血小板的保存操作规程

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1、血小板的保存近年来临床对血小板的需求量越来越多，只靠临时分离制备血小板已远不能满足需要，特别是有时浓缩血小板采集和供应不平衡，造成浓缩血小板的剩余或不足，都需要对血小板进行保存。因此浓缩血小板的保存是亟待解决的问题。血小板性质脆弱，离体几小时就会发生变形、破裂、损伤，输注后在体内寿命会缩短。20世纪60年代起，对如何保存血小板，并延长其体外保存时间进行了大量的研究，并取得了较好效果。目前血小板的保存有常温保存和冰冻保存两种方法，前者可保存浓缩血小极35天，后者则可长期保存血小板。一、血小板的常温保存血小板因为其本身固有的特性，目前标准的保存温度是222，并不断振荡保存。222时血小板不易发生形

2、态变化，而且容易保持其生理活性；而因为血小板的黏附、集聚性，振荡的目的是使大量、浓缩的血小板处于分散状态，不在体外产生集聚，以保持其输入体内的黏附、集聚功能。需要特别注意的是：因为浓缩血小板悬浮在血浆中，血浆是细菌的良好生长繁殖基质，22+2时细菌容易生长繁殖，因此在浓缩血小板的制备和保存过程中要特别注意无菌操作，防止细菌污染。（一）保存液目前认为ACD、CPD或CPDA-1、CPDA-2、CPDA-3仍然是保存浓缩血小板的较好保存液。它们对血小板的活力和功能均无损害。虽然在ACD或CPD保存液中血小板易聚集，但是解聚后血小板功能仍好。EDTA抗凝的血小板在体内很快被脾脏扣留、破坏，且对血小板

3、功能有损伤，不宜作血小板抗凝剂。（二）保存温度保存温度对血小板活性影响很大，以222为宜。若将其保存在(42) 8小时后，血小板发生不可逆转的微管周围带环消逝，导致从盘形到球形的变化，容易产生聚集和破坏，输人体内后寿命就会缩矩。若保存超过24小时，则血小板损伤明显而不能输用。造成血小板损伤的原因主要是温度较低所致。浓缩血小板在2024时，可保存37天。（三）pH血小板保存的最适pH是6.66.8，pH小于6.0或大于7.4时，血小板不能存活，发生从盘形到球形的变化。（四）贮存容器血小板性质脆弱，具有亲水性，与湿润或粗糙的玻璃接触便黏附于其表面，并伸展变形，稍久便发生损伤，失去功能。用塑料袋代替

4、玻璃瓶进行采血、血小板制备和血小板保存可以使保存效果明显提高。至今用于保存浓缩血小板的塑料袋已经过两代改进。第一代产品是由聚氯乙烯(PVC)加入增塑剂邻苯二甲酸二(2-乙基)己脂(DEHP)制成，Fenwal-146和Cutter CL-3000保存袋是该类型塑料袋的代表。此类血袋在22可保存血小板3天，3天以后pH常下降到6.0以下。第二代产品是透气性能更好的聚烯烃(polyolefin)塑料袋，如Fenwal PL-732或更薄的袋子Cutter CLXtm，可贮存浓缩血小板57天。血小板在保存过程中不断地进行新陈代谢，产生乳酸，使pH下降，不利于保存。在第一代PVC塑料袋保存比在第二代聚

5、烯烃袋中产生的乳酸要高，这是两种塑料袋的气体的通透能力不同所致。聚烯烃膜能使氧通透到袋内，使C02逸出袋外的能力要比PVC膜高2.3倍。PVC塑料袋由于通透气体能力低，血小板贮存3天以后，乳酸生成量增加，使pH下降，血小板只能保存3天。而聚烯烃塑料袋通气性能好，能保存血小板57天。在贮存过程中，血小板利用进入袋内的氧进行需氧代谢，如果通过袋壁的气体交换不能满足血小板对氧的需求，血小板代谢就从需氧代谢转换为无氧代谢。无氧代谢使糖酵解增加而产生过多的乳酸，使pH下降，此外C02的生成而不能逸出袋外也会导致pH下降。故以使用通透能力好的塑料袋贮存血小板为佳。（五）保存方法浓缩血小板的制备要在无菌密闭

6、的联袋系统中或用血细胞分离机采集制备。开放或半开放操作方法制备的浓缩血小板，因其有污染的可能，故不能保存，必须在制备后24小时内使用。血小板的保存对血浆容量有一定要求。22保存时，一单位血小板悬浮的血浆容量需5070ml，并且需要不断振荡，摇动速度以2030/min为宜。振荡方式对血小板质量也有影响，滚动式比水平式摇动产生的异常形态的血小板要多，以水平振荡为好。血小板贮存过程中，P02下降，乳酸和PCO2水平升高，使pH下降，振荡可减慢这一过程。另外须注意，如果采集的浓缩血小板袋数较多，应分别平摊，而不要叠放，以免影响其透气性，进而影响血小板质量。二、血小板的质量标准及检测（一）去白细胞单采血

7、小板的质量控制项目和要求1.外观：肉眼观察应呈黄色云雾状液体，无色泽异常、蛋白析出、气泡及重度乳糜等情况，血袋完好，并保留注满单采血小板经热合的导管至少15cm。2.容量：保存期为24h为125ml200ml，保存期为5天为250ml300ml3.储存期末PH值：6.47.44.血小板含量：2.5 X 1011/袋5.红细胞混入量：8.0 X 109/袋6白细胞残留量：5.0 X 106/袋7.无菌试验：无细菌生长（二）血小板的质量检测血小板的质量检测方法很多，大体有体内和体外两种检测方法。1体外质量检测(1) pH：pH 6.07.4，否则血小板不能存活，会发生由盘形到球形的变化。(2)血小

8、板计数和形态观察：利用血小板计数仪对血小板进行计数，采用相差显微镜或电子显微镜进行血小板形态观察，从而判断血小板的数量和形态变化，估计血小板输入体内的回收率和存活率(3)利用二磷酸腺苷(ADP)诱导变形和光散射，判断血小板的形态。(4)利用血小板的收缩能力估计血小板的质量。(5)酵解法：应用血小板糖代谢的原理，通过测某些酶的活性、氧消耗、葡萄糖的利用、乳酸的生成以及ATP浓度等来判断血小板的质量。2体内质量检测 用51Cr标记新鲜的或贮存的血小板，输入人体1小时后，测血小板在体内存在数量和存在时间，这是判断血小板回收和存活时间的常用方法。但这种方法主要用于研究，不能常规应用。输注前、后多次血小板计数是测定血小板存活最简单的方法，可根据下面公式计算血小板回收率： 输后1小时血小板记数-原血小板记数基数血小板回收率(%)-血容量100%浓缩血小板的数量输注容积