生化复习资料

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1、蛋白质（一）名词解释1 1 两性离子（dipolarion） 2 2 必需氨基酸（essential amino acid）3 3 等电点(isoelectric point,pI) 4 4 稀有氨基酸(rare amino acid)5 5 非蛋白质氨基酸(nonprotein amino acid) 6 6 构型(configuration)7 7 蛋白质的一级结构(protein primary structure) 8 8 构象(conformation)9 9 蛋白质的二级结构(protein secondary structure) 10结构域(domain)11蛋白质的三级结构(

2、protein tertiary structure) 12氢键(hydrogen bond) 13蛋白质的四级结构(protein quaternary structure) 14离子键(ionic bond)15超二级结构(super-secondary structure) 16疏水键(hydrophobic bond) 17范德华力( van der Waals force) 18盐析(salting out)19盐溶(salting in) 20蛋白质的变性(denaturation)21蛋白质的复性(renaturation) 22蛋白质的沉淀作用(precipitation)23

3、凝胶电泳（gel electrophoresis） 24层析（chromatography）(二) 填空题1蛋白质多肽链中的肽键是通过一个氨基酸的_基和另一氨基酸的_基连接而形成的。2大多数蛋白质中氮的含量较恒定，平均为_%，如测得1克样品含氮量为10mg,则蛋白质含量为_%。3在20种氨基酸中，酸性氨基酸有_和_2种，具有羟基的氨基酸是_和_，能形成二硫键的氨基酸是_.4蛋白质中的_、_和_3种氨基酸具有紫外吸收特性，因而使蛋白质在280nm处有最大吸收值。5精氨酸的pI值为10.76,将其溶于pH7的缓冲液中，并置于电场中，则精氨酸应向电场的_方向移动。6组成蛋白质的20种氨基酸中，含有咪

4、唑环的氨基酸是_，含硫的氨基酸有_和_。7蛋白质的二级结构最基本的有两种类型，它们是_和_。8-螺旋结构是由同一肽链的_和 _间的_键维持的，螺距为_,每圈螺旋含_个氨基酸残基，每个氨基酸残基沿轴上升高度为_。天然蛋白质分子中的-螺旋大都属于_手螺旋。9在蛋白质的-螺旋结构中，在环状氨基酸_存在处局部螺旋结构中断。10球状蛋白质中有_侧链的氨基酸残基常位于分子表面而与水结合，而有_侧链的氨基酸位于分子的内部。11氨基酸与茚三酮发生氧化脱羧脱氨反应生成_色化合物，而_与茚三酮反应生成黄色化合物。12维持蛋白质的一级结构的化学键有_和_；维持二级结构靠_键；维持三级结构和四级结构靠_键，其中包括_

5、、_、_和_.13稳定蛋白质胶体的因素是_和_。14GSH的中文名称是_，它的活性基团是_，它的生化功能是_。15加入低浓度的中性盐可使蛋白质溶解度_，这种现象称为_，而加入高浓度的中性盐，当达到一定的盐饱和度时，可使蛋白质的溶解度_并_,这种现象称为_,蛋白质的这种性质常用于_。16用电泳方法分离蛋白质的原理，是在一定的pH条件下，不同蛋白质的_、_和_不同，因而在电场中移动的_和_不同，从而使蛋白质得到分离。17氨基酸处于等电状态时，主要是以_形式存在，此时它的溶解度最小。18鉴定蛋白质多肽链氨基末端常用的方法有_和_。19测定蛋白质分子量的方法有_、_和_。20今有甲、乙、丙三种蛋白质，

6、它们的等电点分别为8.0、4.5和10.0,当在pH8.0缓冲液中，它们在电场中电泳的情况为：甲_，乙_，丙_。21当氨基酸溶液的pH=pI时，氨基酸以_离子形式存在，当pHpI时，氨基酸以_离子形式存在。22谷氨酸的pK1(-COOH)2.19, pK2 (-NH+3 ) = 9.67, pKR(R基)= 4.25,谷氨酸的等电点为_。23天然蛋白质中的螺旋结构，其主链上所有的羰基氧与亚氨基氢都参与了链内_键的形成，因此构象相当稳定。24将分子量分别为a（90 000）、b（45 000）、c（110 000）的三种蛋白质混合溶液进行凝胶过滤层析，它们被洗脱下来的先后顺序是_。25肌红蛋白的

