《无菌检测规程》由会员分享，可在线阅读，更多相关《无菌检测规程（3页珍藏版）》请在装配图网上搜索。
1、无菌检测规程1目的：建立无菌检查的标准操作规程，确保检验结果的准确性。2适用范围本规程适用于本公司质检科对本厂生产的的无菌检测。3引用相关文件制定本规范参考了下列文件中的一些信息，但没有直接引用里面的条文。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日 期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB/T 14233.2-2005 医用输液、输血、注射器具检验方法 第2部分：生物学试验方法中华人民共和国药典2010年版二部附录XI H无菌检查法4设备、用具与试剂4.1设备要求无菌操作
2、室、超净工作台、培养箱、高压消毒锅、高温烘箱。4. 1 . 1无菌室应每周用0. 1 新洁尔灭或2甲酚液擦拭操作台及可能污染的死角，每次操 作前开动无菌空气过滤器及紫外光灯杀菌1小时。在每次操作完毕，用2甲酚或0.1新 洁尔灭溶液擦拭工作台面，用紫外光灯杀菌0.5小时。每次使用无菌室都应详细填写无菌室 使用记录。4.1.2无菌室、超净台在消毒处理完毕后，应检查空气中的菌落数，方法如下：取直径90mm 培养皿，无菌操作注入融化的营养琼脂培养基20ml,在3035C培养48h证明无菌后，取3 只培养皿在无菌室超净工作台内平均位置打开培养皿上盖，暴露30min后盖好，置30-35C 培养48小时后取
3、出检察， 3只培养皿上生长的菌落数平均不得超过1个。4.1.3无菌试验过程中检查空气中的菌落数，方法同上。在试验开始进行时，打开平皿盖在 空气中暴露，至试验结束，盖好。照上法培养，应符合上述要求。4.1.4 进入一更室必须换拖鞋，物品进入一更室前必需用 75的医用酒精对物品外表面进行 处理。进入无菌操作室前必须在二更室更换洁净服、无菌鞋，带好口罩，进行手消毒。4.2 用具：试管、锥形瓶、洁净服、口罩、无菌鞋、脱脂棉、剪刀、镊子、接种环、酒精灯等。4.2.1所需灭菌的用具必需包扎好或装入灭菌盒或灭菌桶，在1210.5C蒸汽灭菌锅中灭菌 30 分钟。洁净服每周进行一次湿热灭菌处理如有特殊情况则在每
4、次使用后进行一次湿热灭菌 处理。无菌鞋使用 0.1新洁尔灭清洗或擦拭后用紫外灯照射至少 30min。4.2.2 所有用具进入无菌室前必需用75的乙醇喷洒或擦拭进行表面消毒处理，避免对无菌 环境造成污染。4.3 试剂：营养琼脂培养基、硫乙醇酸盐流体培养基、改良马丁培养基、9g/L氯化钠溶液、0.1%新 洁尔灭、 75%乙醇。5 供试品无菌检查5.1 供试品制备取4套xxxxx在无菌条件下分别注入3.5ml0.9%无菌氯化钠溶液，振摇数次，将所得溶液混合均匀制得共试品。5.2 对照用菌液的制备5.2.1接种金黄色葡萄球菌的新鲜培养物1白金耳至营养琼脂培养基中，3035C培养18 24小时，所得培养
5、物用0.9%无菌氯化钠溶液稀释至10-6107，制成每1ml含菌数小于 100cfu 的菌悬液。5.2.2接种白色念珠菌的新鲜培养物1白金耳至改良马丁培养基中，2328C培养2448 小时,所得培养物用0.9%无菌氯化钠溶液稀释至10-610-7,制成每1ml含菌数小于100cfu 的菌悬液。5.2.3 上述制备的菌液，一般当日使用。5.5 直接接种法以无菌操作取6管需气菌、厌气菌培养基，其中4管接种供试品各1ml，1管接种金黄 色葡萄球菌液1ml,作阳性对照，1管加lml0.9%无菌氯化钠溶液，作为空白对照。取4 管真菌培养基，其中2管接种供试品各1ml，1管接种白色念珠菌液1ml，作为阳性
6、对照，1 管加1ml0.9%无菌氯化钠溶液，作为空白对照。轻轻摇动，使供试品与培养基混合。需气菌、 厌气菌培养基管置30-35C、真菌培养基管置20-25C，培养14日。在培养期间应逐日观察 并记录是否有菌生长。阳性对照管培养4872小时应生长良好。如在加入供试品后，培养 基出现浑浊，培养7天后，不能从外观上判断有无微生物生长，可取该培养液适量转种至同 种新鲜培养基中或斜面培养基上继续培养，细菌培养2日，真菌培养3日，观察是否再出现 浑浊或斜面有无菌生长，或用接种环取培养液涂片，染色，用显微镜观察是否有菌。5.6 结果判定若供试品管均澄清，或虽显浑浊但经确认无菌生长，判定供试品符合规定；若供试
7、品管 中任何一管显浑浊并确认有菌生长，判供试品不符合规定，除非能充分证明实验结果无效， 即生长的微生物非供试品所含。当符合下列至少一个条件式，方可判断试验结果无效：（1）无菌检查试验所用的设备及环境的微生物监控结果不符合无菌检查法的要求；（2）回顾无菌试验过程，发现有可能引起微生物污染的因素；（3）阴性对照管有菌生长；（4）供试品管中生长的微生物经鉴定后，确证是因无菌试验中所使用的物品或无菌操 作技术不当引起的。试验若经确证无效，应重试。重试时，重新取同量供试品，依法重试，若无菌生长，判 定符合规定；若有菌生长，判定供试品不符合规定。6. 相关文件：无7. 相关表单：无8. 附件/流程图： 无
无菌检测规程
