专题二微生物的培养

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1、生物选修生物选修1 1生物技术实践生物技术实践http:/2006-06-02http:/ 2006-06-02http:/ 获得纯净培养物的关键是防止获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵，无菌技术围绕着外来杂菌的入侵，无菌技术围绕着如何避免杂菌的污染展开。如何避免杂菌的污染展开。2006-06-02http:/消毒与灭菌的区别消毒与灭菌的区别？2006-06-02http:/分类分类定义定义方法方法灭菌法灭菌法杀灭一切微生物杀灭一切微生物 物理法：热力、辐射、微物理法：热力、辐射、微波、等离子体波、等离子体化学法：醛类、烷化剂化学法：醛类、烷化剂高效消高效消毒法毒法杀灭一切致病微杀灭一切

2、致病微生物生物紫外线、含氯剂、臭氧、紫外线、含氯剂、臭氧、复配剂等复配剂等中效消中效消毒法毒法杀灭除芽孢外的杀灭除芽孢外的致病微生物致病微生物超声波、碘类、醇类、酚超声波、碘类、醇类、酚类类低效消低效消毒法毒法杀灭细菌繁殖体、杀灭细菌繁殖体、亲脂病毒亲脂病毒单链季胺盐、双胍类、中单链季胺盐、双胍类、中草药、金属离子草药、金属离子2006-06-02http:/消毒的方法：消毒的方法：1 1、100100煮沸煮沸5-6min5-6min2 2、巴氏消毒法：、巴氏消毒法：70-75 70-75 下煮下煮30min30min或或 80 80 下煮下煮1515minmin3 3、用、用75%75%酒精

3、、新洁尔灭等进行皮肤消毒酒精、新洁尔灭等进行皮肤消毒4 4、氯气消毒水源、氯气消毒水源5 5、紫外线消毒、紫外线消毒2006-06-02http:/灭菌的方法：灭菌的方法：1 1、灼烧灭菌、灼烧灭菌2 2、干热灭菌：、干热灭菌：160-170 160-170 下加热下加热1-2h。3、高压蒸气灭菌：、高压蒸气灭菌：100kPa、121 下维持下维持15-30min.2006-06-02http:/ 最常用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌，它可以杀灭所最常用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌，它可以杀灭所有的生物，包括最耐热的某些微生物的休眠体，同时可有的生物，包括最耐热的某些微生物的休眠体，同时可以基本保持培养

4、基的营养成分不被破坏。以基本保持培养基的营养成分不被破坏。有些玻璃器皿也可采用高温干热灭菌。为了防止杂有些玻璃器皿也可采用高温干热灭菌。为了防止杂菌，特别是空气中的杂菌污染，试管及玻璃烧瓶都需采菌，特别是空气中的杂菌污染，试管及玻璃烧瓶都需采用适宜的塞子塞口，通常采用棉花塞，也可采用各种金用适宜的塞子塞口，通常采用棉花塞，也可采用各种金属、塑料及硅胶帽，它们只可让空气通过，而空气中的属、塑料及硅胶帽，它们只可让空气通过，而空气中的其他微生物不能通过。其他微生物不能通过。而平皿是由正反两平面板互扣而成，这种器具是专而平皿是由正反两平面板互扣而成，这种器具是专为防止空气中微生物的污染而设计的。为防

5、止空气中微生物的污染而设计的。2006-06-02http:/1、器具的灭菌2、培养基的配制3、培养基的灭菌4、倒平板5、微生物接种6、恒温箱中培养7、菌种的保存2006-06-02http:/ 人们按照微生物对营养物质的不同需求，人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。配制出供其生长繁殖的营养基质。固体培养基液体培养基天然培养基合成培养基基础培养基加富培养基鉴别培养基选择培养基2006-06-02http:/ 牛肉膏蛋白胨培养基（用于培养细菌）牛肉膏蛋白胨培养基（用于培养细菌）2006-06-02http:/ 牛肉膏蛋白胨培养基（用于培养细菌）牛肉膏蛋白胨培养基（用

6、于培养细菌）1 1称量称量2 2溶化溶化3 3调调pHpH：pH7pH76 64 4过滤：这一步可以省去。过滤：这一步可以省去。5 5分装：分装：分装过程中注意不要使培养基沾在管口或瓶口上，以免沾污棉塞而引起污染。分装三角烧瓶的量以不超过三角烧瓶容积的一半为宜。6 6加塞加塞7 7包扎包扎8 8灭菌灭菌9 9倒平板倒平板1010无菌检查：无菌检查：将灭菌的培养基放入37的温室中培养2448小时，以检查灭菌是否彻底。2006-06-02http:/2006-06-02http:/2006-06-02http:/2006-06-02http:/2006-06-02http:/2006-06-02h

7、ttp:/2006-06-02http:/2006-06-02http:/2006-06-02http:/1、临时保藏：接种到固体斜面培养基，菌落长成后置于4冰箱保存。2、长期保存：甘油冷冻管藏法2006-06-02http:/1、由土壤浸出液中提取细菌。2、有哪些注意事项？3、如何判断土壤中有哪些种类的细菌？菌落的特征？2006-06-02http:/ 关注菌落的形态、大小、边缘、突起、颜色、质关注菌落的形态、大小、边缘、突起、颜色、质地等等，都是区分细菌的重要手段。地等等，都是区分细菌的重要手段。2006-06-02http:/ 关注菌落的形态、大小、边缘、突起、颜色、质关注菌落的形态、大

8、小、边缘、突起、颜色、质地等等，都是区分细菌的重要手段。地等等，都是区分细菌的重要手段。2006-06-02http:/ 关注菌落的形态、大小、边缘、突起、颜色、质关注菌落的形态、大小、边缘、突起、颜色、质地等等，都是区分细菌的重要手段。地等等，都是区分细菌的重要手段。2006-06-02http:/ 关注菌落的形态、大小、边缘、突起、颜色、质关注菌落的形态、大小、边缘、突起、颜色、质地等等，都是区分细菌的重要手段。地等等，都是区分细菌的重要手段。2006-06-02http:/ 关注菌落的形态、大小、边缘、突起、颜色、质关注菌落的形态、大小、边缘、突起、颜色、质地等等，都是区分细菌的重要手段

9、。地等等，都是区分细菌的重要手段。2006-06-02http:/ 关注菌落的形态、大小、边缘、突起、颜色、质关注菌落的形态、大小、边缘、突起、颜色、质地等等，都是区分细菌的重要手段。地等等，都是区分细菌的重要手段。2006-06-02http:/1、培养基的选择？2006-06-02http:/1、培养基的选择？构建怎样的选择培养基呢？附：鉴别培养基：伊红附：鉴别培养基：伊红美蓝培养基是鉴别培养美蓝培养基是鉴别培养基，可以用来检测自来水中的大肠杆菌是否超标基，可以用来检测自来水中的大肠杆菌是否超标，因为大肠杆菌的代谢产物与伊红，因为大肠杆菌的代谢产物与伊红美蓝结合，美蓝结合，使菌落呈深紫色并带有金属光泽，使大肠杆菌的使菌落呈深紫色并带有金属光泽，使大肠杆菌的菌落显示出来，并没有促进大肠杆菌的生长和抑菌落显示出来，并没有促进大肠杆菌的生长和抑制其他微生物的生长。制其他微生物的生长。2006-06-02http:/1、如何对细菌进行计数？2006-06-02http:/1、如何对细菌进行计数？2006-06-02http:/1、如何对细菌进行计数？2006-06-02http:/1、如何对细菌进行计数？