7、含铁量为0.34%，其最小分子量是_.血红蛋白的含铁量也是0.34%，但每分子含有4个铁原子，血红蛋白的分子量是_.26一个-螺旋片段含有180个氨基酸残基，该片段中有_圈螺旋？该-螺旋片段的轴长为_.(三) 选择题1在生理pH条件下，下列哪种氨基酸带正电荷？A丙氨酸 B酪氨酸 C赖氨酸 D蛋氨酸 E异亮氨酸2下列氨基酸中哪一种是非必需氨基酸？A亮氨酸 B酪氨酸 C赖氨酸D蛋氨酸 E苏氨酸3蛋白质的组成成分中，在280nm处有最大吸收值的最主要成分是：A酪氨酸的酚环 B半胱氨酸的硫原子C肽键 D苯丙氨酸4下列4种氨基酸中哪个有碱性侧链？A脯氨酸 B苯丙氨酸 C异亮氨酸 D赖氨酸5下列哪种氨基酸

8、属于亚氨基酸？A丝氨酸 B脯氨酸 C亮氨酸 D组氨酸6下列哪一项不是蛋白质-螺旋结构的特点？A天然蛋白质多为右手螺旋B肽链平面充分伸展C每隔3.6个氨基酸螺旋上升一圈。D每个氨基酸残基上升高度为0.15nm.7下列哪一项不是蛋白质的性质之一？A处于等电状态时溶解度最小 B加入少量中性盐溶解度增加C变性蛋白质的溶解度增加 D有紫外吸收特性8下列氨基酸中哪一种不具有旋光性？ALeu BAla CGly DSer EVal9在下列检测蛋白质的方法中，哪一种取决于完整的肽链？A凯氏定氮法 B双缩尿反应 C紫外吸收法 D茚三酮法10下列哪种酶作用于由碱性氨基酸的羧基形成的肽键？A糜蛋白酶 B羧肽酶 C氨

9、肽酶 D胰蛋白酶11下列有关蛋白质的叙述哪项是正确的？A蛋白质分子的净电荷为零时的pH值是它的等电点B大多数蛋白质在含有中性盐的溶液中会沉淀析出C由于蛋白质在等电点时溶解度最大，所以沉淀蛋白质时应远离等电点D以上各项均不正确12下列关于蛋白质结构的叙述，哪一项是错误的？A氨基酸的疏水侧链很少埋在分子的中心部位B电荷的氨基酸侧链常在分子的外侧，面向水相C白质的一级结构在决定高级结构方面是重要因素之一D白质的空间结构主要靠次级键维持13列哪些因素妨碍蛋白质形成-螺旋结构？A脯氨酸的存在 B氨基酸残基的大的支链C性氨基酸的相邻存在 D性氨基酸的相邻存在E以上各项都是14于-折叠片的叙述，下列哪项是错

10、误的？A-折叠片的肽链处于曲折的伸展状态B的结构是借助于链内氢键稳定的C有的-折叠片结构都是通过几段肽链平行排列而形成的D基酸之间的轴距为0.35nm15持蛋白质二级结构稳定的主要作用力是：A盐键 B疏水键 C氢键 D二硫键16维持蛋白质三级结构稳定的因素是：A肽键 B二硫键 C离子键 D氢键 E次级键17凝胶过滤法分离蛋白质时，从层析柱上先被洗脱下来的是：A分子量大的 B分子量小的C电荷多的 D带电荷少的18. 下列哪项与蛋白质的变性无关？A. 肽键断裂 B氢键被破坏C离子键被破坏 D疏水键被破坏19蛋白质空间构象的特征主要取决于下列哪一项？A多肽链中氨基酸的排列顺序 B次级键C链内及链间的

