常用试剂配制及显色方法详解

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1、常用试剂配制及显色方法详解(一) 通用显色剂1. 重铭酸钾一硫酸一般有机物均能显色，不同化合物显示不同颜色。喷洒剂:5克重铭酸钾溶于100ml，40%硫酸中。喷洒后加热至150oC斑点出 现。2. 碘:检查一般有机物(1) 碘蒸汽:在一个密闭玻璃皿先放入碘片，使缸内空气被碘蒸气饱和将薄层或 纸层放入缸内数分钟即显色，有时在缸内放一盛水的小杯，增加缸内的湿度，可提 高显色的灵敏度。(2) 0.5%碘的氯仿溶液，取出挥发散过量的碘再喷1%淀粉的水溶液，斑点转成 蓝色。3. 碘一碘化钾溶液:很我有机物虽黄色(配法见后)。4.5%磷钼酸乙醇溶液:喷后120oC烤，还原性物质显兰色，再用氨气熏，则 背景

2、变为无色。5.20%磷酸乙醇溶液:喷后120oC，还原性物质显兰色。6碱性高锰酸钾试剂:还原性物质在淡红背景上显黄色。溶液I:1%高锰酸钾溶 液。:5%碳酸钠溶液。溶液II溶液I和溶液II等量混合使用。7. 中性0.05%高锰酸钾溶液:易还原性物质在淡红背景上显黄色。8. 硝酸银一氢氧化铵(Tollens-zoffaronl)试剂，喷后105oC烤510分钟， 还原性物质显黑色。溶液I:0.1N硝酸银溶液。溶液II:氢氧化铵溶液。临用前溶液I和溶液II以1:5混合。注意:放久则形成爆炸性的叠氦化银。9硝酸银一高锰酸钾试剂:还原性物质在兰绿色背景上立即显黄色。溶液I:0.1N硝酸银溶液:2N氢氧

3、化铵溶液:2N氢氧化钠（1:1:2）。临用前配 制。溶液II:高锰酸钾0.5g，碳酸钠1g，加水成100ml溶液，临用前溶液I和溶液 II等量混合。10. 四唑试剂:还原性物质，在室温或微加热时显紫色。溶液I:0.5%四唑兰甲醇溶液。溶液II:6N氢氧化钠溶液。临用前溶液I和溶液 II等量混合。11. 铁氤化钾:三氯化铁试剂:还原性物质显兰色，再喷射2N/L盐酸溶液，则兰 色加深。溶液I:1%铁氤化钾溶液。溶液II:2%三氯化铁溶液。临用前溶液I和溶液II 等量混合。12. 浓硫酸：甲醇（1:1）溶液，或5%硫酸的乙醇溶液，喷后100oC烤15分钟，各 种不同物质显不同颜色。13. 萤光显色剂

4、溶液:试喷以下一溶液，不同的物质财富在萤光背景上可能显黑 色或其他萤光斑点。A:0.2%2.7-二氯萤光素乙醇溶液。B:0.01萤光素乙醇液C:0.1%桑色素乙醇溶液D:0.05罗丹明B乙醇溶液E:萤光素一漠，检不饱和化合物。萤光素乙醇溶液（1）0.1%(2)5%漠的CCL4溶液。喷洒(1)以后，放置(2)溶液的缸内，可在UV光下检查萤光，萤光素与漠化，而光饱和化合物则与漠加成，保留了原来的萤光;合成曙红(ensln)(无萤光) 若点样量较多，则成黄色斑点，底板成红色。14. 碱式醋酸铅试剂(可做喷洒或沉淀试剂，多种有机化合物均反应)。取Pbo14g置乳钵内，加蒸馏水10ml，研后成糊状后，倾

