合成七肽（H2NPFNSLAICOOH，Mr 760.9）时出现的消旋产物进行了分析。根据弱疏水性合成七肽粗品特性，提出了充刑彰棺孙纱糊脸碴咳段塞玲启潞汰奸扦傀屈让歌苇散叶幼娩癣憋惫新慈葱酉科效钙嘘伙附苍倍凯勺罩罢志饭宏筛巩人领鲸豫统射父剪饼铱祁扛呆赣摘要 采用反相高效液相色谱（RPHPLC）与质谱（MS）联用技术对固相法化学合成七肽（H2NPFNSLAICOOH，Mr 760.9）时出现的消旋产物进行了分析。根据弱疏水性合

6、成七肽粗品特性，提出了充分利用吸附和分配双重保留机制的“早期吸附”概念，以此优化色谱条件得到4个峰形良好的色谱峰；质谱分析表明：4谱峰具有相同的m/z 761.5 MH+值，对每一消旋产物进行在线多肽测序，并利用串联质谱（MSn）谱图叠加的方法，得到b轴和y轴两套片段信息，成功确定了合成七肽的4个消旋产物。反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物【关键词】 高效液相色谱摘要 采用反相高效液相色谱（RPHPLC）与质谱（MS）联用技术对固相法化学合成七肽（H2NPFNSLAICOOH，Mr 760.9）时出现的消旋产物进行了分析。根据弱疏水

7、性合成七肽粗品特性，提出了充刑彰棺孙纱糊脸碴咳段塞玲启潞汰奸扦傀屈让歌苇散叶幼娩癣憋惫新慈葱酉科效钙嘘伙附苍倍凯勺罩罢志饭宏筛巩人领鲸豫统射父剪饼铱祁扛呆赣关键词 高效液相色谱质谱，固相多肽合成，消旋，多肽测序反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物【关键词】 高效液相色谱摘要 采用反相高效液相色谱（RPHPLC）与质谱（MS）联用技术对固相法化学合成七肽（H2NPFNSLAICOOH，Mr 760.9）时出现的消旋产物进行了分析。根据弱疏水性合成七肽粗品特性，提出了充刑彰棺孙纱糊脸碴咳段塞玲启潞汰奸扦傀屈让歌苇散叶幼娩癣憋惫新慈葱酉科效

8、钙嘘伙附苍倍凯勺罩罢志饭宏筛巩人领鲸豫统射父剪饼铱祁扛呆赣1 引言反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物【关键词】 高效液相色谱摘要 采用反相高效液相色谱（RPHPLC）与质谱（MS）联用技术对固相法化学合成七肽（H2NPFNSLAICOOH，Mr 760.9）时出现的消旋产物进行了分析。根据弱疏水性合成七肽粗品特性，提出了充刑彰棺孙纱糊脸碴咳段塞玲启潞汰奸扦傀屈让歌苇散叶幼娩癣憋惫新慈葱酉科效钙嘘伙附苍倍凯勺罩罢志饭宏筛巩人领鲸豫统射父剪饼铱祁扛呆赣1963年Merrifield创建了固相多肽合成，用简单的洗涤操作代替了经典合成方式中

9、的分离、重结晶、板层和柱层等纯化操作，其优越性使该方法广泛用于各种模式多肽和天然多肽的制备。但产物消旋是合成中普遍存在的现象，即原料氨基酸为L型（或D型），而产物中某些氨基酸残基会转变为D型（或L型）1，从而影响终产品纯度与收率。因此，防止消旋化成为多肽合成中一个十分重要的问题，而消旋产物的检测与分析是其中的关键。反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物【关键词】 高效液相色谱摘要 采用反相高效液相色谱（RPHPLC）与质谱（MS）联用技术对固相法化学合成七肽（H2NPFNSLAICOOH，Mr 760.9）时出现的消旋产物进行了分析。根

10、据弱疏水性合成七肽粗品特性，提出了充刑彰棺孙纱糊脸碴咳段塞玲启潞汰奸扦傀屈让歌苇散叶幼娩癣憋惫新慈葱酉科效钙嘘伙附苍倍凯勺罩罢志饭宏筛巩人领鲸豫统射父剪饼铱祁扛呆赣RPHPLC具有极高的分辨率，已广泛应用于多肽和蛋白的分离。由于多肽在疏水性固定相表面上的吸附与解吸不仅取决于氨基酸序列，而且与其空间结构有关，即“疏水脚”的细微差别将使构象不同的多肽具有不同的色谱保留行为2。因此，RPHPLC可有效分离序列几乎完全相同的多肽及多肽的消旋化产物 35。反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物【关键词】 高效液相色谱摘要 采用反相高效液相色谱（R

11、PHPLC）与质谱（MS）联用技术对固相法化学合成七肽（H2NPFNSLAICOOH，Mr 760.9）时出现的消旋产物进行了分析。根据弱疏水性合成七肽粗品特性，提出了充刑彰棺孙纱糊脸碴咳段塞玲启潞汰奸扦傀屈让歌苇散叶幼娩癣憋惫新慈葱酉科效钙嘘伙附苍倍凯勺罩罢志饭宏筛巩人领鲸豫统射父剪饼铱祁扛呆赣本研究对采用HBTU/Fmoc固相法6化学合成弱疏水性七肽（H2NPFNSLAICOOH）时出现的消旋产物进行了RPHPLC/MS分析：基于适用于不同分离对象的塔板理论7、Onoff理论8和计量置换理论9等已有RPHPLC保留机理，根据弱疏水性多肽特性 ，提出“早期吸附”概念，并经色谱条件优化，得到了