11、二硫键 D温度及pH20下列哪个性质是氨基酸和蛋白质所共有的？A胶体性质 B两性性质C沉淀反应 D变性性质E双缩脲反应21氨基酸在等电点时具有的特点是：A不带正电荷 B不带负电荷CA和B D溶解度最大E在电场中不泳动22蛋白质的一级结构是指：A蛋白质氨基酸的种类和数目 B蛋白质中氨基酸的排列顺序C蛋白质分子中多肽链的折叠和盘绕 D包括A,B和C(四) 是非判断题( ) 1氨基酸与茚三酮反应都产生蓝紫色化合物。( ) 2因为羧基碳和亚氨基氮之间的部分双键性质，所以肽键不能自由旋转。( ) 3所有的蛋白质都有酶活性。( ) 4-碳和羧基碳之间的键不能自由旋转。( ) 5多数氨基酸有D-和L-两种不

12、同构型，而构型的改变涉及共价键的破裂。( ) 6所有氨基酸都具有旋光性。( ) 7构成蛋白质的20种氨基酸都是必需氨基酸。( ) 8蛋白质多肽链中氨基酸的排列顺序在很大程度上决定了它的构象。( ) 9一氨基一羧基氨基酸的pI为中性，因为-COOH和-NH2 的解离度相同。( ) 10蛋白质的变性是蛋白质立体结构的破坏，因此涉及肽键的断裂。( ) 11蛋白质是生物大分子，但并不都具有四级结构。( ) 12血红蛋白和肌红蛋白都是氧的载体，前者是一个典型的变构蛋白，在与氧结合过程中呈现变构效应，而后者却不是。( ) 13.用FDNB法和Edman降解法测定蛋白质多肽链N-端氨基酸的原理是相同的。(

13、) 14并非所有构成蛋白质的20种氨基酸的-碳原子上都有一个自由羧基和一个自由氨基。( ) 15蛋白质是两性电解质，它的酸碱性质主要取决于肽链上可解离的R基团。( ) 16在具有四级结构的蛋白质分子中，每个具有三级结构的多肽链是一个亚基。( ) 17所有的肽和蛋白质都能和硫酸铜的碱性溶液发生双缩尿反应。( ) 18一个蛋白质分子中有两个半胱氨酸存在时，它们之间可以形成两个二硫键。( ) 19盐析法可使蛋白质沉淀，但不引起变性，所以盐析法常用于蛋白质的分离制备。( ) 20蛋白质的空间结构就是它的三级结构。( ) 21维持蛋白质三级结构最重要的作用力是氢键。( )22具有四级结构的蛋白质，它的每

14、个亚基单独存在时仍能保存蛋白质原有的生物活性。( )23变性蛋白质的溶解度降低，是由于中和了蛋白质分子表面的电荷及破 坏了外层的水膜所引起的。( )24蛋白质二级结构的稳定性是靠链内氢键维持的，肽链上每个肽键都参与氢键的形成。（五）问答题1什么是蛋白质的一级结构？为什么说蛋白质的一级结构决定其空间结构？2什么是蛋白质的空间结构？蛋白质的空间结构与其生物功能有何关系？3蛋白质的螺旋结构有何特点？4蛋白质的折叠结构有何特点？5举例说明蛋白质的结构与其功能之间的关系。6什么是蛋白质的变性作用和复性作用？蛋白质变性后哪些性质会发生改变？7简述蛋白质变性作用的机制。8蛋白质有哪些重要功能9下列试剂和酶常

15、用于蛋白质化学的研究中：CNBr、异硫氰酸苯酯、丹黄酰氯、脲、6mol/L HCl、-巯基乙醇、水合茚三酮、过甲酸、胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶。其中哪一个最适合完成以下各项任务？（1）测定小肽的氨基酸序列。（2）鉴定肽的氨基末端残基。（3）不含二硫键的蛋白质的可逆变性；如有二硫键存在时还需加什么试剂？（4）在芳香族氨基酸残基羧基侧水解肽键。（4）在蛋氨酸残基羧基侧水解肽键。（5）在赖氨酸和精氨酸残基羧基侧水解肽键。10根据蛋白质一级氨基酸序列可以预测蛋白质的空间结构。假设有下列氨基酸序列（如图）：1 5 10 15 Ile-Ala-His-Thr-Tyr-Gly-Pro-Glu-Ala-Ala-M