5、入玻璃瓶中，乳钵用 10ml蒸馏水洗净，洗液并入瓶中，加醋酸铅溶液(取醋酸铅22g，加蒸馏水70ml制 成)70ml，用力振摇，放置七天，滤过，并自滤器中添加适量新沸过的冷蒸馏水使 成100ml即得。(二) 生物碱显色剂通用显色剂：1. 改良碘化铋钾(Dragendorff)试剂:生物碱和某些含氯化合物显橙红色。溶液I:碱式硝酸铋0.85g，溶于冰乙酸10ml和40ml.溶液II:碘化钾0.8g溶于水20ml.储存液:溶液I和溶液II等量混合(置棕色瓶中杨以长期保存)。显色剂:储存1ml与冰乙酸2ml和水70ml混合，用前配制。2. 碘化铂钾(碘铂酸)试剂，不同的生物碱显不同的颜色。10%六氯

6、化铂酸溶液 3ml和水97ml混合，加6%碘化钾溶液100ml，混合均匀，临用前配制。3. 碘-碘化钾(Wagner)试剂:生物碱显棕褐色。碘1g和碘化钾10g溶于50ml水中，加热，加冰醋酸2ml用水稀释到100ml。4. 改良碘化铋钾:碘，碘化钾(1:1)试剂;生物碱显紫棕色或灰黑色。5. 硫酸铈-硫酸试剂(改良sonnensclein试剂)：喷后110oC烤几分钟，不同的 生物碱显不同的颜色。硫酸铈0.1g悬浮于水4ml中，加三氯化乙酸1g，加热煮 沸，放冷，逐滴加入浓硫酸直到混浊消失为止。6. 碘化氯钾（vmayer）试剂（沉淀试剂）：取HgCL2（毒）1.35g加蒸馏水60ml溶解

7、后，量取碘化钾5g，加碘馏水10ml使溶解将两液混合，加蒸馏水稀释使成100ml 即得。7. 硅钨酸（Bertrand）试剂（沉淀试剂）：5g硅钨酸溶于100ml蒸馏水中，加稀盐 酸使呈酸性反应即得。（三）强心甙显色剂1. 碱性3.5二硝基苯甲酸试剂:强心甙显紫红色、几分钟后褪色。2%3.5二 硝基苯甲酸甲醇溶液与2N氢氧化钾溶液，用前按劳1:1混合。2. 碱性三硝基苯:在浅橙色背景上显橙红色。溶液I:间三硝基苯100mg。溶于二甲基甲酰胺40ml，加浓HCL34滴，加水至 100ml，避光能长期保存。溶液II:5%碳酸风溶液先喷溶液I，再喷溶液II，喷后90103.0oC烤5分钟。3. 三氯

8、乙酸试剂:喷后110oC烤710分钟，紫外光下观察萤光。试剂I:25%三氯乙酸的乙醇或氯仿溶液，配制后可放置数日。或用试剂II:上 述乙醇溶液用前每10ml加过氧化氢溶液4滴或新配3%氯铵T水溶液按4:1混合。4. 三氯化锑试剂:喷后100oC烤5分钟，日光下或紫外光下观察。25%或饱和的三氯化锑氯仿溶液。5. 磷酸一漠试剂溶液I:10%磷酸溶液。溶液II:漠化钾饱和溶液:25%盐酸溶液（1:1:1）。薄层用溶液I喷洒后，在125oC烤12分钟（薄层太湿时则烤的时间可适当延 长），在紫外光下观察一次，将薄层再烤热，趁热喷溶液II，再在紫外光下观察。去氧糖）6. Keller-Kllianl 试

9、剂：（检查 a试液:100ml冰HAC和FeCL3试液0.5ml混匀，试样1ml混匀。试样1ml加试液2ml溶解后，沿试管壁滴入浓硫酸2接触面即显棕色。渐变浅绿，兰色。最后HAC 层全部染成兰色。（四）黄酮甙显色剂黄酮类成份在紫外光下大多显出不同颜色，用氨熏，喷三氯化铝溶液或喷氢氧化钠等碱性溶液，则颜色变深或变色。I. 氨气2.10%氢氧化钠或氢氧化钾溶液。3.1%或5%碳酸钠溶液。4.1%或5%三氯化铝乙醇溶液。5.2%乙酸镁甲醇溶液。6.饱和三氯化锑的氯仿溶液，100oC烤5分钟。以上六种试剂在喷前喷后将薄层置日光与紫外光下观察。7.12%三氯化铁乙醇溶液。中性乙酸铅或碱式乙酸铅溶液。8.