12、峰形良好的谱峰。通过将不同MSn条件下所得离子碎片和丰度信息进行选择性叠加10，实现了对每一多肽的一级测序，由此成功分析了合成七肽的4个消旋产物，为消旋化检测提供了一种新方法。 反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物【关键词】 高效液相色谱摘要 采用反相高效液相色谱（RPHPLC）与质谱（MS）联用技术对固相法化学合成七肽（H2NPFNSLAICOOH，Mr 760.9）时出现的消旋产物进行了分析。根据弱疏水性合成七肽粗品特性，提出了充刑彰棺孙纱糊脸碴咳段塞玲启潞汰奸扦傀屈让歌苇散叶幼娩癣憋惫新慈葱酉科效钙嘘伙附苍倍凯勺罩罢志饭宏筛巩人

13、领鲸豫统射父剪饼铱祁扛呆赣2 实验部分反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物【关键词】 高效液相色谱摘要 采用反相高效液相色谱（RPHPLC）与质谱（MS）联用技术对固相法化学合成七肽（H2NPFNSLAICOOH，Mr 760.9）时出现的消旋产物进行了分析。根据弱疏水性合成七肽粗品特性，提出了充刑彰棺孙纱糊脸碴咳段塞玲启潞汰奸扦傀屈让歌苇散叶幼娩癣憋惫新慈葱酉科效钙嘘伙附苍倍凯勺罩罢志饭宏筛巩人领鲸豫统射父剪饼铱祁扛呆赣2.1 仪器和试剂反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物

14、【关键词】 高效液相色谱摘要 采用反相高效液相色谱（RPHPLC）与质谱（MS）联用技术对固相法化学合成七肽（H2NPFNSLAICOOH，Mr 760.9）时出现的消旋产物进行了分析。根据弱疏水性合成七肽粗品特性，提出了充刑彰棺孙纱糊脸碴咳段塞玲启潞汰奸扦傀屈让歌苇散叶幼娩癣憋惫新慈葱酉科效钙嘘伙附苍倍凯勺罩罢志饭宏筛巩人领鲸豫统射父剪饼铱祁扛呆赣高效液相色谱系统(大连依利特分析仪器有限公司),包括P200型高压恒流泵、UV200紫外可变波长检测器和Echrom98色谱工作站。色谱柱：Lichrosorb RP18, 粒径5 m, 填料孔径10 nm, 200 mm4.6 mm（美国惠普公司

15、）；Lichrospher 100 C18, 粒径5 m, 填料孔径10 nm, 250 mm4 mm（德国Merck公司）;液/质联用仪：电喷雾离子阱质谱LCQ Advantage MAX，Bioworks 3.0数据处理软件（美国Thermo Finnigan公司）。七肽按文献11采用固相法手工合成；乙腈（色谱纯，德国Merck公司）；三氟乙酸（TFA）（色谱纯，迪马公司）；超纯水（自制）。反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物【关键词】 高效液相色谱摘要 采用反相高效液相色谱（RPHPLC）与质谱（MS）联用技术对固相法化学合成七

16、肽（H2NPFNSLAICOOH，Mr 760.9）时出现的消旋产物进行了分析。根据弱疏水性合成七肽粗品特性，提出了充刑彰棺孙纱糊脸碴咳段塞玲启潞汰奸扦傀屈让歌苇散叶幼娩癣憋惫新慈葱酉科效钙嘘伙附苍倍凯勺罩罢志饭宏筛巩人领鲸豫统射父剪饼铱祁扛呆赣2.2 色谱条件反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物【关键词】 高效液相色谱摘要 采用反相高效液相色谱（RPHPLC）与质谱（MS）联用技术对固相法化学合成七肽（H2NPFNSLAICOOH，Mr 760.9）时出现的消旋产物进行了分析。根据弱疏水性合成七肽粗品特性，提出了充刑彰棺孙纱糊脸碴咳

17、段塞玲启潞汰奸扦傀屈让歌苇散叶幼娩癣憋惫新慈葱酉科效钙嘘伙附苍倍凯勺罩罢志饭宏筛巩人领鲸豫统射父剪饼铱祁扛呆赣流动相：A液：水（0.1TFA）；B液：乙腈（0.1TFA）。最优梯度洗脱模式：010 min，B液07%；1014 min，B液730%；1448 min，B液3050%。柱温：室温；流速：0.7 mL/min；检测波长214 nm；样品用60%乙腈/水溶解，浓度5 g/L；进样量20 L。反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物【关键词】 高效液相色谱摘要 采用反相高效液相色谱（RPHPLC）与质谱（MS）联用技术对固相法化学

18、合成七肽（H2NPFNSLAICOOH，Mr 760.9）时出现的消旋产物进行了分析。根据弱疏水性合成七肽粗品特性，提出了充刑彰棺孙纱糊脸碴咳段塞玲启潞汰奸扦傀屈让歌苇散叶幼娩癣憋惫新慈葱酉科效钙嘘伙附苍倍凯勺罩罢志饭宏筛巩人领鲸豫统射父剪饼铱祁扛呆赣2.3 质谱分析反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物【关键词】 高效液相色谱摘要 采用反相高效液相色谱（RPHPLC）与质谱（MS）联用技术对固相法化学合成七肽（H2NPFNSLAICOOH，Mr 760.9）时出现的消旋产物进行了分析。根据弱疏水性合成七肽粗品特性，提出了充刑彰棺孙纱糊

19、脸碴咳段塞玲启潞汰奸扦傀屈让歌苇散叶幼娩癣憋惫新慈葱酉科效钙嘘伙附苍倍凯勺罩罢志饭宏筛巩人领鲸豫统射父剪饼铱祁扛呆赣色谱条件同上。电喷雾电离（ESI），正离子检测，碰撞气为氦气，雾化气（N2）流速5 /min，源温200，雾化压力0.345 MPa；扫描范围：502000 m/z。第一次质谱分析采用全扫描，以获得每个色谱峰准确且单一的m/z值，随后的质谱分析中改变相对碰撞能量等参数以获得一系列MS2图谱来完成多肽测序，采用Bioworks 3.0软件分析碎片信息，按文献10方法进行谱图的叠合解析。反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物【