16、et-Cys-Lys-Try-Glu-Ala-Gln- 20 25 27Pro-Asp-Gly-Met-Glu-Cys-Ala-Phe-His-Arg（1）预测在该序列的哪一部位可能会出弯或-转角。（2）何处可能形成链内二硫键？（3）假设该序列只是大的球蛋白的一部分，下面氨基酸残基中哪些可能分布在蛋白的外表面，哪些分布在内部？天冬氨酸；异亮氨酸；苏氨酸；缬氨酸；谷氨酰胺；赖氨酸核酸(一)名词解释1单核苷酸(mononucleotide)2磷酸二酯键（phosphodiester bonds）3不对称比率（dissymmetry ratio）4碱基互补规律(complementary base

17、pairing)5反密码子（anticodon）6顺反子（cistron）7核酸的变性与复性（denaturation、renaturation）8退火（annealing）9增色效应（hyper chromic effect）10减色效应（hypo chromic effect）11噬菌体（phage）12发夹结构（hairpin structure）13DNA的熔解温度（melting temperature Tm）14分子杂交（molecular hybridization）15环化核苷酸(cyclic nucleotide)（二）填空题1DNA双螺旋结构模型是_于_年提出的。2核酸的基

18、本结构单位是_。3脱氧核糖核酸在糖环_位置不带羟基。4两类核酸在细胞中的分布不同，DNA主要位于_中，RNA主要位于_中。5核酸分子中的糖苷键均为_型糖苷键。糖环与碱基之间的连键为_键。核苷与核苷之间通过_键连接成多聚体。6核酸的特征元素_。7碱基与戊糖间是C-C连接的是_核苷。8DNA中的_嘧啶碱与RNA中的_嘧啶碱的氢键结合性质是相似的。9DNA中的_嘧啶碱与RNA中的_嘧啶碱的氢键结合性质是相似的。 10DNA双螺旋的两股链的顺序是_关系。11给动物食用3H标记的_，可使DNA带有放射性，而RNA不带放射性。12B型DNA双螺旋的螺距为_，每匝螺旋有_对碱基，每对碱基的转角是_。13在D

19、NA分子中，一般来说G-C含量高时，比重_，Tm（熔解温度）则_，分子比较稳定。14在_ _条件下，互补的单股核苷酸序列将缔结成双链分子。15_RNA分子指导蛋白质合成，_RNA分子用作蛋白质合成中活化氨基酸的载体。16DNA分子的沉降系数决定于_、_。17DNA变性后，紫外吸收_ _，粘度_ _、浮力密度_ _，生物活性将_ _。18因为核酸分子具有_ _、_ _，所以在_nm处有吸收峰，可用紫外分光光度计测定。19双链DNA热变性后，或在pH2以下，或在pH12以上时，其OD260_，同样条件下，单链DNA的OD260_。20DNA样品的均一性愈高，其熔解过程的温度范围愈_。21DNA所在

20、介质的离子强度越低，其熔解过程的温度范围愈_，熔解温度愈_，所以DNA应保存在较_浓度的盐溶液中，通常为_mol/L的NaCI溶液。22mRNA在细胞内的种类_，但只占RNA总量的_，它是以_为模板合成的，又是_合成的模板。 23变性DNA 的复性与许多因素有关，包括_，_，_，_，_，等。24维持DNA双螺旋结构稳定的主要因素是_，其次，大量存在于DNA分子中的弱作用力如_，_和_也起一定作用。25mRNA的二级结构呈_形，三级结构呈_形，其3末端有一共同碱基序列_其功能是_。26常见的环化核苷酸有_和_。其作用是_，他们核糖上的_位与_位磷酸-OH环化。27真核细胞的mRNA帽子由_组成，

21、其尾部由_组成，他们的功能分别是_，_。28 28DNA在水溶解中热变性之后，如果将溶液迅速冷却，则DNA保持_状态；若使溶液缓慢冷却，则DNA重新形成_。（三）选择题1ATP分子中各组分的连接方式是：AR-A-P-P-P BA-R-P-P-P CP-A-R-P-P DP-R-A-P-P2hnRNA是下列哪种RNA的前体？AtRNA BrRNA CmRNA DSnRNA3决定tRNA携带氨基酸特异性的关键部位是：AXCCA3末端 BTC环； CDHU环 D额外环 E反密码子环4根据Watson-Crick模型，求得每一微米DNA双螺旋含核苷酸对的平均数为：:A25400 B2540 C2941

