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1、色谱法简介色谱法简介色谱法的历史色谱法的历史色谱法的原理色谱法的原理色谱法的分类色谱法的分类HPLC简介简介液相色谱图术语解释液相色谱图术语解释 色谱法的简称(又叫色层法,层析法),其本质是一种分别分析方法 常见的分别方法 蒸馏 离心 电泳 过滤 超滤 色谱：目前最有效的分别方法 100多年前俄国植物学家Tswett分别植物色素时采用的实验方法，他将植物色素的石油醚提取液倒入装有碳酸钙的直立玻璃管,再参与石油醚使其自在流下,结果色素中各组份相互分别构成各种不同颜色的谱带 Tswett用希腊语chroma(色)和graphos(谱)描画他的实验方法，即如今的Chromatography(色谱法)
2、1906年正式命名(见诸文献)20世纪30年代开场广泛研讨和运用 -主要是气候色谱的运用 高效液相色谱法的广泛运用始于20世纪70年代 是利用混合物中各组份在不同的两相中溶解,分配,吸附等化学作用性能的差别,当两相作相对运动时,使各组分在两相中反复多次遭到上述各作用力而到达相互分别 两相中有一相是固定的,叫作固定相(Stationary Phase),有一相是流动的,称为流动相(Mobile Phase),流动相又叫洗脱剂,溶剂相(Phase):物理化学术语,特指在某一系统中,具有一样成分及一样物理、化学性质的均匀物质部分。各相之间有明显可分的界面 分别是一个物理过程。固定相(Stationa
3、ry Phase)流动相(Mobile Phase)进样(Injection)洗脱(Elution)相互作用(Interaction)按分别过程的机理分:吸附色谱(Absorption Chromatography)根据样品组分对活性固定相外表吸附亲和力的不同实现分别 分配色谱(Partition Chromatography)分别基于样品组分在固定相和流动相中的溶解度(分配系数)不同 离子交换色谱(Ion Exchange Chromatography)根据样品组份离子交换亲和力的差别分别,简称离子色谱(IC)体积排除色谱(Size Exclusion Chromatography)GPC(
4、Gel Permeation Chromatography)固定相是疏水性凝胶,流动相是有机溶剂 GFC(Gel Filtration Chromatography)固定相是亲水性凝胶,流动相是水溶液 按流动相和固定相的相对极性分:正相色谱(Normal Phase Chromatography)：固定相的极性大于流动相 反相色谱(Reversed Phase Chromatography)：固定相的极性小于流动相 有机化合物的极性：分子间作用力(静电引力,偶竭力,色散力,氢键力)综合表现的一种描画 高效液相色谱法 HPLC(High Performance Liquid Chromatogr
5、aphy)是一种区别于经典液相色谱,基于仪器方法的高效能分别手段:高性能色谱柱,高精度输液泵,高灵敏度检测器 色谱峰(Peak):色谱柱流出组分经过检测器时产生的呼应信号 峰底(Peak Base):峰的起点与终点之间衔接的直线 峰高(Peak Height):峰最大值到峰底的间隔 切线峰宽(Peak Width):在峰两侧拐点处所作切线与峰底相交两点之间的间隔 半(高)峰宽(Peak Width at Half Height):经过峰高的中点作平行于峰底的直线,其与峰两侧相交两点之间的间隔 峰面积(Peak Area):峰与峰底之间的面积,又称呼应值 规范偏向()(Standard Erro
6、r):0.607倍峰高对应峰宽的一半 拖尾峰(Tailing Peak):后沿较前沿平缓的不对称峰 前伸峰(Leading Peak):前沿较后沿平缓的不对称峰 鬼峰(Ghost Peak):并非由试样所产生的峰,亦称假峰 基线(Baseline):在正常操作条件下,仅由流动相所产生的呼应信号 基线飘移(Baseline Drift):基线随时间定向的缓慢变化 基线噪声(N)(Baseline Noise):由各种要素所引起的基线动摇 谱带扩展(Band Broadening):由于纵向分散,传质阻力等要素的影响,使组分在色谱柱内挪动过程中谱带宽度添加的景象 死时间(t0)(Dead time):不被固定相滞留的组分,从进样到出现峰最大值所需的时间 保管时间(tR)(Retention time):组分从进样到出现峰最大值所需的时间 死体积(V0)(Dead volume):不被固定相滞留的组分,从进样到出现峰最大值所需的流动相体积 保管体积(VR)(Retention volume):组分从进样到出 现峰最大值所需的流动相体积谢 谢！
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