侧柏叶中黄酮的提取及应用

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1、摘要31绪论42实验原理43仪器、药品53.1实验仪器53.2实验药品54实验过程54.1侧柏叶总黄铜的提取54.1.1 采样54.1.2超声波法54.1.3索氏提取法54.2侧柏叶总黄酮含量的测定54.2.1标准曲线的绘制54.2.2含量的测定64.3侧柏叶中总黄酮的定性分析64.3.1紫外可见分光光度的测定64.3.2显色反应64.4黄铜类化合物在精细化工工业中的应用64.4.1牙膏的制备及检验64.4.2水基涂料的制备及检验75结果与讨论76结论10参考文献10侧柏系柏科侧柏属常绿乔木，又名扁松、扁柏、扁桧、黄柏。原产华北、东北， 目前全国各地均有栽种。本实验主要研究了侧柏叶黄酮的提取、

2、分离、纯化以及它在 精细化学品中的应用。侧柏叶中所含化学成分相当复杂，包括黄酮类化合物、鞣质和 挥发油等，可应用于医药、农药、化妆品等领域。本文采用超声波法从侧柏叶中提取 黄酮类化合物，并研究黄酮的稳定性及对羟基自由基的提取、分离、纯化。以及洗发 香波和防晒霜的配制及性能测定。关键词：侧柏叶；黄酮类化合物；精细化学品；应用1绪论侧柏(Platycladus orientalis)系柏科侧柏属常绿乔木，别名扁柏、香柏、片柏、片 松。喜生于湿润肥沃的山坡，分布于全国大部分地区。现代医学研究证明，侧柏叶对 肺炎双球菌、金黄色葡萄球菌、宋内氏痢疾杆菌有明显的抑制作用，能缩短出血和凝 血时间，对肺炎、痢

3、疾、咼血压等多种疾病有一定的疗效。侧柏叶的疗效作用主要是 通过存在其中的黄酮类物质起作用的。侧柏叶中黄酮类物质含量很高。侧柏叶中总黄酮成分的药理作用主要在于激活毛母细胞和促进血液循环，使毛发 生长能力衰退的毛囊复活和促进血液循环后补充营养成分而发挥出养发、生发的作 用。去屑止痒的机理在于抑制头发表皮细胞蜕化的速度，延迟脱落，减少脂溢性皮肤 病的产生。一般去屑止痒剂用硒类等重金属盐虽能达到目的，却引起脱发现象增多， 用中草药物质既能抗菌消炎、止痒去头屑防脱发，又不会产生副作用。侧柏叶总黄酮 功能性洗发香波具有很好的去屑防脱功效，综合性能较好。侧柏叶总黄酮提取液与香 波中其他组分有很好的相容性，对

4、香波的稳定性、泡沫高度、光泽和气味等影响不大； pH值和黏度稍有上升；洗发香波的颜色变化明显；且该中草药功能性香波无副作用 。黄酮类化合物对超氧自由基和羟基自由基有和好的清除能力，其作用类似SOD。 由此可见侧柏叶总黄酮作为美容护肤化妆品的添加剂，具有药性稳定，药力持久，对 皮肤作用温和、刺激性小、安全性高、疗效显著等特点。将其制成水包油型的乳化产 品，安全性好，使肌肤自然、美白亮泽。且成本低廉，原料易得，又不会产生副作用， 顺应了国际化妆品天然化、营养化、疗效化的发展趋势，具有广阔的市场前景。2实验原理黄酮的提取是根据相似相溶原理进行的，过程实质是黄酮从植物内部向溶剂中转 移的传质过程：溶剂

5、从溶剂主体传递到固体颗粒的表面；溶剂扩散渗入固体内部和内 部微孔隙内；黄酮溶解进入溶剂；通过固体微孔隙通道中的溶液扩散至表面；黄酮从 固体表面传递到溶剂主体。在这一系列步骤中，影响类黄酮提取的控制因素是黄酮在 所选用溶剂中的溶解度大小以及向溶剂扩散的难易程度。目前，最常用的是乙醇浸 提法。本实验采取选择乙醇为有机溶剂。用超声波法提取黄酮类物质，是目前比较新的方法。其原理是超声波可在液体中 产生“空穴作用”，而“空穴作用”产生的冲击波和射流可以破坏植物细胞和细胞膜结 构，从而增加细胞内容物通过细胞膜的穿透能力，有助于黄酮类化合物的释放与溶 出，超声波使提取液不断震荡，有助于溶质扩散，同时超声波的

6、热效应使水温保持一 定温度，对原料有水浴作用。因此，超声波法大大缩短了提取时间.提高了有效成分 的提出率和原料的利用率。索氏提取法就是利用溶剂回流及虹吸原理，使固体物质 连续不断地被纯溶剂萃取，既节约溶剂，萃取效率又高。3仪器、药品3.1材料与试剂芦丁、侧柏叶、50%乙醇溶液、脂肪醇聚氧乙烯醚硫酸钠(AES)、脂肪酸二乙醇 酰胺(6501、尼纳尔)、十二烷基硫酸钠、珠光剂、羊毛脂、乙二胺四乙酸二钠EDTA、 苯甲酸钠、柠檬酸、饱和氯化钠、矿物油、十六醇、甘油、苛性钠、苛性钾等。3.2仪器752N紫外分光光度计、722S可见分光光度计、分析天平、恒温水浴锅、烧杯 (250mL)、玻璃棒、胶头滴管