22、1 D2941 E35055构成多核苷酸链骨架的关键是：A23-磷酸二酯键 B 24-磷酸二酯键 C25-磷酸二酯键 D 34-磷酸二酯键 E35-磷酸二酯键6与片段TAGAp互补的片段为：AAGATp BATCTp CTCTAp DUAUAp7含有稀有碱基比例较多的核酸是：A胞核DNA B线粒体DNA CtRNA D mRNA8真核细胞mRNA帽子结构最多见的是：Am7APPPNmPNmP B m7GPPPNmPNmP Cm7UPPPNmPNmP Dm7CPPPNmPNmP E m7TPPPNmPNmP9 9 DNA变性后理化性质有下述改变：A对260nm紫外吸收减少 B溶液粘度下降 C磷酸

23、二酯键断裂 D核苷酸断裂10双链DNA的Tm较高是由于下列哪组核苷酸含量较高所致：AA+G BC+T CA+T DG+C EA+C11密码子GA，所识别的密码子是：ACAU BUGC CCGU DUAC E都不对12真核生物mRNA的帽子结构中，m7G与多核苷酸链通过三个磷酸基连接，连接方式是：A2-5 B3-5 C3-3 D5-5 E3-313在pH3.5的缓冲液中带正电荷最多的是：AAMP BGMP CCMP DUMP14下列对于环核苷酸的叙述，哪一项是错误的？AcAMP与cGMP的生物学作用相反 B 重要的环核苷酸有cAMP与cGMPCcAMP是一种第二信使 DcAMP分子内有环化的磷酸

24、二酯键15真核生物DNA缠绕在组蛋白上构成核小体，核小体含有的蛋白质是AH1、H2、 H3、H4各两分子 BH1A、H1B、H2B、H2A各两分子CH2A、H2B、H3A、H3B各两分子 DH2A、H2B、H3、H4各两分子EH2A、H2B、H4A、H4B各两分子（四）是非判断题（ ）1DNA是生物遗传物质，RNA则不是。（ ）2脱氧核糖核苷中的糖环3位没有羟基。（ ）3原核生物和真核生物的染色体均为DNA与组蛋白的复合体。（ ）4核酸的紫外吸收与溶液的pH值无关。（ ）5生物体的不同组织中的DNA，其碱基组成也不同。（ ）6核酸中的修饰成分（也叫稀有成分）大部分是在tRNA中发现的。（ ）7

25、DNA的Tm值和AT含量有关，AT含量高则Tm高。（ ）8真核生物mRNA的5端有一个多聚A的结构。（ ）9DNA的Tm值随（A+T）/（G+C）比值的增加而减少。（ ）10B-DNA代表细胞内DNA的基本构象，在某些情况下，还会呈现A型、Z型和三股螺旋的局部构象。（ ）11DNA复性（退火）一般在低于其Tm值约20的温度下进行的。（ ）12用碱水解核酸时，可以得到2和3-核苷酸的混合物。（ ）13生物体内，天然存在的DNA分子多为负超螺旋。（ ）14mRNA是细胞内种类最多、含量最丰富的RNA。（ ）15tRNA的二级结构中的额外环是tRNA分类的重要指标。（ ）16对于提纯的DNA样品，测

26、得OD260/OD280Km时， V趋向于Vmax，此时只有通过增加E来增加V。（ ）20酶的最适pH值是一个常数，每一种酶只有一个确定的最适pH值。（ ）21酶的最适温度与酶的作用时间有关，作用时间长，则最适温度高，作用时间短，则最适温度低。（ ）22金属离子作为酶的激活剂，有的可以相互取代，有的可以相互拮抗。（ ）23增加不可逆抑制剂的浓度，可以实现酶活性的完全抑制。（ ）24竞争性可逆抑制剂一定与酶的底物结合在酶的同一部位。（ ）25由1g粗酶制剂经纯化后得到10mg电泳纯的酶制剂，那么酶的比活较原来提高了100倍。（ ）26酶反应的最适pH值只取决于酶蛋白本身的结构。（ ）27所有B族