10、1%9.0.1N硝酸银溶液。10. 铁氤色钾一三氯化铁试剂。溶液I:2%铁氤化钾溶液。溶液II:2%三氯化铁溶液。临用前溶液I与溶液II等量混合。II. 硼氢化钾试剂:双氢黄酮化合物显红、橙红色。溶液I:12%硼氢化钾（钠）异丙醇溶液，必须新鲜配制。溶液II:浓盐酸先喷I、5分钟后放入盐酸蒸气槽内。12.Shinoda试剂:在混有锌粉的硅胶薄层上喷盐酸，黄酮醇显红紫色。制备硅胶薄层时，加入2%w/w锌粉混合，薄层展开后盐酸溶液，如展开剂为酸性，可在展 开后先喷锌一丙酮混悬液，再喷盐酸溶液。罗丹明一氨试剂。溶液I:0.1%罗丹明B的4%盐酸溶液。溶液II:浓氨溶液。先喷溶液I，然后再将薄层放入氨

11、汽槽内。14. 对氨基苯磺酸试剂。溶液I:对氨基苯磺酸盐溶液。溶液II:5%亚硝酸钠溶液。将对氨基苯磺酸0.3g溶液对8%盐酸溶液100ml中，到紫溶液25ml用冰冷却， 加预冷的溶液II1.5ml。15. 硼酸一柠檬酸试剂溶液I:饱和硼酸的丙酮溶液。溶液II:柠檬酸丙酮溶液。先喷溶液I，再喷溶液II。福林试剂（Folin Ciocalteu 试剂）16.钨酸钠10g和钼酸钠2.5g溶于70ml水中，再缓缓加85%磷酸5ml和浓盐酸10ml，将混合液回流煮沸10小时，然后加硫酸锂15g，水5ml及漠1滴，再回去 流煮沸15分钟，所得溶液冷却后移置100ml溶量瓶中并用水稀释到刻度（贮备 液），

12、溶液应不显绿色。溶液I:20%碳酸钠溶液。溶液II:临用前上述贮备液1份用水三分稀释。先喷溶液I，稍干再喷溶液II。（五）皂甙灶显色剂1.25%磷钼酸乙醇溶液:喷后在140oC加热510分钟皂甙元均呈深兰色。2. 三氯化锑浓盐酸或氯仿溶液:喷后在90oC烤10分钟（应在通风厨中进行）， 不同的皂甙元在可见光或紫外光下显出各种颜色。3. 硫酸：甲醇（1:2）溶液，喷后加热，不同的皂甙元可显红褐色、紫色、黄色或 黑色，所显颜色与温度无关。4. 氟磺酸：乙酸（1:1）溶液，喷后130oC加热5分钟。各种皂甙元可显天兰紫、 粉红、淡棕等色，在紫外光下也显不同萤光。5. 碘蒸汽:薄层置于碘蒸汽筒中，皂甙

13、无皆显棕黄色斑点。6. 三氯快乙酸或三氯乙酸：乙酸（1:2）溶液，喷后在100oC加热20分钟皆显黄 色。7.2%血球生理盐水混悬液（溶血试验、检皂甙）。取新鲜兔血（由心脏或静脉取血）适量，用洁净小毛刷迅速搅拌除去纤维蛋白， 并用生理盐水反复离心洗涤至上清液无色后，量取沉降红血球（可以管的离心管通 接读取）用生理盐水配成2%混悬液贮冰箱内备用（贮存期23天）。（六）蒽醍甙显色剂蒽醍及其甙本身在日光下显黄色，在紫外光下则显黄，红橙色萤光。在薄层上 用氨熏或喷氢氧化钾与碱溶液，则颜色变深或变色。1. 氨气2.10%氢氧化钾、甲醇溶液。3.3%氢氧化钠溶液或碳酸钠溶液。4.50%哌啶的苯溶液。5.

