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1、最新临床检验根底实验课复习根本仪器1、 毛细吸管：10l、20l2、 改进牛鲍Neubauer计数盘：1个计数池3x3x0.1mm=9个大方格中央1个大方格1x1x0.1mm=25个中方格=400个小方格=1l四角1个大方格，平分为16个中方格3、采血管：紫色：EDTA-K2 血常规检查 黑色：3.2%枸橼酸钠与血比例1:4 血沉检查血液检验一、血涂片染色1、 血涂片：玻片不洁角度速度血滴推片边缘缺口推片边缘弧形空泡过大：厚过小：薄快：厚短慢：薄长堆积尾部不匀：厚薄相间过大：厚小：薄条样缺损中央薄两头厚尾尖2、 瑞士染色瑞氏染料：伊红碱、亚甲蓝酸缓冲液：磷酸盐缓冲液pH6.4-6.8时间：染料
2、I液：5d左右，0.5-1min 缓冲剂II液：等量或稍多，5-10min二、 末梢采血1、 消毒：75%酒精2、 第一滴血因混有组织液，擦掉不用三、 静脉采血1、 消毒：30g/L碘酒，75%酒精2、 有抗凝剂或其他添加剂的混匀四、血细胞计数WBC计数嗜酸粒计数RBC计数PLT计数稀释液2%冰乙酸丙酮-伊红Hayem液或枸橼酸钠甲醛盐水或生理盐水1%草酸铵稀释液作用稀释及破坏成熟RBC，固定WBC稀释，破坏RBC、其他WBC，使E着色稀释稀释，破坏RBC稀释液量0.38ml0.38ml2ml0.38ml血量20l20l10l20l稀释倍数202020020计数区域四角大方格上下两池四角及中央
3、五个大方格中央大方格的五个中方格中央大方格的五个中方格沉淀时间2-3min3-5min2-3min10-15min公式N/410x20x106/LN20x106/LN5x10x200x106/LN5x10x20x106/L参考值成人：4-10109/L新生儿：15-20x109/L儿童：15-20x109/L0.05-0.5109/L成年男：4.0-5.5109/L成年女：3.5-5.0109/L新生儿：6.0-7.0109/L100-300109/L校正存在有核红时：100/100+有核红 xN四、 白细胞分类计数1、 血涂片，瑞士染色2、 体尾交界处，“弓形检查3、 比值中杆中叶嗜酸嗜碱淋
4、巴单核比例%1-550-700.5-50-120-403-84、 核左移：杆状核增多，出现幼稚中性粒 核右移：5叶以上中性粒3%五、 MCV、MCH、MCHC1、 测定工程：RBC计数、Hb测定、Hct测定2、 Hb测定：血红蛋白仪法试剂预热配制参考值文齐液HiCN转换液水或文齐液预热30min20lEDTA-K2血+5ml文齐液混匀静置5min成年男：120-160g/L成年女：110-150g/L新生儿：170-200g/L3、 Hct测定：温氏法试剂器材读数参考值EDTA-K2血水平离心机2264g以上，离心30min，温氏管RBC柱层毫米数x0.01成年女：0.37-0,48六、 血沉
5、魏氏测定方法试剂器材时间读数参考值109mmol/L枸橼酸钠抗凝血魏氏血沉管，血沉架1hRBC下降暴露的血浆长度mm成年男：15mm/h成年女：20mm/h七、尿液常规检测1、外观：颜色淡黄、深黄、淡红、红色、乳白、浓茶、咖啡 透明度透明、微浑、浑浊2、 尿蛋白定性磺基水杨酸法加热乙酸法原理磺酸根阴离子与尿蛋白氨基酸阳离子结合生成不溶性蛋白盐沉淀，沉淀程度与尿蛋白量成正比加热煮沸使蛋白质变性，参加乙酸加速蛋白质沉淀试剂200g/L磺基水杨酸溶液5%乙酸溶液方法1ml尿液+2d试剂混匀，黑色背景下1min内观察有空白对照加热黑观察5%乙酸2-4d加热黑观察结果肉眼可见微浑云雾状+颗粒+絮状+大量