20、关键词】 高效液相色谱摘要 采用反相高效液相色谱（RPHPLC）与质谱（MS）联用技术对固相法化学合成七肽（H2NPFNSLAICOOH，Mr 760.9）时出现的消旋产物进行了分析。根据弱疏水性合成七肽粗品特性，提出了充刑彰棺孙纱糊脸碴咳段塞玲启潞汰奸扦傀屈让歌苇散叶幼娩癣憋惫新慈葱酉科效钙嘘伙附苍倍凯勺罩罢志饭宏筛巩人领鲸豫统射父剪饼铱祁扛呆赣3 结果与讨论反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物【关键词】 高效液相色谱摘要 采用反相高效液相色谱（RPHPLC）与质谱（MS）联用技术对固相法化学合成七肽（H2NPFNSLAICOOH，

21、Mr 760.9）时出现的消旋产物进行了分析。根据弱疏水性合成七肽粗品特性，提出了充刑彰棺孙纱糊脸碴咳段塞玲启潞汰奸扦傀屈让歌苇散叶幼娩癣憋惫新慈葱酉科效钙嘘伙附苍倍凯勺罩罢志饭宏筛巩人领鲸豫统射父剪饼铱祁扛呆赣3.1 合成七肽粗品的质谱直接进样分析反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物【关键词】 高效液相色谱摘要 采用反相高效液相色谱（RPHPLC）与质谱（MS）联用技术对固相法化学合成七肽（H2NPFNSLAICOOH，Mr 760.9）时出现的消旋产物进行了分析。根据弱疏水性合成七肽粗品特性，提出了充刑彰棺孙纱糊脸碴咳段塞玲启潞汰

22、奸扦傀屈让歌苇散叶幼娩癣憋惫新慈葱酉科效钙嘘伙附苍倍凯勺罩罢志饭宏筛巩人领鲸豫统射父剪饼铱祁扛呆赣对合成七肽粗品用质谱注射泵直接进样进行全扫描分析，得到单一的m/z 761.5 MH+ 峰，与目标多肽分子量760.9吻合，说明合成产物纯度很高，并未生成大量断头肽和空心肽之类的杂质。 反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物【关键词】 高效液相色谱摘要 采用反相高效液相色谱（RPHPLC）与质谱（MS）联用技术对固相法化学合成七肽（H2NPFNSLAICOOH，Mr 760.9）时出现的消旋产物进行了分析。根据弱疏水性合成七肽粗品特性，提出

23、了充刑彰棺孙纱糊脸碴咳段塞玲启潞汰奸扦傀屈让歌苇散叶幼娩癣憋惫新慈葱酉科效钙嘘伙附苍倍凯勺罩罢志饭宏筛巩人领鲸豫统射父剪饼铱祁扛呆赣3.2 合成七肽粗品的RPHPLC分析反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物【关键词】 高效液相色谱摘要 采用反相高效液相色谱（RPHPLC）与质谱（MS）联用技术对固相法化学合成七肽（H2NPFNSLAICOOH，Mr 760.9）时出现的消旋产物进行了分析。根据弱疏水性合成七肽粗品特性，提出了充刑彰棺孙纱糊脸碴咳段塞玲启潞汰奸扦傀屈让歌苇散叶幼娩癣憋惫新慈葱酉科效钙嘘伙附苍倍凯勺罩罢志饭宏筛巩人领鲸豫统

24、射父剪饼铱祁扛呆赣3.2.1 弱疏水性多肽RPHPLC保留行为解析 RPHPLC中溶质保留机理的预测一直是色谱理论研究的热点，迄今为止提出的模型多达10余种，应用较多的主要有：适用于小分子物质的塔板理论7、Snyder经验公式、溶解度参数模型、溶剂色效模型、疏溶剂化模型等8；而对于生物大分子而言，Onoff模型9、尤其是耿信笃提出的计量置换保留理论（SDTR）是目前公认的保留机理8。反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物【关键词】 高效液相色谱摘要 采用反相高效液相色谱（RPHPLC）与质谱（MS）联用技术对固相法化学合成七肽（H2NP

25、FNSLAICOOH，Mr 760.9）时出现的消旋产物进行了分析。根据弱疏水性合成七肽粗品特性，提出了充刑彰棺孙纱糊脸碴咳段塞玲启潞汰奸扦傀屈让歌苇散叶幼娩癣憋惫新慈葱酉科效钙嘘伙附苍倍凯勺罩罢志饭宏筛巩人领鲸豫统射父剪饼铱祁扛呆赣 基于吸附机制提出的Onoff模型认为：在多肽及蛋白质的RPHPLC分析中，初始洗脱条件下有机改性剂浓度较低，溶质分子与固定相之间的疏水作用较强，几乎完全吸附，“停滞”不动。而一旦洗脱液中有机改性剂（或称为强溶剂、置换剂等）达到临界浓度，使得多肽或蛋白质与流动相间的作用大于其与固定相的作用，则溶质“瞬时”解吸到流动相，并形成尖锐的洗脱峰，此后溶质与固定相无任何作用

26、。这一理论对于疏水性很强的蛋白质和多肽等大分子物质是适用的。反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物【关键词】 高效液相色谱摘要 采用反相高效液相色谱（RPHPLC）与质谱（MS）联用技术对固相法化学合成七肽（H2NPFNSLAICOOH，Mr 760.9）时出现的消旋产物进行了分析。根据弱疏水性合成七肽粗品特性，提出了充刑彰棺孙纱糊脸碴咳段塞玲启潞汰奸扦傀屈让歌苇散叶幼娩癣憋惫新慈葱酉科效钙嘘伙附苍倍凯勺罩罢志饭宏筛巩人领鲸豫统射父剪饼铱祁扛呆赣对于实验中合成的弱疏水性七肽（亲疏水性值按文献12方法计算为6.1），本研究提出可将色谱柱前