7、等。4实验过程4.1侧柏叶总黄酮的提取4.1.1采样侧柏叶洗净自然阴干后于60C恒温烘干4h,粉碎后过筛(40 目),备用。4.1.2超声波法称取5g左右的样品，按照1 ： 10的料液比加入50 %乙醇水溶液浸泡2h,然后 在70C下超声波40 Hz时超声处理40 min。趁热过滤，过滤后将滤渣再按上述方法 超声处理一次，过滤，合并滤液定容250m 1,然后稀释10倍，加入显色剂，测定含 量；并应用紫外对其进行定性分析以及显色反应41。4.1.3索氏提取法以乙醇作提取剂，称取5.0g左右的样品，加乙醇约100mL，浸提次数58次， 然后于250ml容量瓶定容，稀释10倍，测定含量；并应用紫外对

8、其进行定性分析以 及显色反应。4.2侧柏叶总黄酮含量的测定4.2.1标准曲线的绘制精密吸取芦丁对照品液(0.5mg / ml )1、2、3、4、5ml分别用50%乙醇稀释至10ml, 准确加入1 %三氯化铝溶液1ml，于50ml容量瓶定容，摇匀，同法制成空白对照， 在415nm处测定吸度.以吸收度值为纵坐标，以浓度值为横坐标绘制标曲线。4.2.2含量的测定A最大吸收波长的确定：测定5号芦丁标准试液在380nm到480nm之间的吸光 度来确定最大吸收波长。B标准曲线的绘制：精密吸取芦丁对照品液(0.5mg / ml )1、2、3、4、5ml分别 用50%乙醇稀释至10ml,准确加入1 %三氯化铝

9、溶液1ml，于50ml容量瓶定容，摇匀， 同法制成空白对照，在415nm处测定吸度。以吸收度值为纵坐标，以浓度值为横坐标 绘制标曲线。公式中:V 处理前溶液的体积(mL) C 一芦丁溶液的浓度(mg/mL) W 侧柏叶质量(mg)4.3侧柏叶总黄酮的定性分析4.3.1紫外可见光谱侧柏叶提取物在270nm、356nm处各有一吸收峰。初步推测侧柏叶中黄酮类化合物主 要为黄酮、黄酮醇类(220280，300400)。250285nm和352385nm 间有两个 主要的吸收峰，3-OH黄酮。加入AlCl3显色剂后，桂皮酰峰带发生红移至415nm， 红移了 59nm，说明A、B环上均有两个酚軽基。4.3

10、.2显色反应三氯化铝反应：取样品溶液点在滤纸上滴加1%三氯化铝乙醇溶液，吹干，分别 在可见光及紫外光下观察颜色变化。盐酸-镁粉反应是鉴定黄酮类化合物最常用的颜色反应，吸取定容好的提取液1 ml于试管中，加入少许镁粉振摇，滴加几滴浓盐酸，12 min即可显色，区别黄酮 类化合物的有无。氢氧化钠反应：取定容好乙醇提取液1mL于试管中，滴加数滴氢氧化钠溶液， 一定时间后观察颜色现象，确定黄酮类化合物存在与否。4.4黄酮类化合物在精细化学产品中的应用4.4.1侧柏黄酮洗发香波的配制配方配方作用用量脂肪醇聚氧乙烯醚硫酸乳化、去污10g钠(AES)脂肪酸二乙醇酰胺（6501、泡沫稳定剂，稳泡、增效、4g尼

11、纳尔）除油垢十二烷基硫酸钠（K12）发泡、润湿、去污3g甘油保湿剂2g羊毛脂营养1g乙二胺四乙酸二钠EDTA螯合剂适量苯甲酸钠防腐剂适量侧柏提取液柠檬酸调节pH饱和氯化钠调黏度香精调香将去离子水称量后加入250ml烧杯中，将烧杯放入水浴锅中加热至60C ；加入 AES控温在6065C，并不断搅拌至全部溶解；控温6065C，在连续搅拌下加入其 他表面活性剂至全部溶解，再加入羊毛酯、珠光剂或其他助剂，缓慢搅拌使其溶解（开 始降温至50 C,加入侧柏叶提取液并充分搅拌）；降温至40C以下加入香精、防腐剂、 染料、螯合剂等，搅拌均匀；测pH值，用柠檬酸调节pH值为5.57.0；接近室温时 加入食盐调节

