吉林大学2022年3月“药学”《生物制药学》平时作业一(答案参考)试卷号:10

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1、书山有路勤为径,学海无涯苦作舟! 住在富人区的她吉林大学2022年3月“药学”生物制药学平时作业一(答案参考)一.综合考核(共45题)1.下列哪种物质可以用作固定化酶交联的试剂?()A.乙醇B.乙酸C.戊二醛D.乙酸乙酯参考答案:C2.不属于氮源的是()。A.硫酸铵B.甘油C.硝酸铵D.氯化铵参考答案:B3.基因工程药物质量控制包括哪几个方面?参考答案:(1)蛋白质含量的测定(2)蛋白质纯度检测(3)蛋白质Mr测定(4)蛋白质等电点测定(5)蛋白质序列分析(6)内毒素分析,宿主蛋白液和酸残留分析4.酶化学修饰(名词解释)参考答案:通过主链有切割、剪切和侧链基团有化学修饰对酶蛋白进行分子改造,以

2、改变其理化性质和生物活性。这种应用化学方法对酶分子施行种种“手术”的技术。5.下列细胞破碎方法哪个不属于机械法?()A.高压匀浆B.高速珠磨C.超声波破碎D.冻结融化法参考答案:D6.上皮型细胞的特点及来源。参考答案:上皮型细胞的特点:细胞呈扁平不规则多角形,中央有圆形核,细胞彼此紧密相连成单层膜。生长时呈膜状移动,处于膜边缘的细胞总与膜相连,很少单独行动。起源于内、外胚层的细胞如皮肤表皮及其衍生物、消化管上皮、肝胰、肺泡上皮等皆成上皮型形态。上皮型细胞来源于外胚层,内胚层细胞(个别例外),类似体内的上皮细胞,扁平,不规则多角形,中有圆形核。如皮肤及其衍生物,消化道上皮,肺泡上皮,上皮性肿瘤。

3、7.应用多孔微载体培养法大规模培养动物细胞的优点?参考答案:微载体系统(microcarrier symem rnMCS)用于动物细胞大规模培养具有显著的优点:(1)兼具单层培养和悬浮培养的优势,且是均相培养;(2)细胞所处环境均一,放大容易;(3)环境条件(温度、PH、cO2, rnP02等)容易测量;(4)具有较高的表面积体积比;(5)培养操作可系统化、自动化,降低了污染发生的机会。经过二十几年的发展,该技术较中空纤维(hollow fiber)、微囊(microencapsu: rnlation)等发展得更为完善和成熟。目前生产规模已达几千升甚至上万升;而且细胞培养的密度也很高批式培养可

4、达5610 cells/ rnml;灌流培养可达410 cells /ml。8.简述色谱技术的种类。参考答案:色谱法有许多种类,从不同的角度,有不同的分类方法。(1)按两相所处的状态分为气液色谱、气固色谱、液固色谱、液液色谱。(2)按色谱分离过程的机理分为吸附色谱、气液分配色谱、离子交换色谱。(3)按固定相形式的不同分为柱色谱、纸色谱、薄层色谱。(4)按操作形式不同分为冲洗法、顶替法、前沿法。9.影响目的基因在酵母中表达的因素。参考答案:(1)外源基因的拷贝数(2)外源基因的表达效率(3)表达产物的稳定性(4)细胞代谢负荷(5)工程菌的培养条件10.生物技术制药(名词解释)参考答案:是指运用微

5、生物学、生物学、医学、生物化学等的研究成果,从生物体、生物组织、细胞、体液等,综合利用微生物学、化学、生物化学、生物技术、药学等科学的原理和方法进行药物制造的技术。11.超滤膜截留的主要是()。A.悬浮物颗粒B.一价离子C.胶体和生物大分子D.溶质参考答案:C12.应用微囊化培养法大规模培养动物细胞的优点?参考答案:(1)可防止细胞在培养过程中受到物理损伤。(2)活性蛋白不能从囊中自由出入半透膜,从而提高细胞密度和产物含量,并方便分商纯化处理。13.列举5种物理诱变剂。参考答案:物理诱变剂主要有:紫外线,ARTP,X射线,-射线,快中子,激光,微波,离子束等。14.应用贴壁培养法大规模培养动物

6、细胞的特点?参考答案:贴壁培养(attachment rnculture)是指细胞贴附在一定的固相表面进行的培养。生长特性贴壁依赖型细胞在培养时要贴附于培养(瓶)器皿壁上,细胞一经贴壁就迅速铺展,然后开始有丝分裂,并很快进入对数生长期。一般数天后就铺满培养表面,并形成致密的细胞单层。贴壁培养的优点:a、容易更换培养液;细胞紧密黏附于固相表面,可直接倾去旧培养液,清洗后直接加入新培养液。b、容易采用灌注培养,从而达到提高细胞密度的目的;因细胞固定表面,不需过滤系统。c、当细胞贴壁于生长基质时,很多细胞将更有效的表达一种产品。15.固定化酶对高分子底物的活性比游离酶明显下降。()A.错误B.正确参