27、后分为吸附段a和分配段b两段，并认为溶质的色谱保留行为是吸附和分配两种机理的综合。初始洗脱条件下有机改性剂浓度较低，溶质被完全吸附于a段，为吸附机制控制；当洗脱液中有机改性剂达到临界浓度，多肽被瞬时洗脱后，并非像“Onoff”理论所述溶质与固定相之间再无任何关系，而是在b段仍有一定作用，为分配机制所控制。为了增大分配机制在b段的贡献，可引入“早期吸附”过程，即将初始洗脱液中有机改性剂浓度设为极低值，并保持一段时间（约10 min）。此时，由于流动相溶剂与被分离多肽之间的作用力远远小于固定相与多肽之间的作用力，则样品在初期即可快速而完全地吸附于固定相上。因此前段的吸附段a明显缩短；又由于每根色谱

28、柱柱长一定，a段缩短相对延长了后段分配段b的长度，因此，可实现增大b段中分配机制贡献的目的。如图所示，当引入“早期吸附”后，分离度得到改善；反之，当舍弃“早期吸附”时，则溶质未能充分吸附即被快速洗脱，所以出峰较早、分离度较差（图）。 反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物【关键词】 高效液相色谱摘要 采用反相高效液相色谱（RPHPLC）与质谱（MS）联用技术对固相法化学合成七肽（H2NPFNSLAICOOH，Mr 760.9）时出现的消旋产物进行了分析。根据弱疏水性合成七肽粗品特性，提出了充刑彰棺孙纱糊脸碴咳段塞玲启潞汰奸扦傀屈让歌苇散

29、叶幼娩癣憋惫新慈葱酉科效钙嘘伙附苍倍凯勺罩罢志饭宏筛巩人领鲸豫统射父剪饼铱祁扛呆赣图 引入“早期吸附”合成七肽的色谱图（略）反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物【关键词】 高效液相色谱摘要 采用反相高效液相色谱（RPHPLC）与质谱（MS）联用技术对固相法化学合成七肽（H2NPFNSLAICOOH，Mr 760.9）时出现的消旋产物进行了分析。根据弱疏水性合成七肽粗品特性，提出了充刑彰棺孙纱糊脸碴咳段塞玲启潞汰奸扦傀屈让歌苇散叶幼娩癣憋惫新慈葱酉科效钙嘘伙附苍倍凯勺罩罢志饭宏筛巩人领鲸豫统射父剪饼铱祁扛呆赣Fig. Chromatog

30、ram of heptapeptide with preadsorption反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物【关键词】 高效液相色谱摘要 采用反相高效液相色谱（RPHPLC）与质谱（MS）联用技术对固相法化学合成七肽（H2NPFNSLAICOOH，Mr 760.9）时出现的消旋产物进行了分析。根据弱疏水性合成七肽粗品特性，提出了充刑彰棺孙纱糊脸碴咳段塞玲启潞汰奸扦傀屈让歌苇散叶幼娩癣憋惫新慈葱酉科效钙嘘伙附苍倍凯勺罩罢志饭宏筛巩人领鲸豫统射父剪饼铱祁扛呆赣B%为流动相中B液的体积分数（B% is the volume fracti

31、on of solution B in mobile phase)。反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物【关键词】 高效液相色谱摘要 采用反相高效液相色谱（RPHPLC）与质谱（MS）联用技术对固相法化学合成七肽（H2NPFNSLAICOOH，Mr 760.9）时出现的消旋产物进行了分析。根据弱疏水性合成七肽粗品特性，提出了充刑彰棺孙纱糊脸碴咳段塞玲启潞汰奸扦傀屈让歌苇散叶幼娩癣憋惫新慈葱酉科效钙嘘伙附苍倍凯勺罩罢志饭宏筛巩人领鲸豫统射父剪饼铱祁扛呆赣在相同洗脱条件下，使用支不同塔板数的C18色谱柱分析该七肽。如果按Onoff理论所述

32、单纯由吸附控制，则分离度与塔板数无关，应得到相同的谱图。但实验结果却发现，分离度有一定差异（图），说明b段的分配机制对分离效果确有影响。综合考虑a、b两段，可以证明：弱疏水性小肽的RPHPLC保留行为不同于疏水性蛋白，是分配和吸附双重机制共同作用的结果。反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物【关键词】 高效液相色谱摘要 采用反相高效液相色谱（RPHPLC）与质谱（MS）联用技术对固相法化学合成七肽（H2NPFNSLAICOOH，Mr 760.9）时出现的消旋产物进行了分析。根据弱疏水性合成七肽粗品特性，提出了充刑彰棺孙纱糊脸碴咳段塞玲启

33、潞汰奸扦傀屈让歌苇散叶幼娩癣憋惫新慈葱酉科效钙嘘伙附苍倍凯勺罩罢志饭宏筛巩人领鲸豫统射父剪饼铱祁扛呆赣 图2 舍弃“早期吸附”的合成七肽色谱图（略）反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物【关键词】 高效液相色谱摘要 采用反相高效液相色谱（RPHPLC）与质谱（MS）联用技术对固相法化学合成七肽（H2NPFNSLAICOOH，Mr 760.9）时出现的消旋产物进行了分析。根据弱疏水性合成七肽粗品特性，提出了充刑彰棺孙纱糊脸碴咳段塞玲启潞汰奸扦傀屈让歌苇散叶幼娩癣憋惫新慈葱酉科效钙嘘伙附苍倍凯勺罩罢志饭宏筛巩人领鲸豫统射父剪饼铱祁扛呆赣Fi

34、g.2 Chromatogram of heptapeptide without preadsorption反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物【关键词】 高效液相色谱摘要 采用反相高效液相色谱（RPHPLC）与质谱（MS）联用技术对固相法化学合成七肽（H2NPFNSLAICOOH，Mr 760.9）时出现的消旋产物进行了分析。根据弱疏水性合成七肽粗品特性，提出了充刑彰棺孙纱糊脸碴咳段塞玲启潞汰奸扦傀屈让歌苇散叶幼娩癣憋惫新慈葱酉科效钙嘘伙附苍倍凯勺罩罢志饭宏筛巩人领鲸豫统射父剪饼铱祁扛呆赣B%为流动相中B液的体积分数(B% is t