6、絮状或凝块+同左方法学评论灵明度高，应用于干化学法测尿蛋白，但假设尿中存在高浓度尿酸盐、草酸盐等干扰因素或混入生殖系统分泌物时易造成假阳性结果。对白蛋白敏感而球蛋白不敏感。操作略复杂，同样受生殖道分泌物的干扰成假阳性。对白蛋白和球蛋白都敏感5、 尿糖检测对象尿中的葡萄糖原理高热、碱性环境中尿液中葡萄糖或其他复原性糖的醛基能将蓝色的硫酸铜复原为氧化亚铜，出现黄色至砖红色沉淀试剂班氏试剂改进班氏定性试剂方法尿离心取上清2ml试剂煮沸1min观察试剂是否合格参加0.2ml尿上清混匀煮沸1-2min尿液：班氏=1:10结果蓝，色未变 蓝中绿无沉淀液绿，黄绿沉淀少量+ 较多偏黄沉淀+液土黄，大量沉淀+
7、大量红沉淀+方法学评价灵敏度较低，易受尿液中其他复原物质的影响而出现假阳性6、 尿酮体环状法Lange法原理尿液中乙酰乙酸和丙酮与亚硝基铁氰化钠作用，与氨液接触后生成紫红色物质试剂亚硝基铁氰化钠、冰乙酸、25-28%浓氨水方法5ml尿+约250mg亚硝基铁氰化钠混匀+0.5ml冰乙酸混匀+2ml浓氨水缓慢沿管壁注入结果看液面交界处颜色变化：10min无紫环 10min内浅紫红环10min渐出现紫环+ 较快出现紫环+立刻出现紫环+或+7、 尿胆红素Harrison法原理尿中胆红素被氯化钡吸附形成胆红素钡盐沉淀，与Fe3+反响，被氧化成蓝色的胆青素，绿色胆绿素和黄色胆黄素，出现绿色或黄绿色反响试剂
8、酸性三氯化铁试剂Fouchet试剂、100g/L氯化钡溶液方法5ml尿+2.5ml氯化钡混匀，3000rx3-5min，弃上清+2滴Fouchet试剂结果长时间不变色 沉淀物渐浅绿+沉淀物绿+ 沉淀物立刻蓝绿+假阳尿中大量药物如：牛黄、熊胆粉、水杨酸盐、阿司匹林等假阴Fouchet试剂参加过量8、 尿胆原改进Ehrlich法原理酸性溶液中尿胆原的吡咯环能与对二甲苯氨基苯甲醛Ehrlich试剂作用后成樱桃红色反映，其颜色变化与尿胆原含量成正比试剂Ehrlich试剂方法2ml无胆红素尿液+0.2mlEhrlich试剂混匀，静置10min观察方法白色背景，从试管口垂直从上往下看结果长时间不变色 10
9、min后浅红+10min后樱桃红+ 立刻樱桃红+假阳尿中含吡啶、酮体等参加戊醇保持红真阳，变浅绿假阳假阴尿胆原易被氧化为尿胆素所以标本应新鲜送检尿中含维生素C、甲醛、乌洛托品等抑制反响9、 尿有形成分参考范围：细胞： RBC：0-3/HPF WBC：0-5/HPF 扁平上皮细胞：少许女可为多见/HPF 移行上皮细胞：偶见/HPF管型： 透明管型：0-1/HPF结晶： 尿酸盐、碳酸盐、磷酸盐：少许/HPL八、 粪便常规1、 外观： 颜色：黄褐色，黄色，金黄色，鲜红色，暗红色，柏油样，灰白色，绿色 形状：软，硬，糊状，粘液状，胨状，泡沫样，水样，血样，米泔样，柏油样等 寄生虫：查见与否2、 镜检细
10、胞，脂肪球，寄生虫等3、 便隐血免疫法单克隆抗体胶体金法原理：双抗体夹心免疫层析单抗抗人血红蛋白-人血红蛋白-多抗抗人血红蛋白特点：灵敏性特别高九、生殖系统分泌物检查1、精液精子计数试剂标本配制计数计算精子稀释液：碳酸氢钠破坏精液粘稠性甲醛固定精子，定量稀释1h以上已经液化的精液0.38ml稀释液+20l精液稀释20倍同RBC计数Nx5x10x20x106/L=Nx109/L2、 阴道分泌物清洁度：第104页线索细胞加德纳菌阴道毛滴虫真菌染色：革兰染色十、 脑脊液，浆膜腔积液1、外观：颜色，透明度，凝固性有无凝块，薄膜2、细胞总数计数直接计数，也可以用红细胞稀释液稀释后计数10个大方格3、白细胞计数冰乙酸破坏RBC4、脑脊液蛋白质定性潘氏试验Pendy test：原理苯酚与脑脊液中的蛋白质球蛋白为主结合形成不溶性蛋白盐沉淀，沉淀量与蛋白量成正比试剂5%苯酚溶液方法2-3ml苯酚+垂直滴入1-2d脑脊液+立即黑背景观察结果清晰透明 微白雾状灰白云雾+ 白色浑浊+白色絮状或沉淀+ 立即白色沉淀+假阳苯酚试剂不纯，器材不干净5、 浆膜腔积液蛋白质定性原理黏蛋白是酸性糖蛋白，在稀乙酸中可凝结出现白色沉淀试剂冰乙酸方法100ml水+2-3d冰乙酸混匀+黑色背景直接垂直滴加2-3滴浆膜腔积液假阴冰乙酸过量
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