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1、杨文亮,苏云金芽孢杆菌综述,内容,BT发展史,BT的形态特征及杀虫机理,BT的生产工艺,存在的问题与可能的解决途径,BT发展史,BT起源,1901年由日本细菌学家石渡首先在受病害的蚕蛾中发现BT,但是当时没有保存下来。,1911年，德国人贝尔奈从德国苏云金省这个地方的一家面粉厂里的地中海粉螟上又重新分离到一种有很强杀虫力的细菌,并正式定名为苏云金芽胞杆菌。(Bacillusthuringiensis,B.t.),BT的发展,1958年，世界第一个bt杀虫剂由美国一家公司投入市场。,中国从上世纪60 年代也开始了规模化生产. 同苏云金杆菌有关的研究，特别是有关分子生物学方面的研究正在持续展开。,
2、BT在我国的应用情况,在我国苏云金芽孢杆菌共登记了两个亚种：苏云金亚种和苏云金以色列亚种。原药生产厂家8家（一家国外公司）。制剂生产厂家几十家。以登记含BT药品184个。,登记的剂型有：悬浮剂，可湿性粉剂 水分散粒剂 颗粒剂 大粒剂 油悬剂,BT的形态及杀虫机理,welcome to use these PowerPoint templates, New Content design, 10 years experience,Bacillus thuringiensis :一种杆状、革兰氏染色阳性反应、能形成内生芽胞的细菌。其营养体具有周生鞭毛或无鞭毛,与BT亲源性相近的菌种比较,蜡状芽孢杆菌
3、Bacillus cereus,炭疽杆菌（Bacillus anthraci）,B.t.杀虫毒素,welcome to use these PowerPoint templates, New Content design, 10 years experience,1、伴孢晶体（ICPs）即-内毒素。 2、苏云金素即-外毒素。 3、芽孢。,Content,welcome to use these PowerPoint templates, New Content design, 10 years experience,welcome to use these PowerPoint templat
4、es, New Content design, 10 years experience,请在此添加段落内容 请在此添加段落内容,BT杀虫谱,按应用途径分类,林业上,作物上,防治松毛虫、舞毒蛾、刺蛾等食叶性害虫,主要防治稻螟虫、黏虫、菜粉蝶、菜青虫、棉铃虫、玉米螟、线虫、茶尺蠖等,直翅目、鞘翅目,双翅目、膜翅目,鳞翅目,BT的生产工艺,液体深层发酵,优点：条件可控，适合大规模生产，且生长速度快。 缺点：一次性投入高。,固体发酵,优点：成本低，操作简单。 缺点：条件不易控制，一般发酵周期较长。,发酵条件,温度：一方面随着温度的上升，细胞中生物化学反 应速率加快；另一方面，组成细胞的物质如蛋白质、
5、核酸等都对温度较敏感，随着温度的升高，这些物 质的立体结构受到破坏，从而引起微生物生长的抑 制，甚至死亡。BT生长最佳温度28-32度。 溶氧：苏云金杆菌在对数生长期要消耗大量的氧气 ，并相应释放出大量的热量. 如果中断供氧，细 胞停止生长，不能形成芽孢和晶体，最终导致细胞 自溶. PH：影响氧的溶解度、营养物质的物理化学状态、 氧化还原电位等。pH影响酶的形成、酶的活力、代 谢途径或细胞膜的透性等重要生理生化活动。,培养基组分,碳源：构成菌体成分的重要物质，为生命活动提供所需的能量。 氮源：氮源是构成微生物细胞蛋白质、核酸等重要物质的主要营养物质。 碳氮比：碳氮比（C/N）是指培养料中碳源与
6、氮源含量的比值。糖氮比0.4420.0的范围内都能生 长的很好。通常为2-7。,无机盐： KH2PO4 是E-M-P 途径中磷酸化过程不可缺少的物质；KH2PO4 的缓冲作用有利于芽孢和晶体的形成.。钾的主要作用是维持渗透压和离子平衡。 Ca2+在芽孢皮层形成时与DPA 结合形成DPA-Ca 复合物，促使形成芽孢。 镁是核糖体和膜结构的稳定剂，能激活酶反应，对重金属引起的细胞毒害还有一定的拮抗作用 微量元素： 锰是多种酶的激活剂,前人设计出的BT培养基,检测方法,测孢子数,电泳法,生物检测法,后处理工艺,膜过滤浓缩,喷雾干燥,制成剂型,成品包装,存在的问题与可能的解决途径,2,3,1,作用方式
7、单一:只能通过胃毒的方式起作用,产生抗药性：在我国的许多地方也已经发现大 田小菜蛾对BT制剂的抗性成倍增加。,在环境中不稳定：紫外线照射毒力蛋白钝化，丧失活性。,问题,可能的解决途径,不同BT亚种的轮换、混合使用。 T杀虫剂与少量化学药混合使用。,在制剂时添加防紫外线破坏的保护剂,加入蔗糖提高昆虫嗜食性，添加几丁质酶加强昆虫肠壁破坏，加入K2CO3、CaCl3等阳离子加速伴孢晶体降解，增加杀虫剂的效力,前沿技术,随着对其作用的分子机理的大量研究以及近年来基因工程技术的发展，通过遗传学方法对苏云金杆菌进行改良，获得了有价值的苏云金杆菌新菌株。 1、选择性质粒改造。 2、通过接合构建新菌株。 3、利用基因工程技术将cry基因向其它生物体转移。,机遇与挑战,市场：BT年产量4万吨，应用5000-6000万亩次。,有机食品论证：Bt已通过，阿维菌素不行。,现状：厂家多、规模小、质量难保证，2000-3000万产值只有3-4家。,政策：“十二五”末，全国蔬菜、水果、茶叶病虫害绿色防控覆盖面达到播种面积的50%以上，绿色防控实施区域内化学农药使用量消减20%以上。,Thank you!,
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