12、到所需粘度，并用粘度计测定香波的粘度。4.4.2侧柏黄酮雪花膏的配制配方配方作用质量分数/%硬脂酸乳化剂，使其变成洁白的膏体(15)单硬脂酸甘油酯使膏体细腻滑润(1.0)矿物油固化作用1.0十六醇保湿剂，保湿作用1.0甘油保护柔软皮肤、防止水分挥发10.0苛性钠、苛性钾调粘度、调硬度0.05苯甲酸钠防腐剂适量蒸馏水加至100ml按配方中的量分别称量硬脂酸、单硬脂酸甘油酯、白油、十六醇、和丙二醇于 250mL烧杯中，水和碱称量后加入另一 250mL烧杯中。分别加热至90C，使物料熔 化、溶解均匀。装水的烧杯在90C下保持20min灭菌。然后在搅拌下将水慢慢加入 到油相中，当温度降至50C时，加人

13、防腐剂。温度降至40C加入香精，搅拌均匀。 静置、冷却至室温。调整膏体的pH,使其在要求的范围内。5结果与讨论5.1标准曲线的绘制V芦丁1ml2ml3 ml4mlC (mg/ml)0.010.020.030.04A0.1970.3850.5630.733线性回归方程：A=19.88C-2.38X10-45.2侧柏中总黄酮含量在425nm下测定含有AlCl的提取液的吸光度A=0.474,代入上述线性回归方程,3再由公式，含量%=CX稀释倍数XVFWX100%，计算黄酮含量为1.19%。5.3侧柏中总黄酮的定性分析5.3.1侧柏黄酮的紫外一可见图图二：加入AlCl3显色剂5.3.2侧柏黄酮的显色反

14、应三氯化铝反应：取样品溶液点在滤纸上滴加1%三氯化铝乙醇溶液，吹干，在可 见光下呈灰黄色，在紫外光下呈黄色荧光斑点。盐酸一镁粉反应：取定容好乙醇提取液1mL于试管中加少许镁粉振摇，再加入 浓盐酸数滴（1次加入），12 min即可在在泡沫处呈紫红色。氢氧化钠反应：取定容好乙醇提取液1mL于试管中，滴加数滴氢氧化钠溶液， 溶液呈棕黄色，证明黄酮类化合物的存在。5.4精细化工产品的性能5.4.1侧柏黄酮洗发香波的性质注意事项：（1）加入少量NaOH有助于增大膏体粘度，也可以不加。（2） 90C至50C不能骤冷，生产中在乳化罐中降温20min，降温至55C以下，继续搅拌使油相分散 更细，加速皂与硬脂酸

15、结合形成结晶，出现珠光现象。（3）降温过程中，粘度逐渐增 大，搅拌带人膏体的气泡不易逸出，因此，粘度较大时，不易过分搅拌。实验结果：本实验制得的雪花膏膏体均匀，香气清淡，色泽偏乳黄色，擦拭过程 中有少量较小颗粒出现7。5.4.2侧柏黄酮雪花膏的性质膏体耐热、耐寒稳定性，微碱性pH8.5微酸性pH为4.07.0；感官要求包括: 色泽、香气和膏体结构（细腻，擦在皮肤上应润滑、无面条状、无刺激）。注意事项：（1）用柠檬酸调节pH值时，柠檬酸需配成质量分数50%的溶液。（2） 用食盐增稠时，食盐需配成质量分数20%的溶液。加入食盐的质量分数不得超过3%。（3）加硬脂酸乙二醇酯时，温度控制在6065C，

16、且慢速搅拌，缓慢冷却。否则体系 则无珠光。实验结果：本实验制得的洗发香波呈浅绿色，香气清淡，泡沫适中，擦拭实验中 去污力较强。6结论由实验可知，侧柏叶中含有很丰富的黄酮。侧柏叶总黄酮功能性洗发香波具有很 好的去屑防脱功效，制备的防晒霜对于紫外线有很好的吸收作用，综合性能较好。侧 柏叶总黄酮提取液与香波、防晒霜中其他组分有很好的相容性，由于在香波和防晒霜 中添加了有效的天然植物提取物，故性能温和，对皮肤无刺激，能在安全无害的前提 下发挥护发、防晒、抗氧化、抗炎等综合防护作用，符合化妆品“崇尚自然”的发展 趋势。参考文献1 赵莹，张建平,赵永光，等侧柏叶总黄酮的提取工艺研究J安徽农业科学,2008

17、,36(21): 9103-9104.2 王康，张效林,薛伟明，等.侧柏叶有效成分提取过程研究J.化学工程,1998(3):21-24,2. 赵永光，常立新,周永国，等超声波法提取侧柏叶片中黄酮类化合物的研究J.河北农业大学学报,2005(2):3-5.4程立方，田樱.侧柏叶中有效成分的含量变化研究J.时珍国医国药,1995,6(4):14 -15. 施昌松，郭大仕,张洪广，等.防脱发生发香波的配方研究J.日用化学品科学,2005,28(12): 32-36.6赵永光，赵莹，张建平，等侧柏叶总黄酮在功能性洗发香波中的应用研究J.安徽农业科学， 2008,36(24):10295-10296.杜小豪，徐卫防晒化妆品防晒效果评价方法-紫外吸光度法的研究J.日用化学工业,1998.(6):43-46