胚胎干细胞的体外诱导分化与筛选.ppt

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1、胚胎干细胞的体外诱导分化与筛选,在特定的体外培养条件和诱导剂作用下,胚胎干细胞可以分化形成其他类型的细胞。 包括:造血系细胞、心肌细胞、神经细胞、脂肪细胞、胰岛素分泌细胞、内皮细胞、上皮细胞、肝脏细胞、成骨细胞、表皮样细胞等。 方法:细胞因子诱导法、选择性标记基因筛选目的细胞法、特异性转录因子异位表达法,细胞因子诱导法,在体外诱导ES细胞分化方面,细胞因子诱导法研究的比较深入。 细胞因子:也称为细胞激素,是一组蛋白质及多肽,在生物中用作信号蛋白。这些类似激素或神经递质的蛋白用作细胞间沟通的信号。,细胞因子诱导分化的方法虽然操作简便,但其诱导产生的成熟细胞数量较少,而且纯度较低,不利于细胞移植治

2、疗。 于是人们开始尝试利用转基因方法达到诱导ES细胞定向分化,特异性转录因子异位表达法,这是一种转基因的方法。 特异性转录因子异位表达就是将细胞系特异表达基因导入ES细胞,并使其表达,产生特异性转录因子。从而诱导ES细胞分化为目的细胞系。 成肌细胞决定基因(MyoD)同源异型基因B4和11(HoxB 4和Hox 11)的组成型异位表达可诱导小鼠ES细胞分化为肌肉细胞造血细胞,选择性标记基因筛选目的细胞,利用基因工程技术将带有选择性标记的基因转入胚胎干细胞,在体外培养胚胎干细胞,利用选择性基因(如抗生素基因、绿色荧光蛋白基因),胚胎干细胞研究前景及存在的问题,应用前景,由于ES 细胞具有体胚胎所

3、不具有的优越性,所以ES 细胞是研究胚胎发育的理想模型。ES 细胞几乎可发育成所有类型细胞,可将定向诱导产生的细胞或组织用于替代治疗解决相应的严重疾病,如神经变性疾病(帕金森综合症、亨廷顿舞蹈症、阿尔茨海默病等),糖尿病,心脏病,原发性缺陷病,烧伤等,存在的问题,来源限制:由于需要胚胎作为胚胎干细胞分离的材料,因此人类胚胎干细胞研究存在来源限制的问题 体外培养困难:由于胚胎干细胞的体外培养会自动分化,而且机制还不清楚,控制胚胎干细胞分化的一致的技术有待完善。,3.安全性:胚胎干细胞和多能成体干细胞的自动分化方向是多向的,干细胞移植后的成瘤性风险比较大 4.伦理道德问题:获取人的胚胎干细胞、体外培养的胚囊是否具有生命使人类胚胎干细胞研究面临伦理道德问题,

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