14、饱和喷酸锂溶液。6. 饱和硼砂溶液。7.0.5%乙酸镁甲醇溶液:喷后90oC烤5分钟。8.0.5%乙酸铝溶液，喷后紫外光下看萤光。9.0.5%牢固兰B试剂，喷后则原来氢氧化钠、锂、钾等溶液碱溶液显萤光的斑 点此时在可见光下显棕、紫或绿色。也可先喷本试剂，再喷稀氢氧化钠溶液而显 色。也用于酚类及能偶芳香胺的显色。溶液I:新配的0.5%牢固兰B盐的水溶液。溶液II:0.1N/L氢氧化钠溶液。先喷溶液I，喷溶液II。（七）香豆精甙显色剂1.0.5%碘的碘化钾溶液，香豆精各种颜色，很多其他类型的化合显色。2. 重氟化氨基苯磺酸试剂，香豆精显黄、橙、红、棕紫等颜色也用于酚类，芳 香胺反转偶合的朵环化合物

15、的显色。对氨基苯横酸0.9g克加热溶于12N盐酸9ml，用水稀释到100ml，取此溶液 10ml用冰冷却，加冰冷的4.5%亚硝酸钠溶液10ml，0oC放15分钟（在0oC可保存 三天），用前加等体积1%碳酸钠溶液。3. 重氮化对硝基苯胺试剂、香豆精显黄、红、棕、紫等颜色，也用于酚类的显 色。对硝基苯苯胺0.7g溶于12N盐酸9ml，用水稀释到100ml，将此溶液逐渐滴加 到冰冷的1%亚硝酸钠溶液5,再用冰冷的水稀释到100，需临用时新配。4.4 氨基安替比林一铁氤化钾试剂:香豆素和酚类显橙红至深红色。溶液I:2%4-氨基安替比林乙醇溶液。溶液II:8%铁氨化钾溶液。先喷溶液I，再喷溶液II，再

16、用氨气熏之。5.稀氢氧化钠:喷前喷后薄层在短波长的紫外光下观察萤光。（八）挥发油显色剂1. 茴香醛一浓硫酸试剂:喷后150oC烤。挥发油中各成分显不同颜色。浓硫酸1ml加到冰醋酸50ml中，冷后加茴香醛0.5ml必须临时配制。2. 萤光素-漠试剂:检出含乙烯化合物。（配法及使用见前）。3. 碘化钾一冰乙酸一淀粉试剂:斑点显兰色则为过氧化物。溶液I:4%碘化钾溶液10ml与冰乙酸40ml混合，再加锌粉一小勺过滤。溶液II:新制的1%淀粉溶液。先喷溶液I，5分钟后大量喷溶液II，直喷到薄层透明为止。4. 对二甲氨基苯甲醛剂;检出菌与菌前体在室温或80oC烤10分钟显深兰色。对二甲氨基苯醛0.25克

17、，溶于冰乙酸50g，85g磷酸5克和水20ml的混合液 中，此试剂储于棕色瓶中能稳定数月。5. 异羟肟酸铁试剂:斑点显淡红色，可能是酯和内酯。溶液I:盐酸羟胺5克溶于水12ml,乙醇稀释到50ml,冷处。溶液II:氢氧化钾10g溶于很少量水，再用乙醇稀释到50ml，储于冷处。溶液III:溶液I和溶液II以1:2混合，滤去氯化钾沉淀，所得滤液必须放入 冰箱中，可稳定两星期。溶液IV:三氯化铁(FeCL36H2O)10克溶于36%盐酸20ml，与乙醚200ml振摇， 得均匀的溶液，密塞储存可长久使用。先喷溶液III，在室温先干燥后，再喷溶液IV。6.2.4- -二硝基苯肼试剂，醛和酮化合物显黄色。

18、36%盐酸10ml加到2.4-二硝基苯肼试剂1克在乙醇1000ml的溶液中。7.0.3%邻联二茴香胺冰乙酸溶液，醛和酮化合物显各种颜色。8. 三氯化铁试剂:酚性物质显兰绿色。15%三氯化铁的0.5N盐酸溶液。9.4 氨基安替比林一铁氤化钾试剂:酚性物质显橙红色至深红色。溶液I:2%4氨基安替比林乙醇溶液。溶液II:8%铁氤化外溶液。先喷溶液I，再喷溶液II，再用氨气熏之。10. 硝酸铈试剂:醇在黄色背景显棕色。硝酸铈铵6g溶于4N硝酸溶液100ml。11. 钒酸铵（钠）8-羟基哇啉试剂:醇在兰灰色背景显淡红色，有时需做加热。酸铵（钠）溶液1ml和25%8-羟基哇啉的6%乙醇溶液，1ml用苯30

