《触酶试验氧化酶试验》由会员分享，可在线阅读，更多相关《触酶试验氧化酶试验（2页珍藏版）》请在装配图网上搜索。
1、触酶试验(1) 原理：触酶又称过氧化氢酶，具有过氧化氢酶的细菌，能催化过氧化氢成为 水和原子态氧，继而形成氧分子，出现气泡。方法：取洁净玻片1张，用接种环挑取细菌，加3%H2O2 1滴，立即观察结果。结果：若立即出现大量气泡为阳性。无气泡为阴性。应用：大多需氧和兼性厌氧菌均产生过氧化氢酶，但链球菌科阴性，故常用 此试验来鉴定。此外，金氏杆菌属的细菌也为阴性。分枝杆菌的鉴别则用 耐热触酶试验，结核分枝杆菌为阴性，戈氏分枝杆菌和地分枝杆菌为阳性。 注意事项：3% H2O2溶液要新鲜配制。不宜用血琼脂平板上生长的菌落，因红细胞含有触酶，可致假阳性反应。取对数生长期的细菌。氧化酶试验(1) 原理：氧化
2、酶(细胞色素氧化酶)是细胞色素呼吸酶系统的最终呼吸酶。(2) 试剂：1%盐酸四甲基对苯二胺或1%盐酸二甲基对苯二胺。(3) 方法：常用方法有三种；1) 菌落法：直接滴加试剂于被检菌菌落上。2) 滤纸法：取洁净滤纸一小块，沾取菌少许，然后加试剂。3) 试剂纸片法：将滤纸片浸泡于试剂中制成试剂纸片，取菌涂于试剂 纸上。(4) 结果：细菌在与试剂接触10秒内呈深紫色，为阳性。为保证结果的准确性，分别以铜绿假单胞菌和大肠埃希菌作为阳性和阴性对照。(5) 应用：主要用于肠杆菌科细菌与假单胞菌的鉴别，前者为阴性，后者为阳性。奈瑟菌属、莫拉菌属细菌也呈阳性反应。2.3耐酸性染色法（萎一倪二氏法）2.3.1石
3、炭酸品红染色液碱性品红0.3g 95%乙醇10mL5%酚水溶液90mL将品红溶解于乙醇中，然后与酚溶液混合。2.3.23%盐酸一乙醇 浓盐酸3mL 95%乙醇97mL2.3.3复染液吕氏碱性美蓝染色液。美蓝0.3g； 95%乙醇30mL； 0.01%氢氧化钾 溶液100mL；将美蓝溶解于乙醇中，然后与氢氧化钾溶液混合。2.3.4染色法2.3.4.1将涂片在火焰上加热固定，滴加石炭酸品红染色液，徐徐加热至有蒸气 出现，但切不可使沸腾。染液如因蒸发减少时，应随时添加。染5min，倾去染 液，水洗。2.3.4.2滴加盐酸一乙醇脱色，直至无红色脱落为止（所需时间视涂片厚薄而 定，一般为13min），水洗。2.3.4.3滴加吕氏碱性美蓝染色液，复染30s1min，水洗，待干，镜检。2.3.5结果：耐酸性细菌呈红色，其他细菌、细胞等物质呈蓝色。抗酸染色一般步骤1）初染用玻片夹夹持涂片标本，滴加石炭酸复红2-3滴，在火焰高处徐徐加热，切勿沸腾，出现蒸汽即 暂时离开，若染液蒸发减少，应再加染液，以免干涸，加热3-5分钟，待标本冷却后用水冲洗。2）脱色3%盐酸酒精脱色30秒1分钟；用水冲洗。3）复染用碱性美兰溶液复染1分钟，用水冲洗后用吸水纸吸干。苯酚、美蓝、盐酸四甲基对苯二胺或盐酸二甲基对苯二胺、双氧水
触酶试验氧化酶试验