7、考答案:B16.改形抗体(名词解释)参考答案:指利用基因工程技术,将人抗体可变区(V)中互补性决定区(CDR)AA序列改换成鼠源单抗CDR序列,重构成既具有鼠源性单抗的特异性又保持抗体亲和力的人源化抗体17.接触抑制(名词解释)参考答案:接触抑制是将多细胞生物的细胞进行体外培养时,分散贴壁生长的细胞一旦相互汇合接触,即停止移动和生长的现象。细胞增殖到一定程度,也就是互相挨在一起的时候,糖蛋白识别了这种信息,就会使细胞停止继续繁殖,这种现象就叫做接触抑制。18.加热将增大发酵液体的粘度,降低过滤速率。()A.错误B.正确参考答案:A19.高密度发酵(名词解释)参考答案:一般是指培养液中工程菌的菌

8、体浓度在50gDCW/L以上的发酵过程,理论上的最高值可达200gDCW/L。20.下列各常用载体的装载量排列顺序,正确的是()。A.Cosmid l-DNA PlasmidB.l-DNA Cosmid PlasmidC.Plasmid l-DNA CosmidD.Cosmid Plasmid l-DNA参考答案:A21.密度抑制(名词解释)参考答案:细胞接触汇合成片后,只要营养充分,细胞仍能进行增殖分裂,但当细胞密度达到一定程度后,营养相对缺乏,代谢产物增多,发生抑制现象。22.酶工程(名词解释)参考答案:酶的生产与应用的技术过程称为酶工程。它是利用酶的催化作用进行物质转化的技术,是将酶学理

9、论与化工技术、微生物技术结合而形成的新技术,是借助工程学手段利用酶或细胞、细胞器的特定功能提供产品的一门科学。23.发酵过程的溶氧浓度的控制。参考答案:供氧方面:在实际生产中通常从提高氧的容积氧传递系数KL着手,提高设备的供氧能力。除增加通气量外,一般是改善搅拌条件。通过提高搅拌转速或通气流速、降低发酵液的黏度等来提高KL值,从而提高供氧能力。改变搅拌器直径或转速可增加功率输出,从而提高值。另外,改变挡板的数目和位置,使搅拌时发酵液流态发生变化,也能提高值。近年来,通过加入传氧中间介质来提高生物应用的传氧系数的方法已引起了广泛关注。传氧中间介质有血红蛋白、石蜡等。耗氧方面:发酵过程的耗氧量受菌

10、体浓度、营养基质的种类与浓度、培养条件等因素影响,其中以菌体浓度的影响最为明显。通过营养基质浓度来控制菌的比生长速率,使其保持在比临界氧浓度略高一点的水平进行发酵,达到最适菌体浓度,这是控制最适溶解氧浓度的重要方法。如青霉素发酵,就是通过控制补加葡萄糖的速率来控制菌体浓度,从而控制溶解氧浓度。24.在医药和食品工业中多采用聚丙烯酸类阴离子絮凝剂作为絮凝剂。()A.错误B.正确参考答案:B25.微管结合蛋白MAP的主要功能是()。A.促进微管组装B.增加微管稳定性C.促进微管聚集成束D.减弱微管稳定性参考答案:ABC26.连续发酵(名词解释)参考答案:连续发酵是指以一定的速度向发酵罐内添加新鲜培

11、养基,同时以相同速度流出培养液,从而使发酵罐内的液量维持恒定的发酵过程。27.基因工程药物按生理功能和用途可以分为哪几类?()A.治疗药物B.预防药物C.检验药物D.诊断药物参考答案:ABD28.我国已批准上市的基因工程药物和疫苗中适应症为类风湿的是()。A.干扰素B.红细胞生成素C.重组链激酶D.碱性成纤维细胞参考答案:A29.悬浮培养(名词解释)参考答案:悬浮培养指的是一种在受到不断搅动或摇动的液体培养基里,培养单细胞及小细胞团的组织培养系统,是非贴壁依赖性细胞的一种培养方式。30.Fv抗体片段(名词解释)参考答案:Fv抗体片段是一种小分子的基因工程抗体。是用短肽将抗体的重链可变区和轻链可