27、维生素都是杂环化合物。（ ）28B族维生素都可以作为辅酶的组分参与代谢。（ ）29脂溶性维生素都不能作为辅酶参与代谢。（ ）30除了动物外，其他生物包括植物、微生物的生长也有需要维生素的现象。（ ）31植物的某些器官可以自行合成某些维生素，并供给植物整体生长所需。（ ）32维生素E不容易被氧化，因此可做抗氧化剂。（六）问答题及计算题1怎样证明酶是蛋白质？2简述酶作为生物催化剂与一般化学催化剂的共性及其个性？3简述Cech及Altman是如何发现具有催化活性的RNA的？4试指出下列每种酶具有哪种类型的专一性？（1）脲酶（只催化尿素NH2CONH2的水解，但不能作用于NH2CONHCH3）；（2）

28、-D-葡萄糖苷酶（只作用于-D-葡萄糖形成的各种糖甘，但不能作用于其他的糖苷，例如果糖苷）；（3）酯酶（作用于R1COOR2的水解反应）；（4）L-氨基酸氧化酶（只作用于L-氨基酸，而不能作用于D-氨基酸）；（5）反丁烯二酸水合酶只作用于反丁烯二酸（延胡索酸），而不能作用于顺丁烯二酸（马来酸）；（6）甘油激酶（催化甘油磷酸化，生成甘油-1-磷酸）。5称取25mg蛋白酶配成25mL溶液，取2mL溶液测得含蛋白氮0.2mg，另取0.1mL溶液测酶活力，结果每小时可以水解酪蛋白产生1500g酪氨酸，假定1个酶活力单位定义为每分钟产生1g酪氨酸的酶量，请计算：（1）酶溶液的蛋白浓度及比活。（2）每克纯

29、酶制剂的总蛋白含量及总活力。6Vmax与米氏常数可以通过作图法求得，试比较VS图，双倒数图，VV/S作图，S/VS作图及直接线性作图法求Vmax和Km的优缺点？7（1）为什么某些肠道寄生虫如蛔虫在体内不会被消化道内的胃蛋白酶、胰蛋白酶消化？ （2）为什么蚕豆必须煮熟后食用，否则容易引起不适？8使用下表数据，作图判断抑制剂类型（竞争性还是非竞争性可逆抑制剂）？S mmol/L 2.0 3.0 4.0 10.0 15.0每小时形成产物的量 （mol） 13.9 17.9 21.3 31.3 37.0（没有抑制剂） 每小时形成产物的量（mol） 8.8 12.1 14.9 25.7 31.3（有抑制

30、剂） 9甘油醛-3-磷酸脱氢酶（Mr 150 000）的活性位点有一个Cys残基，假定为使5mL的1.2mg/mL的酶溶液完全失活，需要3.010 -2mg碘乙酰胺（Mr 185），计算酶的催化亚基的数目？10对活细胞的实验测定表明，酶的底物浓度通常就在这种底物的Km值附近，请解释其生理意义？为什么底物浓度不是大大高于Km或大大低于Km呢？11有时别构酶的活性可以被低浓度的竞争性抑制剂激活，请解释？12（1）对于一个遵循米氏动力学的酶而言，当S=Km时，若V=35mol/min，Vmax是多少mol/min？ （2）当S=210 -5mo/L，V=40mol/min，这个酶的Km是多少？ （3

31、）若I表示竞争性抑制剂，KI=410-5mol/L，当S=310-2mol/L和I=310-5mol/L时，V是多少？ （4）若I是非竞争性抑制剂，在KI、S和I条件与（3）中相同时，V是多少？（2）计算S=1.010-6mol/L和S=1.010-1mol/L时的v？（3）计算S=2.010-3mol/L或S=2.010-6mol/L时最初5min内的产物总量？（4）假如每一个反应体系中酶浓度增加到4倍时，Km，Vmax是多少？13在很多酶的活性中心均有His残基参与，请解释？22将下列化学名称与B族维生素及其辅酶形式相匹配？（A）泛酸；（B）烟酸；（C）叶酸；（D）硫胺素；（E）核黄素；（F）吡哆素；（G）生物素。（1）B1 ；（2）B2 ；（3）B3 ；（4）B5 ；（5）B6 ； （6）B7 ；（7）B11； （8）B12。()FMN；()FAD；()N