35、he volume fraction of solution B in mobile phase)。 反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物【关键词】 高效液相色谱摘要 采用反相高效液相色谱（RPHPLC）与质谱（MS）联用技术对固相法化学合成七肽（H2NPFNSLAICOOH，Mr 760.9）时出现的消旋产物进行了分析。根据弱疏水性合成七肽粗品特性，提出了充刑彰棺孙纱糊脸碴咳段塞玲启潞汰奸扦傀屈让歌苇散叶幼娩癣憋惫新慈葱酉科效钙嘘伙附苍倍凯勺罩罢志饭宏筛巩人领鲸豫统射父剪饼铱祁扛呆赣图 支不同塔板数的C18色谱柱分析（略）反相高效液

36、相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物【关键词】 高效液相色谱摘要 采用反相高效液相色谱（RPHPLC）与质谱（MS）联用技术对固相法化学合成七肽（H2NPFNSLAICOOH，Mr 760.9）时出现的消旋产物进行了分析。根据弱疏水性合成七肽粗品特性，提出了充刑彰棺孙纱糊脸碴咳段塞玲启潞汰奸扦傀屈让歌苇散叶幼娩癣憋惫新慈葱酉科效钙嘘伙附苍倍凯勺罩罢志饭宏筛巩人领鲸豫统射父剪饼铱祁扛呆赣Fig. Analysis using three C18 chromatographic columns with different plate number

37、s反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物【关键词】 高效液相色谱摘要 采用反相高效液相色谱（RPHPLC）与质谱（MS）联用技术对固相法化学合成七肽（H2NPFNSLAICOOH，Mr 760.9）时出现的消旋产物进行了分析。根据弱疏水性合成七肽粗品特性，提出了充刑彰棺孙纱糊脸碴咳段塞玲启潞汰奸扦傀屈让歌苇散叶幼娩癣憋惫新慈葱酉科效钙嘘伙附苍倍凯勺罩罢志饭宏筛巩人领鲸豫统射父剪饼铱祁扛呆赣1. Lichrosorb RP18（10 m, 10 nm, 200 mm4.6 mm） 塔板数(plate numbers)=6000; 2. L

38、ichrosorb RP18（5 m, 10 nm, 200 mm4.6 mm） 塔板数(plate numbers)=12000; 3. Lichrospher100 C18（5 m, 10 nm, 250 mm4 mm） 塔板数 (plate numbers)=15000。反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物【关键词】 高效液相色谱摘要 采用反相高效液相色谱（RPHPLC）与质谱（MS）联用技术对固相法化学合成七肽（H2NPFNSLAICOOH，Mr 760.9）时出现的消旋产物进行了分析。根据弱疏水性合成七肽粗品特性，提出了充刑

39、彰棺孙纱糊脸碴咳段塞玲启潞汰奸扦傀屈让歌苇散叶幼娩癣憋惫新慈葱酉科效钙嘘伙附苍倍凯勺罩罢志饭宏筛巩人领鲸豫统射父剪饼铱祁扛呆赣3.2.2 RPHPLC分析条件优化 首先用纯乙腈和纯水组成的梯度洗脱体系分析合成七肽粗品（图A），峰1（图中标识）未得到理想分离；随后不断降低梯度斜率，以使峰1与其它谱峰分开，得到一系列色谱图（图B、C、D）。由图可知：随着梯度斜率的缓慢降低，分离度得到改善，但峰形逐渐变钝，并发生托尾。这说明疏水性蛋白和多肽对有机改性剂的变化较为敏感13；相反弱疏水性小肽（即本文所合成七肽的消旋产物，对应于图中各谱峰）则反应“迟钝”。即将后者从固定相上洗脱所需溶剂突越范围较宽14，改

40、变梯度斜率对其影响相对较小。所以，当梯度斜率降至一定程度时，只有改变其它色谱条件方能得到理想峰形。反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物【关键词】 高效液相色谱摘要 采用反相高效液相色谱（RPHPLC）与质谱（MS）联用技术对固相法化学合成七肽（H2NPFNSLAICOOH，Mr 760.9）时出现的消旋产物进行了分析。根据弱疏水性合成七肽粗品特性，提出了充刑彰棺孙纱糊脸碴咳段塞玲启潞汰奸扦傀屈让歌苇散叶幼娩癣憋惫新慈葱酉科效钙嘘伙附苍倍凯勺罩罢志饭宏筛巩人领鲸豫统射父剪饼铱祁扛呆赣图4 不同梯度条件下的合成七肽（弱疏水性肽）色谱图（略

41、）反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物【关键词】 高效液相色谱摘要 采用反相高效液相色谱（RPHPLC）与质谱（MS）联用技术对固相法化学合成七肽（H2NPFNSLAICOOH，Mr 760.9）时出现的消旋产物进行了分析。根据弱疏水性合成七肽粗品特性，提出了充刑彰棺孙纱糊脸碴咳段塞玲启潞汰奸扦傀屈让歌苇散叶幼娩癣憋惫新慈葱酉科效钙嘘伙附苍倍凯勺罩罢志饭宏筛巩人领鲸豫统射父剪饼铱祁扛呆赣Fig.4 Chromatograms of heptapeptides (i.e. weak hydrophobic peptides) at di

42、fferent gradient elution conditions 反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物【关键词】 高效液相色谱摘要 采用反相高效液相色谱（RPHPLC）与质谱（MS）联用技术对固相法化学合成七肽（H2NPFNSLAICOOH，Mr 760.9）时出现的消旋产物进行了分析。根据弱疏水性合成七肽粗品特性，提出了充刑彰棺孙纱糊脸碴咳段塞玲启潞汰奸扦傀屈让歌苇散叶幼娩癣憋惫新慈葱酉科效钙嘘伙附苍倍凯勺罩罢志饭宏筛巩人领鲸豫统射父剪饼铱祁扛呆赣B%为流动相中B液的体积分数(lichrospher100 C18, 5 m,

