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1、第五节 有害微生物的控制,一、几个基本概念,灭菌（sterilization） 采用强烈的礼花因素是任何物体内外部的一切微生物永远丧失其生长繁殖能力的措施，称为灭菌。 消毒（disinfection） 采用较温和的理化因素，仅杀死物体表面或内部的一部分对人体有害的病原菌，而对被处理物体基本无害的措施，称为消毒。 防腐（antisepsis） 利用理化因素完全抑制霉腐微生物的生长繁殖，从而达到防止物品发生霉腐的措施，称为防腐。 化疗（chemotherapy） 即化学治疗。利用具有高度选择毒力的化学物质抑制宿主体内病原微生物的生长繁殖，以达到治疗该传染病的一种措施。,二、物理灭菌的代表高温,1、
2、高温灭菌（消毒）法是最常用的物理方法。高温可引起蛋白质、核酸等活性大分子氧化或变性失活而导致微生物死亡。, 干热灭菌法（dry heat sterilization） 干燥热空气灭菌法(hot-air oven)：将物品放入烘箱内，然后升温至150170 ，维持12小时。适用于玻璃、陶瓷和金属物品的灭菌，不适合液体样品，及棉花、纸张、纤维和橡胶类物质的灭菌。由于空气传热穿透力差，菌体在脱水状态下不易杀死，所以温度高、时间长。,灼烧法（incineration）：将被灭菌物品在火焰中灼烧，使所有的生物质碳化。适用于不怕烧的实验器具，如接种环、镊子、试管或三角瓶口的灭菌等。, 湿热法(moist
3、heat sterilization) ： 特点：温度低、时间短、灭菌效果高 原因： 1) 菌体内含水量越高，则凝固温度越低； 2) 蒸汽冷凝会放出潜热； 3) 饱和水蒸汽穿透力强； 4) 易破坏细胞内蛋白质大分子的稳定性，如氢键结构。,高压蒸汽灭菌法 利用水的沸点随水蒸气压力的增加而上升，以达到100 以上高温灭菌的方法。 方法：121（1kg/cm2或15磅/英寸2）维持1520min。 112（0.5kg/cm2或8磅/英寸2）2030min。 115（0.75kg/cm2或11磅/英寸2）2030min。 应根据灭菌物品的性质或成分选择灭菌温度 例如：生理盐水、营养琼脂等培养基用121
4、 。 含葡萄糖、乳糖、氨基酸等培养基用112 。 适用：耐高温物品，玻璃仪器、含水或不含水的物品。,高 压 蒸 汽 灭 菌 锅,注意事项： 排净冷空气； 灭菌终了，缓慢降压； 灭菌结束，趁热取出物品。,煮沸消毒法 将水加热至100，煮沸15min30min，可杀死所有营养细胞和部分芽孢，达到消毒物的目的。 巴斯德消毒法（Pasteurization）： 用较低的温度来杀死其中的病源微生物，这样既保持食品的营养风味，又进行了消毒。该法一般是将待消毒的液体食品置于62处理30min，然后迅速冷却。即可达到消毒目的。 低温长时法：62.930min处理牛奶； 高温瞬时法：71.615s处理牛奶； 超
5、高温巴斯德灭菌法：让液体食品停留在140左右3-4s，急剧冷却至75，经匀质化后冷却至20。,间歇灭菌法： 将待灭菌物品在80-100蒸煮1560min，冷却后搁置室温（2837）下过夜，并重复以上过程三遍以上。 其蒸煮过程可杀死微生物的营养体，但不能杀死芽胞，室温过夜促使残留的芽孢萌发成营养体，再经蒸煮过程可杀死新的营养体；循环三次以上可保证彻底灭菌的目的。 适用于不耐高温的物品灭菌，如不适于高压灭菌的特殊培养基、药品的灭菌。 缺点是麻烦、费时。,高温对培养基的影响及其防止措施,高温对培养基的不利影响： 产生混浊或形成不溶性沉淀 破坏营养（ PO4-3存在，葡萄糖生成酮糖，菌不利用）； 色泽