19、ml振1%摇，争出灰兰色的苯溶液使用。12. 漠甲酚绿试剂:有机酸显黄色。双甲酮30mg溶于乙醇90ml，慢慢加入85%磷酸10ml，配制后的试剂放置于冷 处能用几个星期，但新配的效果较好。13. 酚一硫酸试剂:喷后110oC烤1015分钟，糖显棕色，酚3g及浓硫酸。5ml溶于乙酸95ml14.3.5-二氨基苯甲酸一硫酸试剂:喷后100oC烤15分钟，2去氧糖在日光 下显红棕色，在紫外光下显黄绿色萤光。甲基红1g及漠酚兰3g溶于95%乙醇1000ml。15. 漠粉兰指示剂，显黄色。0.04mol/L漠酚兰乙醇溶液，用氢氧化钠溶液调至 微碱性。16. 漠甲酚绿指示剂:如展开剂中含乙酸，则喷前薄层

20、在120oC烘烤除去，在兰 色背景上显黄色。漠甲酚绿0.04克溶于乙醇100ml，加0.1N氢氧化钠溶液至兰色 刚刚出现。17. 漠甲酚紫指示剂，喷前薄层在100oC烤10分钟，冷到室温后，喷显色剂。 在兰色背景上显黄色。漠甲酚紫0.04克溶于50%乙醇100ml，用0.1N氢氧化钠溶液调至pH10.0。18. 漠甲酚紫柠檬酸试剂漠甲酚紫25ml及柠檬酸100mg溶于丙酮:水（9:1）混合液100ml。19. 焦红栖溶液:在灰或灰兰色背景上白色。0.1%焦酚红水溶液：2%氢氧化钠溶液（1:1）混合。百里酚酞碱溶液:在灰或兰色背景上显红色或白色。百里酚酞50mg. 20.21. 二氯靛酚试剂:喷

21、后加热片刻，在天兰色背景上显粉红色如加热时间延生， 则钼酸转变为白色，而其色羧不变故可识别酮酸。2.6三氯靛酚0.1g溶于95%乙醇 100ml。22. 芳香胺一还原糖试剂芳香胺（如苯胺5g）和还有糖（如木糖5g）溶于95%乙醇23. 碘化物淀粉试剂:在白色或浅兰色背景上显深兰色，灵敏度为2ugo8%碘化钾溶液，2%碘酸钾溶液及1%淀粉溶液等到量混合，用前新鲜配制。24. 硝酸铈铵一引朵乙醇溶液。溶液1:10%硝酸铈铵溶液。溶液II:吲噪乙醇溶液。25. 联苯胺一亚硝酸钠试剂:喷后在紫外光灯下254毫微米观察萤光。溶液I:联苯胺2.5克溶于浓盐酸7毫升及水500ml。溶液II:10%亚硝酸溶液

22、。临用前溶液I3份和溶液II2份混合。（九）氨基酸显色剂通用试剂1. 茚三酮试剂，用于氨基酸，氨及打官司基糖，喷后110oC加热泪盈眶至显出 颜色。试剂I:茚三酮0.3g溶于下丁醇100ml中，加乙醇3ml或试剂II，茚三酮0.2g 溶于乙醇中100ml。为了使茚三酮的颜色稳定，采用下法：硝酸酶试剂:饱和硝酸酮溶液1ml与10%硝酸溶液及96%乙醇100ml混合。方法:用茚三酮剂显色后用硝酸酮试剂喷，斑点由兰紫色转成红色。2. 吲噪醍试剂:吲噪醍于乙醇100中，加冰乙酸10。3. 茚三酮-硝酸酮试剂（Moffatt-Lytle反应）喷后在电炉上烤至刚刚显色，颜 色在日光灯中逐渐加深，某些氨基酸