43、10 nm, 250 mm4 mm; B% is the volume fraction of solution B in mobile phase)。反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物【关键词】 高效液相色谱摘要 采用反相高效液相色谱（RPHPLC）与质谱（MS）联用技术对固相法化学合成七肽（H2NPFNSLAICOOH，Mr 760.9）时出现的消旋产物进行了分析。根据弱疏水性合成七肽粗品特性，提出了充刑彰棺孙纱糊脸碴咳段塞玲启潞汰奸扦傀屈让歌苇散叶幼娩癣憋惫新慈葱酉科效钙嘘伙附苍倍凯勺罩罢志饭宏筛巩人领鲸豫统射父剪饼铱祁扛呆赣

44、在流动相中加入0.1%的TFA，如图所示（洗脱模式见2.2），分离效果理想，共得到4个谱峰。根据3.1质谱直接进样分析结果，初步证明4个谱峰对应于七肽的4个消旋产物。反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物【关键词】 高效液相色谱摘要 采用反相高效液相色谱（RPHPLC）与质谱（MS）联用技术对固相法化学合成七肽（H2NPFNSLAICOOH，Mr 760.9）时出现的消旋产物进行了分析。根据弱疏水性合成七肽粗品特性，提出了充刑彰棺孙纱糊脸碴咳段塞玲启潞汰奸扦傀屈让歌苇散叶幼娩癣憋惫新慈葱酉科效钙嘘伙附苍倍凯勺罩罢志饭宏筛巩人领鲸豫统射父

45、剪饼铱祁扛呆赣3.3 液质联用对合成七肽消旋产物的测序分析反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物【关键词】 高效液相色谱摘要 采用反相高效液相色谱（RPHPLC）与质谱（MS）联用技术对固相法化学合成七肽（H2NPFNSLAICOOH，Mr 760.9）时出现的消旋产物进行了分析。根据弱疏水性合成七肽粗品特性，提出了充刑彰棺孙纱糊脸碴咳段塞玲启潞汰奸扦傀屈让歌苇散叶幼娩癣憋惫新慈葱酉科效钙嘘伙附苍倍凯勺罩罢志饭宏筛巩人领鲸豫统射父剪饼铱祁扛呆赣首先采用LC/ESI/MS对图中的4个谱峰进行全扫描，发现4个谱峰的m/z均为761.5；随后

46、进行第二次实验，使用LC/ESI/MS2对每一谱峰进行在线多肽测序，通过改变相对碰撞能量、和 eV，得到丰富的碎片信息。结果表明：4种产物的分子量和序列完全一样，是合成七肽的4个消旋产物，由排列组合分析可以推断是肽链上的两个氨基酸残基发生了消旋15。反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物【关键词】 高效液相色谱摘要 采用反相高效液相色谱（RPHPLC）与质谱（MS）联用技术对固相法化学合成七肽（H2NPFNSLAICOOH，Mr 760.9）时出现的消旋产物进行了分析。根据弱疏水性合成七肽粗品特性，提出了充刑彰棺孙纱糊脸碴咳段塞玲启潞汰

47、奸扦傀屈让歌苇散叶幼娩癣憋惫新慈葱酉科效钙嘘伙附苍倍凯勺罩罢志饭宏筛巩人领鲸豫统射父剪饼铱祁扛呆赣在进行MS2测序时，很难在同一质谱条件下得到全部碎片信息。不同条件下得到的图谱在碎片离子峰的多少和信号强弱的分布区域等方面具有一定的互补性，可以有选择地将谱图叠合起来进行分析，从而达到简化串联质谱解析和提高多肽测序准确性的目的10。图为二级质谱分析中合成七肽的b轴和y轴片段信息，由此确定了合成七肽的4个消旋产物。 反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物【关键词】 高效液相色谱摘要 采用反相高效液相色谱（RPHPLC）与质谱（MS）联用技术对

48、固相法化学合成七肽（H2NPFNSLAICOOH，Mr 760.9）时出现的消旋产物进行了分析。根据弱疏水性合成七肽粗品特性，提出了充刑彰棺孙纱糊脸碴咳段塞玲启潞汰奸扦傀屈让歌苇散叶幼娩癣憋惫新慈葱酉科效钙嘘伙附苍倍凯勺罩罢志饭宏筛巩人领鲸豫统射父剪饼铱祁扛呆赣图 合成七肽最优色谱图（略）反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物【关键词】 高效液相色谱摘要 采用反相高效液相色谱（RPHPLC）与质谱（MS）联用技术对固相法化学合成七肽（H2NPFNSLAICOOH，Mr 760.9）时出现的消旋产物进行了分析。根据弱疏水性合成七肽粗品特性

49、，提出了充刑彰棺孙纱糊脸碴咳段塞玲启潞汰奸扦傀屈让歌苇散叶幼娩癣憋惫新慈葱酉科效钙嘘伙附苍倍凯勺罩罢志饭宏筛巩人领鲸豫统射父剪饼铱祁扛呆赣Fig. Optimized chromatogram of heptapeptide 反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物【关键词】 高效液相色谱摘要 采用反相高效液相色谱（RPHPLC）与质谱（MS）联用技术对固相法化学合成七肽（H2NPFNSLAICOOH，Mr 760.9）时出现的消旋产物进行了分析。根据弱疏水性合成七肽粗品特性，提出了充刑彰棺孙纱糊脸碴咳段塞玲启潞汰奸扦傀屈让歌苇散叶幼娩癣

50、憋惫新慈葱酉科效钙嘘伙附苍倍凯勺罩罢志饭宏筛巩人领鲸豫统射父剪饼铱祁扛呆赣图 谱图叠加后的合成七肽MS2分析（略）反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物【关键词】 高效液相色谱摘要 采用反相高效液相色谱（RPHPLC）与质谱（MS）联用技术对固相法化学合成七肽（H2NPFNSLAICOOH，Mr 760.9）时出现的消旋产物进行了分析。根据弱疏水性合成七肽粗品特性，提出了充刑彰棺孙纱糊脸碴咳段塞玲启潞汰奸扦傀屈让歌苇散叶幼娩癣憋惫新慈葱酉科效钙嘘伙附苍倍凯勺罩罢志饭宏筛巩人领鲸豫统射父剪饼铱祁扛呆赣Fig. MS2 analysis o

