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1、学习微生物培养的基本技术,实验原理 1.配制培养基时要注意原料的选择和调 节适宜的PH 2.配制好的培养基必须经过灭菌，灭菌是指杀死一定环境中的所有微生物细胞、芽孢和孢子。 3.对不同的材料，应当采取不同的灭菌方法：培养基一般采用高压蒸汽灭菌法，而接种环则用火焰灼烧法,方法步骤：,一、细菌的培养技术：,1、培养基的配制：,1、称量,2、溶化,3、调PH,4、培养基的分装,5、加棉塞,6、包扎,加入材料（蛋白胨、牛肉膏、琼脂等）加热溶化,1mol/L的NaOH溶液，PH试纸，7476,棉塞能防止杂菌污染，保证通气良好。不能太松、不难太紧，2/3在管内,1,正确,2、灭菌,开锅加水 放入待灭菌的材
2、料：管口向上，竖放，不能太挤 加盖 排出锅内冷空气：达49Kpa时，排气两次 维持：98 Kpa，20min 排气：锅内压力降为0时，才能排气,3、搁置斜面,将锅内试管等取出，在冷却至50时，搁置 斜面，斜面长度不能超过试管总长度的1/2,4、接种,洗净双手，用酒精擦拭 等手上酒精挥发以后，点燃酒精灯 接种,左手夹住菌种试管和接种斜面试管，拧松棉塞,接种环灼烧灭菌,右手无名指和小指夹住棉塞（不能放下）， 灼烧管口一周,接种环伸入试管内，在末长菌的部位冷却， 后挑取少量菌体，立即抽出,在火焰旁迅速将接种环由斜面底部向外轻轻 画蛇形细线,抽出接种环，再用火焰灼烧管口，并在火焰 上方将棉塞塞上,熄灭
3、酒精灯 填写标签,5、培养,25 C 57天 37 C 24小时,1不同微生物生长所要求的最适温度不同。请就测定大肠杆菌生长最适温度的实验回答下列问题： (1)配制的相应培养基可属于 。 A天然培养基 B半固体培养基 C液体培养基 D伊红一美蓝选择培养基,课堂练习,AC,(2)依次按称量、溶化、调pH、分装(每管5ml)、 、包扎的顺序，完成培养 基的配制，再用 （方法） 灭菌后，取8支试管，分别标明20、28、37、45四种温度，每种温度2管。,加棉塞,高压蒸气灭菌法,(3)向每管中接人处于 期的大肠杆 菌菌液0lml，混匀。在相应温度下培养 24h。,对数,(4)测定结果显示，45下的菌体
4、最少，因为细胞内的 等发生了不可逆的破坏。,蛋白质和核酸,（2008理综天津卷）31、（16分） 莠去津是一种含氮的有机化合物，它是广泛使用的除草剂之一。 莠去津的作用机理之一是阻断光反应中的电子传递过程，影响NADP形成，进而影响在中进行光合作用的暗反应过程，最终抑制杂草生长。,NADPH,叶绿体基质,从使用莠去津农田中，选到了能遗传的耐莠去津杂草，将它与敏感莠去津植株杂交，结坚果见下表：,由表推断，控制该耐药性状的基因位于。,细胞质中,某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验。实验包括制备培养基、灭菌、接种及培养、菌落观察计数。请回答与此实验相关的问题。 （1）培养基中含有的蛋白
5、胨、淀粉分别为细菌培养提供了_和_。除此之外，培养基还必须含有的基本成分是_和_。 （2）对培养基进行灭菌，应该采用的方法是_ 。,氮源,碳源,无机盐,水,高压蒸汽灭菌,（3）为了尽快观察到细菌培养的实验结果，应将接种了湖水样品的平板置于_ _ 中培养，培养的温度设定在37。要使该实验所得结果可靠，还应该同时在另一平板上接种_作为对照进行实验。,（4）培养20小时后，观察到平板上有形态和颜色不同的菌落，这说明湖水样品中有_种细菌。一般说来，菌落总数越多，湖水遭受细菌污染的程度越_。,恒温培养箱,无菌水,多,高,（5）如果提高培养基中NaCl的浓度，可以用于筛选耐_细菌，这种培养基被称为_ 。,
6、盐,选择性培养基,16在光亮处用一种培养液分别培养绿藻和酵母菌，其结果如右图，造成这种结果的原因是培养液中 A缺少无机盐 B含氧量太高 C缺少有机养分 D不含二氧化碳,C,17右图是细菌的生长速度曲线，根据曲线回答下列问题： (1)活细菌数量最多时对应的是曲线中的 段。 总菌数目(包括死菌和活菌)最多的时期对应曲线中的 段。,(2)3段中生长速度下降的原因是 。,3,4,营养物质的消耗；有害代谢产物的积累，Ph 值变化,(3)调整期出现的原因是细菌接种到新的培养基上后，需要重新合成必需的酶，辅酶或某些必需中间代谢产物，以适应新环境，这种调节方式属 。,酶合成的调节,(4)处于对数期的微生物，代谢旺盛，生长迅速，如果用作菌种，可在短时间内得到大量微生物，以缩短发酵周期，曲线中属于这一时期的是 段。,2,3（重庆）下列有关大肠杆菌的叙述，正确的是 A大肠杆菌以复制方式进行繁殖，其拟核是一个环状DNA分子 B在含葡萄糖和乳糖的培养基上，大肠杆菌首先利用乳糖作碳源 C用大肠杆菌工程菌生产干扰素时应及时添加核酸等生长因子 D处于对数期的大肠杆菌常作为生产用的菌种和科研的材料,D,
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