23、首先显出颜色，用笔立刻将色点记下，许多氨 基酸赕出特殊的颜色，不同的氨基酸显出的速度也有差别，。4.2-萘醍-4-磺酸试剂（Folin试剂）喷后在室温干燥不同的氨基产生各种颜 色。1.2萘醍-4-碘酸钠的0.62克溶于5%碳酸钠溶液100ml制备。5.氯气-联甲苯胺试剂。氯化作用，薄层放在氯气中，假如氯气要从气筒中得到的放置510分钟，假 如由1.5%高锰酸钾溶液及10%盐酸（1:1 ）的混合物制得的，则需放置520分钟，然 后将薄层置空气中顾委分钟以除去过量的氯气，再喷试剂。试剂配制:邻联甲苯胺160mg溶于乙醇酸30ml中，溶液用蒸馏水500ml稀释， 然后再加碘化钾1克。（十）糖显色剂1

24、. 茴香醛一硫酸试剂:喷后100105oC烤，各种糖显不同颜色，浓硫酸1ml加 到含茴香醛的乙醇溶液50ml中需临用前配。2.1.3-二羟基苯萘酚-硫酸试剂:在110oC予热的薄层上喷试剂几分钟后在白 色背景显不同颜色，再加热，颜色加深背景也变深。3. 苯胺一二苯胺一磷酸试剂:喷后85oC烤10分钟各种糖不同颜色。二苯胺4g，苯胺4ml及85%磷酸20ml溶于丙酮200ml中。4. 茴香胺一邻苯二甲酸试剂:喷后100oC烤10分钟。已糖显颜色。去氧已糖显 色，戊糖显红紫色，醛酸显棕色。0.1M对茴香胺和0.1M邻二甲酸的乙醇溶液。5苯胺一邻苯二钾酸试剂:喷后105110oC烤10分钟，糖显红棕

25、色。6. a-苯胺-邻苯二钾酸试剂:喷后100oC烤36分钟，多数糖显兰色。鼠李 糖显橙色，所显颜色于室温稳定23天。15%萘酚乙醇溶液21ml，浓硫酸13ml，乙醇87ml，及水8ml混匀后使用。7.3-二羟基嗪酚一磷酸试剂:喷后105oC烤510分钟，酮糖显红色，醛糖显 淡兰色。0.2%1.3-二羟基试剂：喷后120oC烤1520分钟，多数糖在白色背景上显暗红 色，继续加热则变成浅紫色。8. 百里酚及浓硫酸5ml溶于乙醇95ml。9. 双甲酮一磷酸试剂:喷后110oC烤1520分钟，仅酮显暗绿灰色。10. Kellev-Killani 试剂：（检查 a-去氧糖）配法及使用见附录二（强心甙项

26、下）11.3.5二氨基苯甲酸二盐酸1克溶于80%磷酸25毫升磷酸25毫升加水稀释至 60毫升。喷后100oC烤1015分钟，糖显棕色，在紫外光下显黄绿色萤光。12. 酚一硫酸试剂酚3克及浓硫酸5毫升溶于乙醇95毫升。喷后100oC烤1015分钟，糖显棕色。13. 对硝基苯胺一过碘酸试剂。:饱和偏高碘酸溶液1份加水2份稀释。溶液I溶液II:1%对硝基苯胺乙醇溶液4份与盐酸1份混合。先喷溶液II:放置10分钟，再喷溶液II，去氧糖显黄色，紫外先下显强萤光，再喷5%氢氧化钠醇溶液，颜色转绿乙二醇同样显色。（十一）鞣质检查鞣质的试剂除检一般酚性物试剂均能反应以外，现列出二种较专一的沉淀如下：1. 氯化钠明胺试剂取明胺1克溶于50水中，然后加1.0gNaCL使溶解后，加水稀释至100ml 即得。保存期23个月(10oC左右)。2. 铁铵明矶试液：即硫酸铁铵 FeNH4(SO4)212H2O取硫酸铁铵结晶1克加蒸馏水溶解后，使成100ml即得。MSN空间完美搬家到新浪博客特别声明：1：资料来源于互联网，版权归属原作者2:资料内容属于网络意见，与本账号立场无关3:如有侵权，请告知，立即删除。