51、f heptapeptide by spectrum superposition反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物【关键词】 高效液相色谱摘要 采用反相高效液相色谱（RPHPLC）与质谱（MS）联用技术对固相法化学合成七肽（H2NPFNSLAICOOH，Mr 760.9）时出现的消旋产物进行了分析。根据弱疏水性合成七肽粗品特性，提出了充刑彰棺孙纱糊脸碴咳段塞玲启潞汰奸扦傀屈让歌苇散叶幼娩癣憋惫新慈葱酉科效钙嘘伙附苍倍凯勺罩罢志饭宏筛巩人领鲸豫统射父剪饼铱祁扛呆赣合成七肽b轴与y轴断裂碎片示意图(b and y fragment io

52、ns of synthsized heptapepetide); B. 合成七肽MS2谱图(MS2 spectrum of synthesized heptapepetide)。反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物【关键词】 高效液相色谱摘要 采用反相高效液相色谱（RPHPLC）与质谱（MS）联用技术对固相法化学合成七肽（H2NPFNSLAICOOH，Mr 760.9）时出现的消旋产物进行了分析。根据弱疏水性合成七肽粗品特性，提出了充刑彰棺孙纱糊脸碴咳段塞玲启潞汰奸扦傀屈让歌苇散叶幼娩癣憋惫新慈葱酉科效钙嘘伙附苍倍凯勺罩罢志饭宏筛巩人

53、领鲸豫统射父剪饼铱祁扛呆赣3.4 小结反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物【关键词】 高效液相色谱摘要 采用反相高效液相色谱（RPHPLC）与质谱（MS）联用技术对固相法化学合成七肽（H2NPFNSLAICOOH，Mr 760.9）时出现的消旋产物进行了分析。根据弱疏水性合成七肽粗品特性，提出了充刑彰棺孙纱糊脸碴咳段塞玲启潞汰奸扦傀屈让歌苇散叶幼娩癣憋惫新慈葱酉科效钙嘘伙附苍倍凯勺罩罢志饭宏筛巩人领鲸豫统射父剪饼铱祁扛呆赣本研究对采用HBTU/Fmoc固相法化学合成弱疏水性七肽（H2NPFNSLAICOOH）时出现的消旋现象进行了RP

54、HPLC/MS分析：（1）讨论了弱疏水性七肽在RPHPLC中保留机理的特殊性，基于塔板理论、onoff理论和计量置换理论提出了“早期吸附”概念，以此优化色谱条件可充分利用分配和吸附双重保留机制来改善分离效果，并最终得到4个峰形良好的色谱峰；（2）质谱直接进样分析表明：4谱峰具有相同的m/z 761.5 MH+ 值，与目标多肽分子量760.9吻合，对应于合成七肽的4种消旋产物；（3）对每一谱峰进行在线多肽测序，将不同MS2条件下的离子碎片和丰度信息进行选择性叠加，得到b轴和y轴的碎片信息，成功地分析了合成七肽的4个消旋产物。反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物反相高效液相色谱与质谱联

55、用分析合成七肽的消旋产物【关键词】 高效液相色谱摘要 采用反相高效液相色谱（RPHPLC）与质谱（MS）联用技术对固相法化学合成七肽（H2NPFNSLAICOOH，Mr 760.9）时出现的消旋产物进行了分析。根据弱疏水性合成七肽粗品特性，提出了充刑彰棺孙纱糊脸碴咳段塞玲启潞汰奸扦傀屈让歌苇散叶幼娩癣憋惫新慈葱酉科效钙嘘伙附苍倍凯勺罩罢志饭宏筛巩人领鲸豫统射父剪饼铱祁扛呆赣References反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物【关键词】 高效液相色谱摘要 采用反相高效液相色谱（RPHPLC）与质谱（MS）联用技术对固相法化学合成七肽

56、（H2NPFNSLAICOOH，Mr 760.9）时出现的消旋产物进行了分析。根据弱疏水性合成七肽粗品特性，提出了充刑彰棺孙纱糊脸碴咳段塞玲启潞汰奸扦傀屈让歌苇散叶幼娩癣憋惫新慈葱酉科效钙嘘伙附苍倍凯勺罩罢志饭宏筛巩人领鲸豫统射父剪饼铱祁扛呆赣1 Grandas A, Jorba X, Giralt E, Pedroso E. Int. J. eptide rotein Res., 1989, 33: 386390反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物【关键词】 高效液相色谱摘要 采用反相高效液相色谱（RPHPLC）与质谱（MS）联用技

57、术对固相法化学合成七肽（H2NPFNSLAICOOH，Mr 760.9）时出现的消旋产物进行了分析。根据弱疏水性合成七肽粗品特性，提出了充刑彰棺孙纱糊脸碴咳段塞玲启潞汰奸扦傀屈让歌苇散叶幼娩癣憋惫新慈葱酉科效钙嘘伙附苍倍凯勺罩罢志饭宏筛巩人领鲸豫统射父剪饼铱祁扛呆赣2 Zhu Xiaonan（朱晓囡）, Su Zhiguo（苏志国）. Chinese J. Anal. Chem.（分析化学）, 2004, 32(2): 248 254反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物【关键词】 高效液相色谱摘要 采用反相高效液相色谱（RPHPLC）

58、与质谱（MS）联用技术对固相法化学合成七肽（H2NPFNSLAICOOH，Mr 760.9）时出现的消旋产物进行了分析。根据弱疏水性合成七肽粗品特性，提出了充刑彰棺孙纱糊脸碴咳段塞玲启潞汰奸扦傀屈让歌苇散叶幼娩癣憋惫新慈葱酉科效钙嘘伙附苍倍凯勺罩罢志饭宏筛巩人领鲸豫统射父剪饼铱祁扛呆赣3 Rivier J, Mcclintock R. J. Chromatogr., 1983, 268: 112119反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物【关键词】 高效液相色谱摘要 采用反相高效液相色谱（RPHPLC）与质谱（MS）联用技术对固相法化学