6、加深（褐变如产生氨基糖等）； 改变培养基的pH值（通常下降0.2） ； 形成有害物质，抑制微生物生长； 消除有害影响的措施 采用特殊的加热灭菌法 过滤除菌法 其他方法,三、消毒剂、防腐剂和治疗剂,（一）消毒剂和防腐剂,消毒剂:可以抑制或杀灭微生物，但对人体也可能产生有害作用的化学试剂.主要用于抑制或杀灭物体表面、器械、排泄物和环境中的微生物。 防腐剂:可以抑制或阻止微生物生长，但对人体或动物体的毒性较低的化学药剂.用于机体表面，如皮肤、粘膜、伤口等处防止感染，也有的用于食品、饮料药品的防腐作用。 但现时消毒剂和防腐剂间的界限已并不很严格.,消毒防腐剂的作用机理一般有下列三种方式: 使微生物蛋白
7、质凝固变性,发生沉淀.如酒精等. 破坏菌体的酶系统,影响菌体代谢.如过氧化氢等. 降低微生物表面张力,增加细胞膜的通透性,使细胞发生破裂或溶解.如来苏儿等酚类物质.,常用的消毒防腐剂及其应用,效应评价指标： 最低抑制浓度（Minimum Inhibitory Concentration, MIC） 半致死剂量（50 lethal dose, LD50） 最低致死剂量（Minimum lethal dose, MLD） 石碳酸系数 （phenol coefficient）,（二）化学治疗剂,概念：化学治疗剂是指那些能够特异性地作用于某些微生物并具有选择毒性的化学药剂，它们与非特异的化学药剂相比对
8、人体几乎没有什么毒性或毒性很小，可用作治疗微生物引起的疾病。 既可涂抹肌体表面，也可以通过口服或注射吸收到体内。,种类： .抗代谢药物人工合成 .抗生素微生物产生,1、抗代谢类药物（生长因子类似物）:,概念：有些化合物在结构上与生物体所必需的代谢物很相似，以致于可以和特定的酶结合，从而阻碍酶的功能，干扰代谢的正常进行，这些物质叫抗代谢物，用于疾病治疗，称抗代谢类药物，如：磺胺类药物。,机理：作为细菌细胞基本生长因子的竞争性抑制剂（与相应酶竞争性结合）而阻止微生物对生长因子的利用，因而可以抑制微生物的生长。只有当正常代谢产物的量少或不存在时，抗代谢物才有用。,种类： 磺胺药对氨基苯甲酸 ； 6
9、- 巯基嘌呤嘌呤； 5 - 甲基色氨酸氨基酸； 异烟肼吡哆醇。,磺胺药作用机理：,细菌需要利用对氨基苯甲酸(PABA)合成生长所需的叶酸(THFA)：,二氢蝶啶 + 对氨基苯甲酸 二氢蝶酸 二氢叶酸 四氢叶酸 磺胺药 核酸合成 辅酶F,二氢蝶酸合成酶,二氢叶酸 还原酶,二氢叶酸合成酶,2、抗生素：,概念： 抗生素：微生物在其生命过程中所产生的一类低分子量代谢产物，在很低浓度下就能抑制或杀死其它微生物的生长。 抗菌谱：抗生素的作用对象有一定范围，这种作用范围称该抗生素的抗菌谱。广谱：对多种微生物有作用（如：土霉素、四环素）；窄谱：仅对某一类微生物有作用（如：多粘菌素）,作用机制：,抑制细胞壁的合成；（如：青霉素） 破坏细胞膜功能；（如：多粘菌素可作用于膜磷脂使膜溶解） 抑制蛋白质合成；（如：氯霉素，四环素、链霉素等） 干扰核酸代谢；（如：利福霉素、新生霉素、丝裂霉素、灰黄霉素）,The end,
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