12、变区连接而成,具有抗原结合能力。31.下列哪种试剂是用于去除发酵液中的Fe2+?()A.草酸B.三聚磷酸钠C.黄血盐D.海藻酸钠参考答案:C32.离子交换层析(名词解释)参考答案:离子交换层析(ion-exchange rnchromatography,IEC)是在生物大分子提纯中得到最广泛应用的方法之一。离子交换层析分离蛋白质是根据在一定pH条件下,蛋白质所带电荷不同而进行的分离方法。常用于蛋白质分离的离子交换剂有弱酸型的羧甲基纤维素(CM纤维素)和弱碱型的二乙基氨基乙基纤维素(DEAE纤维素)。前者为阳离子交换剂,后者为阴离子交换剂。33.疏水层析的目的是()。A.进一步去除病毒B.去除沉

13、淀物及病毒C.去除残余的杂蛋白D.与多聚体分离参考答案:C34.用于药物生产的动物细胞包括哪几类?参考答案:元代细胞,二倍体细胞系,转化细胞系,融合细胞系。35.细胞破碎方法包括哪几种?参考答案:(1)高速组织捣碎将材料配成稀糊状液,放置于筒内约1/3体积,盖紧筒盖,将调速器先拨至最慢处,开动开关后,逐步加速至所需速度。此法适用于动物内脏组织、植物肉质种子等。(2)玻璃匀浆器匀浆先将剪碎的组织置于管中,再套入研杆来回研磨,上下移动,即可将细胞研碎,此法细胞破碎程度比高速组织捣碎机为高,适用于量少和动物脏器组织。(3)超声波处理法用一定功率的超声波处理细胞悬液,使细胞急剧震荡破裂,此法多适用于微

14、生物材料,用大肠杆菌制备各种酶,常选用50-100毫克菌体/毫升浓度,在1KG至10KG频率下处理10-15分钟,此法的缺点是在处理过程会产生大量的热,应采取相应降温措施。对超声波敏感和核酸应慎用。(4)反复冻融法将细胞在-20度以下冰冻,室温融解,反复几次,由于细胞内冰粒形成和剩余细胞液的盐浓度增高引起溶胀,使细胞结构破碎。(5)化学处理法有些动物细胞,例如肿瘤细胞可采用十二烷基磺酸钠(SDS)、去氧胆酸钠等细胞膜破坏,细菌细胞壁较厚,可采用溶菌酶处理效果更好。无论用哪一种方法破碎组织细胞,都会使细胞内蛋白质或核酸水解酶释放到溶液中,使大分子生物降解,导致天然物质量的减少,加入二异丙基氟磷酸

15、(DFP)可以抑制或减慢自溶作用;加入碘乙酸可以抑制那些活性中心需要有疏基的蛋白水解酶的活性,加入苯甲磺酰氟化物(PMSF)也能清除蛋白水解酥活力,但不是全部,还可通过选择pH、温度或离子强度等,使这些条件都要适合于目的物质的提取。36.基因工程(名词解释)参考答案:是指不经过有性过程,将外源DNA导入植物,获得可遗传的变异,以选育带目的性状的优良品种的育种技术。37.人-鼠嵌合抗体(名词解释)参考答案:将鼠源抗体的可变区与人源抗体的恒定区融合而制成的抗体。其具有鼠源抗体结合抗原的特异性和亲和力,同时降低了鼠源抗体对人体的免疫原性。38.简述噬菌体抗体库技术的特点。参考答案:(1)模拟天然全套

16、抗体库(2)避免使用人工免疫和杂交瘤技术(3)可获得高亲合力的人源化抗体39.蛋白质在其等电点时溶解度最大。()A.错误B.正确参考答案:A40.l-DNA体外包装的上下限是天然l-DNA长度的()。A.25-50%B.50-100%C.75-100%D.75-105%参考答案:D41.下列哪种物质对头孢菌素C的生物合成具有诱导作用?()A.缬氨酸B.苯乙酸C.苯乙酰胺D.L-甲硫氨酸参考答案:D42.某一重组质粒(7.5kb)的载体部分有2个SmaI酶切位点。用SmaI酶切后凝胶电泳上出现4条长度不同的条带,其长度总和与已知数据吻合,该重组质粒中插入的外源DNA片段上的SmaI酶切位点共有(

17、)。A.5个B.4个C.3个D.2个参考答案:D43.近10年是生物技术迅速发展的时期,主要有哪些方面的进展?()A.基础研究不断深入B.新产品不断出现C.新试剂、新技术不断出现D.新型生物反应器和新分离技术不断出现参考答案:ABCD44.体外培养动物细胞的特点。参考答案:与体内仍有相似-体外培养的细胞仍存在细胞和细胞、细胞和基质的相互关系,但有不同相对孤立、相对单一失去原有组织结构和细胞形态分化减弱或不显。一般来说,动物细胞体外培养需要满足以下条件:(1)无毒的环境(2)无菌的环境(3)培养液中需加血浆(4)温度与动物体温相近(5)加CO2维持培养液的pH值。45.线粒体的超微结构上可分为()。A.外膜B.内膜C.膜间隙D.基质参考答案:ABCD

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