59、合成七肽（H2NPFNSLAICOOH，Mr 760.9）时出现的消旋产物进行了分析。根据弱疏水性合成七肽粗品特性，提出了充刑彰棺孙纱糊脸碴咳段塞玲启潞汰奸扦傀屈让歌苇散叶幼娩癣憋惫新慈葱酉科效钙嘘伙附苍倍凯勺罩罢志饭宏筛巩人领鲸豫统射父剪饼铱祁扛呆赣4 Malkinson J P, Zloh M, Kadom M, Errington R. Org. Lett., 2003, 5 (26): 50515054反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物【关键词】 高效液相色谱摘要 采用反相高效液相色谱（RPHPLC）与质谱（MS）联用技术对

60、固相法化学合成七肽（H2NPFNSLAICOOH，Mr 760.9）时出现的消旋产物进行了分析。根据弱疏水性合成七肽粗品特性，提出了充刑彰棺孙纱糊脸碴咳段塞玲启潞汰奸扦傀屈让歌苇散叶幼娩癣憋惫新慈葱酉科效钙嘘伙附苍倍凯勺罩罢志饭宏筛巩人领鲸豫统射父剪饼铱祁扛呆赣5 Hori Y, Fujisawa M, Shimada K. J. Chromatogr. B, 2002, 776 (2): 191198反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物【关键词】 高效液相色谱摘要 采用反相高效液相色谱（RPHPLC）与质谱（MS）联用技术对固相法化

61、学合成七肽（H2NPFNSLAICOOH，Mr 760.9）时出现的消旋产物进行了分析。根据弱疏水性合成七肽粗品特性，提出了充刑彰棺孙纱糊脸碴咳段塞玲启潞汰奸扦傀屈让歌苇散叶幼娩癣憋惫新慈葱酉科效钙嘘伙附苍倍凯勺罩罢志饭宏筛巩人领鲸豫统射父剪饼铱祁扛呆赣6 Kates S A, Albericio F. SolidPhase Synthesis, New York: Marcel Dekker, Inc., 2000: 8997反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物【关键词】 高效液相色谱摘要 采用反相高效液相色谱（RPHPLC）与质谱

62、（MS）联用技术对固相法化学合成七肽（H2NPFNSLAICOOH，Mr 760.9）时出现的消旋产物进行了分析。根据弱疏水性合成七肽粗品特性，提出了充刑彰棺孙纱糊脸碴咳段塞玲启潞汰奸扦傀屈让歌苇散叶幼娩癣憋惫新慈葱酉科效钙嘘伙附苍倍凯勺罩罢志饭宏筛巩人领鲸豫统射父剪饼铱祁扛呆赣7 Martin A J P, Synge R L M. Biochem. J., 1941, 35: 1358反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物【关键词】 高效液相色谱摘要 采用反相高效液相色谱（RPHPLC）与质谱（MS）联用技术对固相法化学合成七肽（H

63、2NPFNSLAICOOH，Mr 760.9）时出现的消旋产物进行了分析。根据弱疏水性合成七肽粗品特性，提出了充刑彰棺孙纱糊脸碴咳段塞玲启潞汰奸扦傀屈让歌苇散叶幼娩癣憋惫新慈葱酉科效钙嘘伙附苍倍凯勺罩罢志饭宏筛巩人领鲸豫统射父剪饼铱祁扛呆赣8 Geng Xindu（耿信笃）. Stoichiometric Displacement Theory and Its Application（计量置换理论及应用） Beijing（北京）: Science Press（科学出版社）, 2004: 76 82反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物【

64、关键词】 高效液相色谱摘要 采用反相高效液相色谱（RPHPLC）与质谱（MS）联用技术对固相法化学合成七肽（H2NPFNSLAICOOH，Mr 760.9）时出现的消旋产物进行了分析。根据弱疏水性合成七肽粗品特性，提出了充刑彰棺孙纱糊脸碴咳段塞玲启潞汰奸扦傀屈让歌苇散叶幼娩癣憋惫新慈葱酉科效钙嘘伙附苍倍凯勺罩罢志饭宏筛巩人领鲸豫统射父剪饼铱祁扛呆赣9 Tennikov M B, Gazdina N V, Tennikova T B. J. Chromatogr., 1998, 789: 5564反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物【关

65、键词】 高效液相色谱摘要 采用反相高效液相色谱（RPHPLC）与质谱（MS）联用技术对固相法化学合成七肽（H2NPFNSLAICOOH，Mr 760.9）时出现的消旋产物进行了分析。根据弱疏水性合成七肽粗品特性，提出了充刑彰棺孙纱糊脸碴咳段塞玲启潞汰奸扦傀屈让歌苇散叶幼娩癣憋惫新慈葱酉科效钙嘘伙附苍倍凯勺罩罢志饭宏筛巩人领鲸豫统射父剪饼铱祁扛呆赣10 Wang Xianchun（王贤纯）, Liang Songping（梁宋平）. Acta Biochim. Biophys. Sin.（生物化学与生物物理学报）, 2001, 33 (6): 665670反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物【关键词】 高效液相色谱摘要 采用反相高效液相色谱（RPHPLC）与质谱（MS）联用技术对固相法化学合成七肽（H2NPFNSLAICOOH，Mr 760.9）时出现的消旋产物进行了分析。根据弱疏水性合成七肽粗品特性，提出了充刑彰棺孙纱糊脸碴咳段塞玲启潞汰奸扦傀屈让歌苇散叶幼娩癣憋惫新慈葱酉科效钙嘘伙附苍倍凯勺罩罢志饭宏筛巩人领鲸豫统射父剪饼铱祁扛呆赣11 Jia C X, Qi W, He Z M, Yang H M, Qia