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1、Tetramer（四聚体）技术1原理原理应用应用产品产品2外源性抗原加工外源性抗原加工 递程递程抗原特异性抗原特异性CTL的分析方法的分析方法51Cr释放实验释放实验PCR法法 ELISPOT（扩增特异T淋巴细胞受体）Tetramer间接法、需大量的特异性CTLs作为效应细胞需体外扩增、周期长，敏感性低。敏感性高但只能用于已知TCR基因型的特异性CTLs检测迅速、灵敏、直接、特异性强、方法简单、无需刺激，目前已成为定量检测特异性 CD8+T细胞的金金标准标准有限稀释法有限稀释法(LDA)T细胞反应时敏感性、特异性和可重复性都很高，操作简单迅速，需要少量标本6 Tetramer 与ELISPOT
2、区别？Tetramer+的 T细胞并不能分泌细胞因子和/或无细胞毒活性;而某些CD8+T细胞能分泌细胞因子和/或细胞毒活性,却不能和tetramer结合。表明单独采用tetramer技术能精确反映机体具有高度抗原特异性的 CD8+T细胞群,但并不能精确反映机体的保护性免疫状态,必须结合相应的功能实验进行综合评估。7原理原理应用应用产品产品81.感染性疾病感染性疾病：HIV-AIDS,EBV,CMV,HPV,HBV,HCV,IV,HIV-AIDS,EBV,CMV,HPV,HBV,HCV,IV,Measles,Malaria,TB and RSVMeasles,Malaria,TB and RSV
3、含有HIV-I型病毒包膜肽等三种抗原肽：HIV特异性CTL数量与血浆中RNA病毒量有明显的负相关，而与产毒性感染细胞的清除率无关。慢性HCV感染患者的特异性CTLs数量明显少于急性HCV感染和已康复患者92.肿瘤肿瘤Breast,Prostate,Melanoma,Colon,Lung,Cervical,Ovarian and Leukemia用黑色素瘤抗原诱导潜在的肿瘤特异性T细胞用Tetramer分离，富集。103.移植移植 GVHD(移植物抗宿主反应)：受体与供体的次要组织相容性抗原(mHags)的不同引起，在骨髓移植后早期出现(14天内)，造成骨髓移植失败-HLA-mHags肽四聚体监
4、测mHags特异性CTL，以了解对GVHD的临床治疗效果.HLA-A2/pp65 Tetramer监测肾移植患者感染CMV后的免疫应答能力.EBV and CMV114.自身免疫性疾病自身免疫性疾病Diabetes,Lyme disease,Multiple sclerosis,Rheumatoid arthritis,Autoimmune vitiligo12原理原理应用应用产品产品13Tetramer难点合成及稳定MHC类分子。抗原表位的选择.14荷兰荷兰 (Sanquin)人：FLU、HIV、CMV、EBV、RSV、HBV、HPV、tumour 鼠：OVA（卵清蛋白)、TRP-2(酪氨酸酶相关蛋白-2)、HY(雄性特异性抗原)、E7(属乳头状瘤病毒)、F5(鼠的一种？)根据需要定制.1516
Tetramer(四聚体)技术ppt参考课件
